多囊卵巢综合征的中西医治疗进展

多囊卵巢综合征（PCOS）是绝经期前女性发生月经紊乱、不孕的主要病因之一,目前报道的发病率从2.2%～26%不等,不同国家或地区发病率存在较大差异[1]。2010年澳大利亚的一项流行病学调查显示,PCOS的患病率高达（17.8±2.8）%（根据2003年制定的鹿特丹标准）[2]。北医三院2010年对我国北京地区的2111名社区育龄妇女调查显示6.11%患者存在PCOS[3]。

大肠俞募穴联合八髎穴治疗出口梗阻性便秘临床观察

目的比较针刺与单纯西药治疗出口梗阻性便秘的疗效差异。方法将48例出口梗阻性便秘患者随机分为治疗组和对照组,治疗组给予大肠俞募穴联合八髎穴针刺治疗,对照组给予乳果糖口服液治疗;治疗周期为3周,治疗前后应用Bristol便秘性状评分表(BSFS)、便秘症状评分表(KESS)、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)给予各组评分以及临床疗效评价。结果治疗组治疗后BSFS评分较对照组明显升高(P<0.05),KESS、SAS以及SDS评分均较对照组明显降低(P<0.05);治疗组总有效率为85.7%(18/21),优于对照组的58.3%(14/24)(P<0.05)。结论以大肠俞募穴联合八髎穴针刺治疗能明显改善出口梗阻性便秘患者的粪便性状、便秘症状以及焦虑、抑郁状态,总有效率优于药物治疗。

健脾化痰方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及慢性炎症因子的影响

目的:建立由脱氢表雄酮诱导的PCOS大鼠模型,观察健脾化痰方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及慢性炎症因子水平的影响。方法:23日龄雌性SD大鼠皮下注射脱氢表雄酮6 mg/100 g体重/天,建立PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为4组:模型对照组、二甲双胍组、中药组(健脾化痰方)和二甲双胍+中药组,每组10只,分别给予相应药物进行干预,为期28 d。另设10只同龄SD大鼠为正常对照组。实验结束时,行腹腔糖耐量实验,测定0分、120分血糖及胰岛素水平;隔日将大鼠麻醉后下腔静脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、性激素结合球蛋白(SHBG)、白细胞介素-6(IL-6)、内脂素(visfatin)和色素上皮衍生因子(PEDF)的水平,HE染色观察大鼠卵巢的组织学改变及排卵情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清T、LH、LH/FSH、血糖、胰岛素、HOMA-IR、IL-6、PEDF水平均显著升高(P<0.05),卵巢组织HE染色光镜下可见各级发育期卵泡及黄体减少,囊性扩张的卵泡增多,卵巢颗粒细胞层数减少;与模型组比较,各治疗组大鼠血清T、LH、LH/FSH、血糖、胰岛素、HOMA-IR、IL-6、PEDF、visfatin水平均显著降低(P<0.05),FSH、SHBG水平均显著升高(P<0.05),卵巢HE染色光镜下见囊性扩张的卵泡明显减少,黄体及各级发育期卵泡增多,卵巢颗粒细胞层数增厚。结论健脾化痰方对PCOS大鼠具有明显改善胰岛素抵抗及降低慢性炎症因子水平的作用,并能够改善卵巢功能、恢复排卵。

参苓白术散加味治疗放射性肠炎30例

目的:观察参苓白术散加味治疗放射性肠炎的临床疗效及对患者生活质量的影响。方法:将符合入选标准的60例放射性肠炎患者随机分为治疗组和对照组各30例,分别给予参苓白术散加味和诺氟沙星、蒙脱石散治疗;两组均以14d为1个疗程,观察总体疗效、中医单项症状积分、肠镜疗效以及生活质量状况变化情况。结果:治疗组总体疗效、肠镜疗效均优于对照组(P<0.05),治疗组治疗后患者中医单项症状积分和生活质量改善方面均优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:参苓白术散加味治疗放射性肠炎具有较好的临床疗效。

针药结合加穴位注射对周围性面瘫近远期的疗效观察

目的观察针药结合及穴位注射治疗周围性面瘫的近期临床疗效及对后遗症发生率的影响。方法将60例急性期周围性面瘫患者,随机分为观察组与对照组各30例。两组均口服牵正散加减,对照组在此基础上进行针刺治疗,观察组进行针灸加翳风穴穴位注射甲钴胺注射液的治疗。两组患者分别于入组当天及每天治疗前由专人进行神经功能评分、分级,观察治疗的起效时间,分别于治疗1、2个疗程后进行疗效统计,并于结束治疗后半年进行随访,统计患者后遗症发生情况。结果1)观察组的治疗起效时间早于对照组(P<0.05)。2)两组的治疗起效时间与治疗1疗程和2疗程后患者的神经功能评分均呈负相关(P<0.05),与H-B分级评分成正相关(P<0.05)。3)两组临床疗效比较,治疗1疗程后观察组的痊愈率和总有效率均高于对照组(P<0.05);治疗2疗程后,观察组的痊愈率明显高于对照组(P<0.05)。4)针灸治疗后半年随访发现,观察组患者后遗症发生率低于对照组(P<0.05)。结论面瘫急性期进行针灸治疗疗效肯定,治疗时起效所需时间越短,取得的临床痊愈率和总有效率更高,后遗症发生率也越低,其中以针药结合配合翳风穴穴位注射甲钴胺注射液的疗效更佳。

甲状腺髓样癌术后淋巴转移致异位ACTH综合征:一例报告并文献复习

目的:总结一例甲状腺髓样癌术后淋巴转移所致异位ACTH综合征患者的诊治过程,结合文献对本病的发病机制、临床表现及分型、诊断和治疗加以探讨。方法:对南京市鼓楼医院内分泌科2009年收治的一例甲状腺髓样癌术后淋巴转移所致异位ACTH综合征的一例病例进行总结分析,复习相关文献,阐明本病的基本特征及研究进展。结果:甲状腺髓样癌术后淋巴转移所致异位ACTH综合征临床十分少见。充分认识其临床表现、理化检查及影像学定位,给予及早诊断和综合治疗十分重要。结论:早期发现、早期诊断、早期治疗是控制ESA的关键。

滋阴益肾法治疗早期糖尿病性肾脏病的临床研究

目的:观察滋阴益肾法对早期糖尿病性肾脏病的临床疗效。方法:42例入选患者随机分为治疗组和对照组各21例;常规治疗基础上,对照组予缬沙坦,治疗组予滋阴益肾中药和缬沙坦;12周后,观察临床疗效、尿蛋白、肾功能的变化情况。结果:治疗组临床总有效率显著高于对照组(P<0.05),症状及尿蛋白排泄改善均优于对照组(P<0.05)。结论:滋阴益肾法联合缬沙坦治疗可减少DN的早期临床症状,减少蛋白尿。

运用滋阴益肾法治疗消渴肾病

消渴肾病（糖尿病。肾病）为消渴病常见并发症之一，属中医“肾消”、“尿浊”、“虚劳”等范畴。对其病机认识多倾向于本虚标实之说，早期阴虚为本、燥热为标，随病程进展多阴损及阳、瘀血浊湿为患。基于长期跟师实践，笔者认为“消渴肾病”不论其病处何阶段，均存在“阴虚为本”格局，

PCOS患者不同中医辩证分型内分泌特征简析

目的比较PCOS患者不同中医辩证分型内分泌特征,为临床辩证施治提供客观依据。方法将入选的110例PCOS患者按中医证候随机分为肾虚型、痰湿型、肝郁型、血瘀型四组,观察一般情况,在月经第3天测取性激素六项:促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、睾酮(T)、脱氢表雄酮(DHEA-S)、性激素结合球蛋白(SHBG);空腹血糖及胰岛素水平;甲功三项:促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)。结果一般情况:痰湿型PCOS患者WHR、BMI高于肾虚型、肝郁型、血瘀型,具有统计学差异(P<0.05);性激素水平:四组在FSH、LH、PRL、T水平无统计学差异,痰湿型SHBG水平低于其他三组(P<0.05),DHEA-S高于其他三组(P<0.05);胰岛素抵抗:痰湿型FBG、F-INS、HOMA-IR明显高于其他三组(P<0.05);甲状腺功能:痰湿型患者存在亚临床甲状腺功能减退,TSH明显高于其他三组(P<0.05)。肾虚型、肝郁型、血瘀型上述指标三组之间均无统计学差异。结论 PCOS痰湿型患者较肾虚型、肝郁型、血瘀型患者存在更为严重的胰岛素抵抗、高雄激素血症、甲状腺功能减退。

葛根芩连汤对湿热型溃疡性结肠炎大鼠结肠病理损伤及Th17/Treg的影响

目的观察葛根芩连汤对湿热型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠病理损伤及Th17/Treg的影响。方法建立湿热型UC大鼠模型,随机分为葛根芩连汤低、中、高剂量组(5、10、20 g/kg),柳氮磺胺吡啶组(0.3 g/kg),灌胃给药2周。HE染色观察大鼠结肠病理变化,流式细胞仪检测外周血辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)细胞比例,计算Th17/Treg比例,Western blot法检测结肠组织中维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)蛋白表达。结果与模型组比较,葛根芩连汤低、中、高剂量组大鼠结肠病理损伤程度,外周血Th17、Treg、Th17/Treg比例,结肠组织IFN-γ表达均改善(P<0.05,P<0.01),同时可调节结肠组织RORγt、Foxp3蛋白表达,并呈一定量效关系。结论葛根芩连汤对湿热型UC大鼠的作用可能通过调控RORγt、Foxp3表达,从而改善Th17/Treg平衡来实现。

蒲地蓝消炎制剂致肝损伤8例并文献复习

目的探索蒲地蓝消炎制剂的肝脏毒性,促进临床合理用药。方法收集本院2020年1月-2021年8月因服用蒲地蓝消炎制剂出现肝损伤的患者8例。根据药物性肝损伤Roussel Uclaf因果关系评估量表进行评分,通过临床资料分析受损靶细胞的临床分型、严重程度分级及患者预后,并探讨蒲地蓝消炎制剂致肝损伤的可能原因、临床特征及危险因素。结果 8例患者RUCAM评分为6~8分,均为肝细胞损伤型,其中2例轻度,2例中度,4例重度,经治疗后均临床治愈。中药黄芩具有潜在的肝毒性,可能是蒲地蓝消炎制剂肝毒性的病因。女性、过敏体质、联合使用其他肝损伤药物以及违背中医辩证论治可能是蒲地蓝消炎制剂肝损伤的风险因素。结论临床医师和药师应重视蒲地蓝消炎制剂潜在的肝毒性,在临床使用过程中,医师应遵循中医辨证论治原则,并在用药过程中严密监测患者肝功能指标。

基于IRS1/PI3K/Akt通路探究黄蜀葵花总黄酮改善糖尿病肾脏疾病胰岛素抵抗和足细胞转分化的作用和机制

为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和足细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用和机制,并进一步揭示其科学内涵,将32只大鼠随机分为正常组、模型组、TFA组和罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组。通过“高脂饲料饲养、单肾切除以及STZ腹腔注射”等综合措施联合诱导改良型DKD大鼠模型。成模后,对于4组大鼠,每天经灌胃分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及ROS混悬液。在中、西药物干预的第8周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织等标本,进而针对DKD模型鼠IR和足细胞EMT相关的各项参数和指标进行检测和观察,包括大鼠一般情况,体质量(body weight,BW)及肾脏质量(kidney weight,KW),生化参数和IR指标,肾组织胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)1/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase,Akt)通路关键信号分子和裂隙膜结构分子蛋白表达水平,足突形态和肾小球基底膜(glomerular basement membrane,GBM)厚度,足细胞EMT标志分子和裂隙膜结构分子的表达程度以及肾小球组织形态特征等。结果显示,首先,对于DKD模型鼠,TFA和ROS均能改善一般情况、部分生化参数、肾脏外观和KW;然后对于BW、尿白蛋白(urinary albumin,UAlb)/尿肌酐(urinary creatinine,UCr)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血清甘油三酯(triglyceride,TG)、KW的改善作用,TFA和ROS相似;再者,两者均能改善IR指标,其中,对于空腹血清胰岛素(fast insulin,FIN)、IR指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)的改善作用,ROS优于TFA;其次,两者均能不同程度地改善肾组织IRS1/PI3K/Akt通路关键信号分子的蛋白表达水平和肾小球硬化,而且TFA的改善作用和ROS相似;最后,两者均能改善足细胞损伤和EMT,其中TFA的改善作用优于ROS。总之,该研究提示,肾组织IR及其IRS1/PI3K/Akt通路活性低下会诱导DKD足细胞EMT和肾小球硬化;TFA和ROS相似,其抑制DKD足细胞EMT的作用与诱导IRS1/PI3K/Akt通路活性而改善IR有关,这可能是TFA治疗DKD的科学内涵之一。该研究为TFA在糖尿病并发症领域的开发和应用提供了初步的药理学证据。

糖尿病肾脏疾病患者胰岛素抵抗与中医证候特征的回归分析

目的分析G2、A2/3期糖尿病肾脏疾病(DKD)患者胰岛素抵抗(IR)相关指标与中医证候特征的依存性,探寻DKD(G2,A2/3期)患者中医辨证规律。方法采用回顾性研究方法,收集2015年1月至2016年12月南京鼓楼医院收治的98例DKD(G2,A2/3期)患者,观察其一般临床指标、中医证候出现频率和证型分布特征,并检测其IR相关指标,包括空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIN)、空腹C肽(FCP)以及稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。对IR相关指标与中医证候特征进行多因素回归分析。结果在98例DKD(G2,A2/3期)患者中,本证包括脾肾气虚证64例、气阴两虚证20例、阴虚燥热证8例、阴阳两虚证6例;标证包含血瘀证42例、痰瘀证10例、湿热证5例、寒湿证1例;复合证型58例,其中脾肾气虚兼血瘀证共28例。与非脾肾气虚证患者相比,脾肾气虚证患者的TG和FIN、FCP、HOMA-IR明显升高,其差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,中医症状(小便频数或清长、疲乏、纳呆、腰膝酸软)与FBG、FIN升高无相关性(P<0.05)。而具有疲乏症状者FCP升高的概率是没有该症状者的7.661倍(P<0.05)。具有疲乏、小便频数或清长症状者HOMA-IR升高的概率分别是没有该症状者的10.787、5.911倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论DKD(G2,A2/3期)患者主要中医证候特征是脾肾气虚,其临床特点是IR相关指标的不同程度升高;其IR相关指标的异常升高与主要中医证候特征有依存性,可以作为中医辨证的客观证素。

黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化的作用和机制

研究表明,高血糖介导的“慢性微炎症”可以导致糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者出现“炎症性足细胞损伤”。其中,“坏死性凋亡”是新的足细胞死亡形式,与肾脏纤维化密切相关。为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善DKD足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化的作用和机制,并进一步揭示其“多途径、多靶点”的科学内涵,笔者将全部大鼠随机分为4组,即正常组、模型组、TFA组以及雷帕霉素(rapamycin,RAP)组。在改良型DKD大鼠模型成功建立后,每天经灌胃分别给予4组大鼠双蒸水、TFA混悬液以及RAP混悬液。在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织等标本,进而针对模型鼠足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化各项指标进行观察、检测和分析。结果显示,对于改良型DKD模型鼠,TFA和RAP改善了一般情况、体质量、血清肌酐、尿白蛋白以及肾脏肥大指数;改善了肾脏纤维化指标,包括肾小球组织形态特征、肾小球内纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,collagenⅠ)染色程度以及肾组织FN、collagenⅠ、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和Smad2/3蛋白表达水平;改善了足细胞损伤,包括足突形态以及肾组织中podocin、CD2AP蛋白表达水平;改善了肾脏中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)介导的足细胞坏死性凋亡,包括足细胞坏死性凋亡形态特征以及肾组织中TNF-α、磷酸化底物混合谱系激酶样蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain like pseudokinase,p-MLKL)表达程度和蛋白表达水平,其中,对于p-MLKL,RAP的作用更强;改善了肾脏中受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting serine/threonine protein kinase,RIPK)1/RIPK3/MLKL信号轴活性,包括其关键信号分子蛋白表达水平,如磷酸化受体相互作用蛋白激酶(phosphorylated receptor interacting serine/threonine protein kinase,p-RIPK)1、p-RIPK3、p-MLKL和半胱氨酸蛋白水解酶-8(cysteinyl aspartate specific proteinase-8,caspase-8),其中,对于p-RIPK1,TFA的作用更强。总之,该研究阐明:TFA通过抑制TNF-α介导的RIPK1/RIPK3/MLKL信号轴活性而减轻DKD足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化。笔者的发现为深入揭示TFA治疗DKD肾脏纤维化的科学内涵提供了新的药理学证据。

大黄蛰虫丸调控ROS介导的PI3K/Akt/FoxO4信号通路改善大鼠肝脏衰老的作用和机制

近年来的研究显示,非酒精性脂肪性肝病、肝硬化以及肝癌等常见肝病的发生和发展都与肝脏衰老(liver aging,LA)有关。基于此,为了探究传统经方——大黄蛰虫丸(Dahuang Zhechong Pills,DHZCP)多靶点地改善LA的作用和机制,笔者将24只大鼠随机均分为4组,即正常组、衰老模型组(模型组)、衰老模型+DHZCP组(DHZCP组)和衰老模型+维生素E(vitamin E,VE)组(VE组)。通过D-半乳糖(D-galactose,D-gal)连续腹腔注射建立大鼠LA模型。对于LA模型鼠,采用衰老表型和体质量来评估其一般情况;采用肝细胞衰老病理学特征、肝功能指标、肝脏磷酸化组蛋白H2A变异体(phosphorylated histone family 2A variant,γ-H2AX)染色特征、肝脏细胞周期阻滞蛋白(P21、P53、P16)表达水平以及肝脏衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotypes,SASP)因子蛋白表达水平来评估其LA;采用肝脏活性氧产物(reactive oxygen species,ROS)表达特征以及肝组织磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/叉头盒蛋白O4(forkhead box protein O4,FoxO4)信号通路关键信号分子蛋白表达水平来评估ROS介导的PI3K/Akt/FoxO4信号通路活性。结果显示,经DHZCP或VE干预12周后,对于DHZCP组和VE组大鼠,其特征性衰老表型和体质量,肝细胞衰老病理学特征和肝功能指标,肝脏ROS相对表达量,肝组织磷酸化PI3K(phosphorylated PI3K,p-PI3K)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、FoxO4等关键信号分子的蛋白表达水平,肝脏γ-H2AX染色的特征以及肝组织P16、P21、P53和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的蛋白表达水平均得到相应改善,且两者的作用相似。总之,借助D-gal诱导的LA模型鼠,该研究阐明,DHZCP在体内能多靶点地改善LA,其作用和机制与调控肝组织ROS介导的PI3K/Akt/FoxO4信号通路活性有关。这些发现为DHZCP治疗衰老相关肝病提供了新的药理学证据。

基于内质网应激诱导的细胞凋亡探究黄蜀葵花总黄酮减轻糖尿病肾小管病的作用和机制

糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease, DKD)患者的肾小管损伤可能是与肾小球和微血管病变同时出现的,并且在其肾损伤进展中发挥着重要的作用,目前被称之为“糖尿病肾小管病(diabetic tubulopathy, DT)”。为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内减轻DT的多靶点治疗作用和药理机制,笔者将全部大鼠随机分为4组,即正常对照组(正常组)、DT模型组(模型组)、DT模型+TFA组(TFA组)以及DT模型+罗格列酮(rosiglitazone, ROS)组(ROS组)。通过综合措施建立基于DKD的大鼠DT模型。在DT模型鼠成模后,每天用双蒸水、TFA混悬液、ROS混悬液分别给4组大鼠连续灌胃。在给药6周后,处死全部大鼠,分别收集其尿液、血液以及肾组织等标本而进行各项指标的检测,并观察TFA和ROS对DT模型鼠血液、尿液生化指标,肾小管损伤指标,肾小管上皮细胞凋亡和内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)指标以及肾组织蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)-真核翻译起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)-激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)-同源蛋白(C/EBP homologous protein C/EBP,CHOP)信号通路活性的影响。结果表明,DT模型鼠出现了肾小管上皮细胞肥大,肾小管增生、闭塞以及肾间质细胞外基质和胶原沉积;同时,还出现了明显的肾小管损伤标志分子表达程度和蛋白表达水平的变化;此外,出现了肾小管性尿蛋白的异常升高。经TFA和ROS干预,模型鼠尿蛋白、肾小管损伤特征、肾小管上皮细胞凋亡和ERS特征以及肾组织PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路活性均得到不同程度的改善;其中,对于肾小管/间质病理性改变,TFA的作用优于ROS。简言之,借助DT模型鼠,该研究阐明,TFA在体内能通过抑制肾小管ERS诱导的细胞凋亡而多靶点地减轻DT,其作用和机制与抑制肾组织PERK-eIF2α-ATF4-CHOP信号通路活性有关。这些发现为TFA在DT临床治疗领域的应用提供了初步的药理学证据。

基于自噬信号通路探究褐藻多糖硫酸酯改善人近端肾小管上皮细胞衰老的分子机制

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常组(normal group,N)、模型组(D-gal model group,D)、低剂量FPS组(low dose of FPS,L-FPS)、高剂量FPS组(high dose of FPS,H-FPS)以及维生素E组(vitamin E,VE),分别进行不同的干预。N组加入1%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)1 mL;D组加入75 mmol·L^(-1)D-gal;L-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+25μg·mL^(-1)FPS;H-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)FPS;VE组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)VE。在干预后24 h,首先,观察D-gal对HK-2细胞β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平和腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)-不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号通路活性的影响;其次,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平的影响;最后,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)蛋白表达水平以及AMPK-ULK1信号通路活性的影响。结果表明,对于HK-2细胞,75 mmol·L^(-1)的D-gal能安全而有效地诱导细胞SA-β-gal染色特征和klotho,P53,P21蛋白表达水平的变化,也就是引发细胞衰老;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P21,P53蛋白表达水平的变化,也就是拮抗细胞衰老,这里,两者的作用是类似的;D-gal不仅能诱导细胞衰老,还能促进LC3Ⅱ,磷酸化AMPK(phosphorylated-AMPK,p-AMPK)以及磷酸化ULK1(phosphorylated-ULK1,p-ULK1)蛋白高表达,激活自噬相关AMPK-ULK1信号通路;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞LC3Ⅱ,p-AMPK以及p-ULK1蛋白表达水平的变化,也就是抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性。总之,对于D-gal诱导的人近端肾小管上皮细胞衰老模型,FPS与VE相似,能改善肾脏细胞衰老,其分子机制可能与抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性有关。这一发现为FPS抗肾脏衰老提供了初步的药理学证据。

津力达颗粒对胰岛素抵抗SD大鼠的影响

目的探讨津力达颗粒(JLG)对胰岛素抵抗(IR)模型SD大鼠的影响。方法采用高脂饲料喂养12周诱导SD大鼠IR模型。成功建模25只,分为A组(模型对照,7只)、B组(JLG 1.4g/kg灌胃,9只)和C组(二甲双胍265mg/kg灌胃,9只)。取9只SD大鼠作为空白对照(D)组。干预10周后,行腹腔糖耐量试验,计算IR指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)。检测血清糖、脂代谢相关指标;处死大鼠,取肝脏组织行HE及油红O染色。结果与D组相比,A组存在明显糖脂代谢紊乱。与A组相比,B组糖、脂代谢明显改善,HOMA-IR降低,ISI增加(P<0.05)。B组肝脏脂肪变性程度较A组明显减轻。结论 JLG可通过改善糖、脂代谢、调控炎症因子分泌和减少脂质异位堆积改善模型SD大鼠的IR。

补肾活血方治疗2型糖尿病性骨质疏松的疗效观察

目的探讨补肾活血方治疗糖尿病性骨质疏松(DOP)的临床效果。方法选取2017年1月至2020年1月在中医科、内分泌科门诊及住院的DOP患者55例,随机分为对照组(n=27)及治疗组(n=28)。对照组在控制其他原发病基础上加用碳酸钙D3600 mg+骨化三醇胶丸0.5μg,治疗组在对照组基础上加用补肾活血方,治疗周期为6个月。观察并比较两组治疗前后VAS评分、肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酸氨基转移酶(AST)]、骨代谢指标[I型胶原氨基端延长肽(P1NP)、β-I型胶原羧基端肽(β-CTX)]、骨密度(腰椎L1~4及左侧股骨)。结果与对照组相比,治疗后治疗组VAS评分、β-CTX水平降低,P1NP水平升高,腰椎(L1~4)及左侧股骨骨密度增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。两组治疗前后肝功能指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾活血方可有效缓解DOP患者疼痛,改善骨代谢,增加骨密度,且无明显肝损作用。

雷公藤甲素抑制NLRP3炎症小体活化改善高糖诱导的足细胞上皮-间充质转分化

基于糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾组织Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3 inflammasome,NLRP3)炎症小体活化的调控机制而探讨雷公藤有效成分——雷公藤甲素(triptolide,TP)在体外改善高糖(high glucose,HG)诱导足细胞上皮-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用。将体外培养的小鼠永生化足细胞分为正常(the normal,N)组、HG组、低剂量TP(the low dose of TP,L-TP)组、高剂量TP(the high dose of TP,H-TP)组以及甘露醇(the mannitol,MNT)组。分别进行不同的干预,即N组加入5 mmol·L^-1D-葡萄糖(D-glucose,DG),HG组加入30 mmol·L^-1HG,L-TP组加入30 mmol·L^-1HG+5μg·L^-1TP,H-TP组加入30 mmol·L^-1HG+10μg·L^-1TP,MNT组加入5 mmol·L^-1DG+24.5mmol·L^-1MNT。在干预后的不同时间点(24,48,72 h),首先,观察HG或TP对足细胞增殖活性的影响;其次,检测足细胞上皮细胞标志性分子nephrin和ZO-1、间充质细胞标志性分子Ⅰ型胶原(collagenⅠ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的蛋白表达水平;最后,检测足细胞NLRP3炎症小体活化关键信号分子NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protien,ASC)以及下游效应蛋白caspase-1、白介素(interleutin,IL)-1β、IL-18的蛋白表达水平。结果表明,对于体外培养的足细胞,HG能引起nephrin,ZO-1蛋白表达水平下调,collagenⅠ,FN蛋白表达水平上调,诱导其发生EMT;还能引起NLRP3,ASC以及caspase-1,IL-1β,IL-18蛋白表达水平上调,诱导其NLRP3炎症小体活化。此外,L-TP或H-TP与HG联合干预足细胞能恢复nephrin,ZO-1蛋白表达水平,抑制collagenⅠ,FN蛋白表达水平,改善EMT;还能下调NLRP3,ASC蛋白表达水平,抑制NLRP3炎症小体活化,并减少其下游效应分子caspase-1,IL-1β,IL-18蛋白表达水平。总之,HG在体外能激活NLRP3炎症小体而诱导足细胞EMT;TP在适当的剂量范围内能抑制NLRP3炎症小体活性而改善足细胞EMT,这可能是TP保护DKD足细胞炎症性损伤的关键分子机制之一。