问题引导下的自主学习模式在预防医学教学中的运用

以天津医科大学预防医学专业本科生为研究对象,选取4课时实施问题引导下的自主学习模式。通过问卷调查发现学生对该模式的满意度高达92%,同时超过80%的学生对在自主学习中的表现表示满意,认为该模式对知识的掌握和学习能力的培养有促进作用。将问题引导下的自主学习模式运用于学时有限的大班教学中,能减轻学生的学习负担,培养灵活运用所学知识解决问题能力,具有较高的认可度。

山姜素在人肝微粒体的葡萄糖醛酸化反应研究

目的研究体外肝微粒体孵育体系中山姜素的葡萄糖醛酸化代谢情况,鉴定参与山姜素葡萄糖醛酸化代谢的UGT亚型。方法用体外肝微粒体孵育体系,用HPLC-UV检测方法,检测山姜素的葡萄糖醛酸化代谢情况。将代谢产物进行纯化后,用质谱(MS)和核磁共振(NMR)法进一步鉴定其结构。用商业化重组表达的UGT单酶,鉴定代谢产物的结构和归属可能参与山姜素葡萄糖醛酸化代谢反应的葡萄糖醛酸转移酶(UGTs)亚型。结果山姜素葡萄糖醛酸代谢产生一个代谢产物,经结构鉴定为山姜素-氧-单葡萄糖醛酸化产物。人肝微粒体代谢山姜素的动力学行为,符合米方程且动力学参数:Vmax=(101.9±3.0)nmol·min-1·mg-1·pro,Km=(40.6±3.6)μmol·L-1。UGT1A1、UGT1A3、UGT1A9和UGT2B15均参与了山姜素的葡萄糖醛酸化反应。结论山姜素在人肝微粒体孵育体系中会被代谢成为一个单葡萄糖醛酸化产物,且归属了参与的UGT酶。

香芹酚在人肝和肠道葡萄糖醛酸化代谢中代谢酶的鉴定

葡萄糖醛酸化是香芹酚的一个重要代谢途径。至今还没有人体内有关香芹酚葡萄糖醛酸化的代谢特征和关键酶的研究报道。本论文利用人肝微粒体（HLM），人肠微粒体（HIM），12个人源性重组葡萄糖苷酸转移酶单酶（UGT）和不同实验动物的肝微粒体对香芹酚的葡萄糖醛酸化的代谢特征进行了研究。香芹酚分别与人肝微粒体，人肠微粒体，UGTIA3，UGTIA6，

己烯雌酚对人肝微粒体内CYP3A4和CYP2C9酶的抑制作用

目的体外实验考察己烯雌酚(DES)对细胞色素P450 3A4(CYP3A4)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)活性的抑制作用,以评估DES通过抑制这两个重要的细胞色素P450(CYP)亚型而引发药物-药物相互作用的可能性。方法混合人肝微粒体与不同浓度的DES(或阳性抑制剂)、CYP3A4或CYP2C9的探针底物在37℃条件下孵育相应的反应时间后,用高效液相色谱-紫外吸收法观察探针底物的代谢产物的生成率,计算IC50值。选取不同的探针底物浓度(覆盖Km值)和DES浓度(覆盖IC50值)测定出相应的代谢速率,用Lineweaver-Burk作图和Dixon作图来判断可逆抑制类型,计算抑制动力学参数Ki。单点失活法测定DES对CYP3A4和CYP2C9是否有基于机制的抑制。结合Ki值和DES的最大血药浓度(cmax)预测体内产生的药物-药物相互作用。结果 DES对CYP3A4和CYP2C9体现出浓度依赖型的抑制,相应的IC50值分别为7.4±1.0和(3.8±0.1)μmol.L-1。DES对CYP3A4和CYP2C9抑制的Dixon作图的交点都在第二象限,而Lineweaver-Burk作图的交点都在纵轴上,这两方面证据共同证实DES对CYP3A4和CYP2C9抑制属于竞争型抑制。CYP3A4和CYP2C9的Ki值分别为4.4和3.0μmol.L-1。DES对CYP3A4和CYP2C9不存在基于机制的抑制。利用DES的cmax计算出对CYP3A4和CYP2C9代谢底物AUC变化倍数分别为4.3和6.2。结论 DES对CYP3A4和CYP2C9的活性有较强的抑制作用,在临床常用的剂量条件下,很容易诱导药物-药物相互作用。

超高效液相与质谱联用同时检测胆汁酸含量

目的：通过建立快速高效的UFLC—MS／MS方法同时检测分析胆汁酸类化合物，以便于更好地定量分析胆汁酸的在体水平．方法：以甘草次酸为内标，采用超高效液相与质谱联用技术同时测定13个胆汁酸类化合物，并评价该方法的精密度，准确度，及线性范围．结果：建立了能同时检测以甘草次酸为内标13个胆汁酸化合物的UFLC／MS／MS检测方法，各成分分离度好，13种胆汁酸的浓度在1～20000nmol／L的浓度范围有良好的线性关系；r在0．995—0．999之间；检出限为0．065—9．37nmol／L；方法的日内和日间准确度在97％-105％之间，日间日内精密度均小于8％．结论：建立的UFLC／MS／MS方法灵敏度高，特异性好，适用于胆汁酸体外的分析研究．

基于葡萄糖醛酸化酶的抑制毒副作用研究

由尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）催化的葡萄糖醛酸结合反应是生物体内重要的Ⅱ相代谢途径，化合物可以直接与葡糖醛酸结合，也可以经氧化代谢后再与葡糖醛酸结合，是多种化合物的清除与解毒的机制，包括一些内源性物质，如胆汁酸、胆红素、甾体类激素等，以及多种外源性物质，如中药、化药、食品添加剂、食物中成分等。在新药开发中，探索基于UGT代谢引起的药物相互作用也有着十分重要的作用。通常，国内外研究由CYP450酶介导的药物相互作用较多，但是随着药物代谢酶研究的进展，UGT 基因的克隆和基因产物的成功表达，人们对UGT 的认识逐渐深入，UGT 在药物的开发中变得越来越重要。因此，近年来药物对UGT 的影响受到越来越多研究者的关注。

辽宁地区代谢病患病率的普查和癌症患者中的氨基酸代谢紊乱的研究

目的:通过采用串联质谱技术对3 363例辽宁地区成人患者进行代谢病检测,分析其代谢病的发病率和癌症患者中氨基酸代谢紊乱情况.方法:利用串联质谱技术,对辽宁地区的3 363例患者进行氨基酸、酰基肉碱及其相对应比值的检测,对代谢病患病率、各种疾病发生代谢病的概率和癌症患者中代谢病指标和预后进行分析.结果:采用串联质谱分析法测定3 363例成人患者的氨基酸和肉碱水平,确诊遗传代谢病病例1 033,其中男性612例、女性421例.阳性率是30.7%.其概率远远高于新生儿的发病率.肿瘤科室、消化科室和神经科室的患者阳性发病率较高,均高于30%.另外针对486例肿瘤患者中的299例乳腺癌患者进行分析,发现乳腺癌与谷氨酸代谢密切相关,谷氨酸代谢指标异常且降低.274例肺癌患者中组氨酸代谢较异常且降低.串联质谱方法对成人的代谢病检测对于患者早期筛查和诊断以及预后有重要的应用意义.结论:谷氨酸可作为乳腺癌患者早期诊断的一个特异性指标,同样肺癌中组氨酸的表现为低于正常下限,这个指标可以应用于肺癌的早期诊断中.这两个指标对于个体化治疗和预后也有很重要的应用价值.

妊娠期糖尿病孕妇氧化三甲胺及其相关代谢产物与胰岛素抵抗和β细胞功能的相关性分析

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清氧化三甲胺(TMAO)及其相关代谢产物与胰岛素抵抗(IR)和β细胞功能的相关性。方法本研究为横断面研究。选取2010年10月至2012年8月天津市内六城区的GDM孕妇,收集其身高、体重,并计算其孕早期体重指数(BMI);测量记录空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素、TMAO及其相关代谢产物[三甲胺(TMA)、左旋肉碱、氯化胆碱、甜菜碱]水平等资料。分别计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和稳态模型评估β细胞功能指数(HOMA-β)。根据孕早期BMI,将所有孕妇分为超重组(BMI≥24.0 kg/m^(2))和非超重组(BMI<24.0 kg/m^(2))。运用三分位数法,将孕妇的IR水平根据HOMA-IR分为低水平组(HOMA-IR<2.17)、中水平组(HOMA-IR 2.17~3.39)和高水平组(HOMA-IR>3.39);将孕妇的β细胞功能根据HOMA-β分为低水平组(HOMA-β<118.70)、中水平组(HOMA-β118.70~184.91)和高水平组(HOMA-β>184.91)。3组间比较采用方差分析、Kruskal-Wallis H检验或χ^(2)检验,采用Spearman相关和偏相关分析法分析TMAO及其相关代谢产物与HOMA-IR和HOMA-β之间的相关性。结果共纳入145例GDM孕妇,HOMA-IR高、中、低水平组分别为48、49、48例,HOMA-β高、中、低水平组也分别为48、49、48例。TMA在HOMA-IR高、中、低水平组间差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,TMA与HOMA-IR呈正相关(r=0.19,P<0.05),调整年龄、BMI后进行偏相关分析显示,两者仍呈正相关(r=0.17,P<0.05),而其与HOMA-β无相关性(P>0.05)。TMAO与HOMA-IR、HOMA-β均无相关性(P>0.05)。超重组TMA水平与HOMA-IR水平呈正相关(r=0.32,P<0.05),该相关关系在调整年龄后略有提升(r=0.43,P<0.05)。非超重组TMA水平与HOMA-IR水平无相关性(P>0.05)。结论GDM孕妇肠道菌群代谢产物TMA水平与HOMA-IR存在正相关关系,且该关联独立于年龄及孕早期BMI。

孕妇妊娠早期的氧化三甲胺及其代谢产物与超重的关联

目的探讨妊娠早期在不同的体重状态下,孕妇氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide, TMAO)及其代谢产物的分布差异,并分析TMAO及其代谢产物与超重之间的关联。方法天津市妇女儿童保健中心于2010年10月1日―2012年8月31日在天津市建立了一个由22 302名孕妇组成的妊娠队列,随后建立了以妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)作为目标疾病的巢式病例对照研究,包括243名在怀孕24~28周发展为GDM的孕妇,同时根据(年龄±1)岁进行1∶1匹配,最终纳入分析的研究对象为486名。采用液相色谱-串联质谱分析对血清TMAO及其代谢产物进行测定。将研究对象按照BMI≥24.0 kg/m^(2)及BMI<24.0 kg/m^(2)分为超重组和非超重组,通过百分位数法将TMAO及其代谢产物分为高、低水平组,采用二元Logistic回归分析模型进行分析。结果超重组的三甲胺(trimethylamine, TMA)水平高于非超重组,差异具有统计学意义(Z=-2.747,P=0.006)。Logistic回归分析模型分析显示,未调整混杂因素时,与TMA低水平的孕妇相比,TMA≥264.5 nmol/ml时超重的OR值是1.771(95%CI:1.193~2.629,P=0.005);调整混杂因素后,TMA≥264.5 nmol/ml时超重的OR值是1.734(95%CI:1.063~2.827,P=0.027)。结论妊娠早期的TMA水平与孕妇超重具有相关性,通过调节TMAO及其代谢物的水平可能为肥胖症、糖尿病等代谢综合征的控制、治疗提供新思路。