瞬时受体电位通道 A1促进盆腔神经损伤小鼠结肠动力恢复的实验研究

目的探讨瞬时受体电位通道A1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPAl)在去盆腔神经支配(pelvic nerve denervation,PND)小鼠结肠动力适应性恢复中的作用。方法将108只C57小鼠采用随机数字表法分为两组(n=54):PND模型组、假手术组。两组依据干预措施分别再分为3组(n=18):无干预组、TRPA1激动剂(姜黄素)处理组、TRPA1拮抗剂(HC-030031)处理组。另将30只TRPA1基因敲除小鼠随机分为2组(n=15):PND模型组、假手术组。建立PND小鼠模型,术中盲肠预置管以进行结肠传输试验。结肠传输功能分别在术后第1、3、7天测定。结果与假手术组相比,PND模型组小鼠术后第1天传输功能显著降低(P<0.001),术后第3天的结肠传输功能有恢复趋势但仍然降低(P=0.040),至第7天,两组传输功能的差异无统计学意义(P=0.073)。经TRPA1激动剂(姜黄素)干预后,与对照组(无干预假手术组)相比,干预后假手术组结肠传输功能明显增强(P<0.001),PND模型组小鼠术后第1天和第3天的结肠传输功能无差异(P=0.304、0.065),至第7天,PND模型组传输功能显著增高(P=0.001)。相反,TRPA1拮抗剂(HC-030031)干预后,PND模型组与对照组相比,小鼠术后第1、3、7天的结肠传输功能均显著下降(P<0.05),结肠传输功能无恢复趋势。对TRPA1基因敲除小鼠观察到的结果与应用TRPA1拮抗剂的结果一致。免疫组化结果显示:TRPA1表达于小鼠结肠黏膜,小鼠去盆腔神经支配后,TRPA1出现先下降、后逐渐升高的适应性恢复趋势。结论小鼠去盆腔神经支配后存在结肠动力适应性恢复现象,TRPA1表达于结肠黏膜,可显著促进PND小鼠的结肠动力恢复。

远程手术在胃肠外科领域应用的初步探索

远程手术是利用通信技术和机器人系统实施异地手术的一种新兴方式。近年来,随着通信技术和国产机器人手术系统的研发与提升,国内远程手术快速发展,相继在泌尿外科、肝胆外科及骨科等领域得到应用,但在胃肠外科领域报道较少。笔者结合前期开展的北京和三亚两地之间的远程胃肠外科手术实践,对远程手术在胃肠外科领域的应用现状和发展前景做一梳理和阐述。

超远程手术机器人辅助直肠癌根治术临床初步研究

目的探讨国产手术机器人系统联合5G通信技术行超远程机器人辅助直肠癌根治术的安全性及可行性。方法2024年1月4日,中国人民解放军总医院普通外科医学部在北京市与三亚市之间(距离约3000 km)应用国产手术机器人系统完成国内首例超远程机器人辅助直肠癌根治术。结果病人男性,66岁,因“间断腹痛、腹胀1个月余”入院,经肠镜检查及病理诊断为直肠癌,有明确手术指征,无明确手术禁忌证。2024年1月4日,病人于全麻下行超远程机器人辅助直肠癌根治术,手术过程顺利流畅,无延迟现象,无手术并发症。术中出血量20mL,手术时间90 min。术后第3天排气,第4天进食流食,术后第7天出院。术后病理检查结果提示淋巴结清扫彻底(1/15),直肠系膜切除完整,环周切缘及上下切缘均未见癌。结论初步证明5G通信技术支持下超远程机器人辅助直肠癌手术安全可行,值得进一步探讨和实践。

去盆腔神经支配小鼠模型的建立

目的构建去盆腔神经支配（PND）小鼠模型并进行验证。方法（1）构建模型：选取72只健康SPF级雄性C57的7周龄小鼠，体质量（25 ± 1）g，随机分为PND模型组和假手术组各36只。PND模型组参照PND大鼠模型的建立方法，麻醉小鼠后，取下腹正中切口，解剖显微镜下用棉签在前列腺后下方钝性剥离出盆腔神经，用显微剪剪断，并术后每天两次协助小鼠排尿；假手术组有意显露盆腔神经，但不剪断。（2）检测模型：两组各随机选取18只，进行结肠传输试验，测定结肠传输比例（结肠亚甲蓝染色部分/结肠总长度）；剩余小鼠分别进行内脏敏感性试验，观察并记录小鼠腹外斜肌肌电图（EMG）的变化。结果两组中各有3只小鼠死亡，均死于结肠传输试验。PND组存活的33只小鼠术后都存在明显的膀胱膨大，需要术后按摩膀胱协助排尿。结肠传输试验显示，假手术组小鼠术后第1、3和7天的结肠传输比例分别为（0.495 0 ± 0.385 8）%、（0.638 6 ± 0.129 3）%和（0.647 0 ± 0.108 8）%，前后差异未见统计学意义（F= 3.647，P= 0.058）；而PND模型组小鼠术后第7天结肠传输比例[（0.604 4 ± 0.176 8）%]明显高于术后第3天[（0.387 6 ± 0.136 4）%，P= 0.022]和第1天[（0.254 2 ± 0.037 1）%，P= 0.001]，结肠传输功能随时间呈恢复趋势（F= 9.143，P= 0.004）。与假手术组相比，PND模型组小鼠术后第1天和第3天的结肠传输功能均显著降低（均P 〈 0.05），至第7天，两组传输功能的差异无统计学意义（P= 0.659）。内脏敏感性试验显示，假手术组小鼠术后第1、3和7天的内脏敏感性分别为24.280 8 ± 9.556 6、33.672 5 ± 7.954 8和43.908 6 ± 12.187 5，前后差异有统计学意义（F= 5.722，P= 0.014）。PND模型组小鼠术后第1、3和7天的内脏敏感性分别为11.760 9 ± 2.104 9、21.841 5 ± 8.152 7和26.231 0 ± 4.223 5，差异亦有统计学意义（F= 11.154，P= 0.001），术后第3天与术后第7天敏感性明显高于术后第1天（P= 0.006和P 〈 0.001），术后第7天与术后第3天的差异亦无统计学意义（P= 0.183）。与假手术组相比，PND模型组小鼠术后第1、3、7天内脏敏感性均显著降低（均P 〈 0.05）。结论去盆腔神经支配后，小鼠结肠动力和内脏敏感性减弱，但随时间推移可逐渐恢复，提示小鼠PND模型建立成功。

去盆腔神经支配对大鼠远端结肠黏膜瞬时受体电位通道V1表达的影响

目的：探讨去盆腔神经支配（PND）对大鼠远端结肠黏膜瞬时受体电位通道V1（TRPV1）的影响。 方法：采用实验研究方法。将108只成年雄性大鼠按数字表法随机分成对照组、假手术组及PND组3组：（1）对照组36只，大鼠不做特殊处理，常规饲养；（2）假手术组36只，大鼠开腹后旷置15 min，不施行手术，关闭腹腔；（3）PND组36只，大鼠开腹后剥离出盆腔神经，显微剪剪断，缝合切口，关闭腹腔。采用免疫组织化学染色、Western blot检测各组大鼠术后第1、3、7天远端结肠黏膜中TRPV1蛋白表达，反转录实时定量PCR（RTqPCR）检测各组大鼠术后第1、3、7天远端结肠黏膜中TRPV1 mRNA水平。正态分布的计量资料以±s表示。重复测量数据采用重复测量方差分析。同时相点组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用独立样本t检验。 结果：（1）免疫组织化学染色检测TRPV1表达情况：对照组大鼠远端结肠黏膜TRPV1平均光密度值术后第1、3、7天分别为0.180±0.016、0.179±0.015、0.183±0.026，3者比较，差异无统计学意义（F=0.088，P〉0.05）。假手术组大鼠远端结肠黏膜TRPV1平均光密度值术后第1、3、 7天分别为0.132±0.017、0.160±0.023、0.173±0.020，3者比较，差异有统计学意义（F=8.699，P〈0.05）。PND组大鼠远端结肠黏膜TRPV1平均光密度值术后第1、3、7天分别为0.057±0.009、0.122±0.016、0.180±0.016，3者比较，差异有统计学意义（F=113.315，P〈0.05）。对照组、假手术组及PND组大鼠远端结肠黏膜TRPV1平均光密度值术后第1、3天比较，差异均有统计学意义（F=108.960，15.218，P〈0.05）。术后第 1天对照组分别与假手术组、PND组比较，差异均有统计学意义（t=5.025，15.979，P〈0.05）；假手术组与PND组比较，差异有统计学意义（t=9.590，P〈0.05）。术后第3天对照组与假手术组比较，差异无统计学意义（t=1.670，P〉0.05）；对照组与PND组比较，差异有统计学意义（t=6.543，P〈0.05）；假手术组与PND组比较，差异有统计学意义（t=3.361，P〈0.05）。3组大鼠远端结肠黏膜TRPV1平均光密度值术后第7天比较，差异无统计学意义（F=0.518，P〉0.05）。（2）Western blot检测TRPV1表达情况：对照组大鼠远端结肠黏膜TRPV1蛋白相对表达量术后第1、3、7天分别为1.02±0.13、1.00±0.15、1.00±0.10，3者比较，差异无统计学意义（F=0.084，P〉0.05）。假手术组大鼠远端结肠黏膜TRPV1蛋白相对表达量术后第1、3、7天分别为0.51±0.13、0.93±0.14、1.01±0.16，3者比较，差异有统计学意义（F=20.930，P〈0.05）。PND组大鼠远端结肠黏膜TRPV1蛋白相对表达量术后第1、3、7天分别为0.30±0.10、0.70±0.10、1.07±0.16，3者比较，差异有统计学意义（F=61.441，P〈0.05）。对照组、假手术组及PND组大鼠远端结肠黏膜TRPV1蛋白相对表达量术后第1、3天比较，差异均有统计学意义（F=58.014，8.841，P〈0.05）。术后第1天对照组分别与假手术组、PND组比较，差异均有统计学意义（t=6.677，11.145，P〈0.05）；假手术组与PND组比较，差异有统计学意义（t=3.287，P〈0.05）。术后第3天对照组与假手术组比较，差异无统计学意义（t=0.798， P〉0.05）；对照组与PND组比较，差异有统计学意义（t=4.127，P〈0.05）；假手术组与PND组比较，差异有统计学意义（t=3.398，P〈0.05）。3组大鼠远端结肠黏膜TRPV1蛋白相对表达量术后第7天比较，差异无统计学意义（F=0.428，P〉0.05）。（3）RTqPCR检测TRPV1表达情况：对照组大鼠远端结肠黏膜TRPV1 mRNA水平术后第1、3、7天分别为1.00±0.15、1.10±0.21、1.09±0.18，3者比较，差异无统计学意义（F=0.489，P〉0.05）。假手术组大鼠远端结肠黏膜TRPV1 mRNA水平术后第1、3、7天分别为0.58 ±0.12、0.99±0.19、1.13±0.23，3者比较，差异有统计学意义（F=13.964，P〈0.05）。PND组大鼠远端结肠黏膜TRPV1 mRNA水平术后第1、3、7天分别为0.31±0.10、0.67±0.12、1.09±0.19，3者比较，差异有统计学意义（F=44.642，P〈0.05）。对照组、假手术组及PND组大鼠远端结肠黏膜TRPV1 mRNA水平术后第1、3天比较，差异均有统计学意义（F=44.653，9.700，P〈0.05）。术后第1天对照组分别与假手术组、PND组比较，差异 均有统计学意义（t=5.233，9.264，P〈0.05）；假手术组与PND组比较，差异有统计学意义（t=4.127，P〈0.05）。术后第3天对照组与假手术组比较，差异无统计学意义（t=0.995，P〉0.05）；对照组与PND组比较，差异有统计学意义（t=4.411，P〈0.05）；假手术组与PND组比较，差异有统计学意义（t=3.505，P〈0.05）。3组大鼠远端结肠黏膜TRPV1 mRNA水平术后第7天比较，差异无统计学意义（F=0.099，P〉0.05）。 结论：PND后，大鼠远端结肠黏膜TRPV1表达显著下调，但随时间推移逐步回升，这与盆腔神经损伤后结肠传输功能先减慢后逐步恢复的趋势一致。