淀粉样β蛋白和自由基对爪赡卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体功能的影响

目的 :探讨淀粉样 β蛋白 (Aβ1-4 0 )和自由基对爪蟾卵母细胞表达的大鼠脑谷氨酸受体 (GluR)功能的影响。方法 :采用Promega试剂盒提取 3月龄大鼠脑组织总RNA和mRNA ,并将 5 0nl(5 0ng)的mRNA显微注射到每个爪蟾卵母细胞。注射后的卵母细胞在 (19± 1)℃条件下以改良的巴氏液孵育进行受体表达。这些表达的受体的激活电流采用双电极电压钳位技术记录。超氧阴离子自由基 (SAFRs)和Aβ1-4 0 于记录前 12h、2 4h、96h分别加入孵育液。结果 :爪赡卵母细胞可以表达出M型ACh、谷氨酸、多巴胺、GABA和 5 羟色胺受体。Aβ1-4 0 对表达的GluR有抑制效应 ,其程度依作用时间和浓度而异。 2 0nmol/LAβ1-4 0 作用 2 4h对表达的GluR功能无影响。与SAFRs共同孵育时 ,2 0nmol/LAβ1-4 0 作用 12h即对表达的GluR功能有明显影响 ,6 0nmol/LAβ1-4 0 作用 12h即对表达的GluR有明显抑制效应 (降低 2 1% ,P <0 .0 5 ) ,而 6 0nmol/LAβ1-4 0 作用 2 4h下降达 5 2 %。维生素E对这些效应有拮抗作用。结论 :自由基和Aβ对GluR具有抑制效应 ,该效应能被维生素E拮抗。