黄瓜褐斑病病原与发病情况调查研究初报

黄瓜褐斑病病原与发病情况调查研究初报房德纯，傅俊范沈阳农业大学植保系１１０１６１黄瓜褐斑病Ｃｏｒｙｎｅｓｐｏｒａｍｅｌｏｎｉｓ（Ｃｏｏｋｅ）Ｌｉｎｄａｕ辽宁省１９９２年首先在海城发现，以后相继在沈阳、瓦房店等地发生，病情发展迅速，为害日益严重。１９９...

番茄新病害—白粉病

1991年5月中旬,在沈阳市种子公司一塑料大棚栽培的番茄上发现一种新病害。经鉴定,确认系由 Oidium 型病原诱发所致的番茄白粉病。经调查在种子公司所在地附近的北陵乡5亩多保护地番茄上有番茄白粉病发生。同年10月初,在保护地秋番茄上又有白粉病发生,并且扩展很快,除于洪区的北陵乡外,东陵区的汪家乡也有发生。初步调查,番茄白粉病发生面积20余亩,涉及30多户菜农。发病棚内,轻者发病率70%,重者发病率100%,病株叶片早枯,番茄提早拉秧。我国最早只在台湾省发生过番茄白粉病,病原菌是 Erysiphe polygoni DC(泽田兼吉,1919)。

茄子上烟草花叶病毒的分离与鉴定

１９９１年在沈阳地区茄子花叶病病株上分离到ＳＹ—ＩＳ分离物．对该分离物进行生物学鉴定、血清学检测及多聚酶链反应（ＰＣＲ）测定，确定引起沈阳地区茄子花叶病的毒原种类为烟草花叶病毒（Ｔｏｂａｃｃｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＴＭＶ）的一个株系．此为国内茄子花叶病新的毒原种类。

辣椒疫病的发生与防治研究

辣椒疫病的发生与防治研究房德纯，王振东，李学文，姜元毅，孙润峰（沈阳农业大学）（丹东市振安区蔬菜办）（丹东市农业局）（丹东市农科所）辣椒疫病近年在辽宁省各地普遍发生，尤以丹东、大连、锦州、营口等沿海地区发生最重。辣椒疫病一旦发生，一般发病地块可减产３...

黄瓜褐斑病病原菌鉴定及生物学特性研究

对辽宁省保护地发生的黄瓜褐斑病进行病原菌的分离、鉴定 ,明确该病的病原菌为多主棒孢霉[Corynesporacassiicola(B.&C.)Wei]。生物学特性研究表明 ,该菌孢子萌发的最适温度范围为15～35℃ ,最适pH值为5～8,水滴是孢子萌发的必要条件。病菌营养生长的最适温度为15～35℃ ,最适 pH值为6～8 ,在PSA、PDA等常规培养基上生长良好 ,光照对菌丝生长速度影响不显著。病菌产孢的最适温度为25～30℃,最适pH值为5～8,光照有助于孢子形成,在PSA、PDA等常规培养基上能大量产孢。病菌分生孢子在室外难以安全越冬,在保护地内能够安全越夏。该菌寄主范围广。

西瓜花叶病毒(WMV—2)两株系寄主的病生理研究

以沈阳农大植保系植物病毒研究室提供的WMV—2两株系WMV—2(1)和WMV—2(2)为试材。它们除寄主范围及在某些指示植物上有症状反应的差异外,亦导致其寄主的病生理反应不同。如接种到西葫芦叶片后,株系的强弱差别亦能反应到叶片叶绿素含量多少、光合作用强度、电导率及过氧化物同工酶活性等指标上。试验初步观察到WMV—2的两个株系其寄主病生理上,存在某些可以分辨的差异,WMV—2(1)对西葫芦叶片内叶绿素的破坏程度、降低光合强度以及过氧化物酶活性升高的程度等均大于WMV—2(2)。由此,作者等初步认为这些病生理指标可作为区分西瓜花叶病毒株系较好的辅助手段。

向日葵菌核病菌毒素的产生及其生物活性的测定

首次报道了向日葵菌核病菌[Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary]在离体、活体培养条件下均能产生草酸毒素。研究表明 ,在扫描电镜下 ,Ca2 +离子结晶可形成草酸钙晶体 ,且多分布在气孔及表皮毛周围 ;该菌的培养滤液及粗毒素对种子萌发。

马铃薯Y病毒复制酶基因植物表达载体构建及转基因烟草的培育

用ＢａｍＨＩ／ＫｐｎＩ从重组克隆ｐＺＤ－１中切下马铃薯Ｙ病毒脉坏死株系复制酶基因，将其插入质粒ｐＲＯＫ２相应切点中构成植物表达载体．用重组ｐＲＯＫ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４菌株，通过重组农杆菌侵染叶盘将复制酶基因转入烟草品种ＮＣ８９中获得转基因植株．分子生物学检测结果表明，复制酶基因在转基因烟草中获得表达，并转基因烟草表现一定程度的延迟发病作用．

向日葵菌核病的生物学特性研究

通过对向日葵菌核病的生物学特性研究认为 ,向日葵菌核病是由核盘菌属侵染所致的病害。核盘菌菌丝生长的最适温度范围在 2 0～ 2 8℃ ,最适 pH 4～ 7,最佳碳源、氮源分别为甘露糖及天门冬酰胺 ,菌丝生长对缺Cu、Fe最为敏感 ,菌丝在PDA、PSA等天然、半天然培养基上生长旺盛而均匀。菌核萌发形成子囊盘需要适宜的温度、光照及湿度 ,紫外线照射能刺激菌核萌发。子囊孢子在 2 %葡萄糖溶液中更易萌发 ,孢子萌发以两端或一端萌发 ,萌发的最适温度范围在 1 5～ 2 5℃ ,子囊孢子萌发的最佳碳源为麦芽糖。

烟叶脉坏死病毒原鉴定及cDNA克隆与序列分析

田间采集辽宁地区烟叶脉坏死病标样所得分离物，在测定的１２个科３５种植物中只侵染茄科的一些烟草品种及洋酸浆（ｐｈｙｓａｌｉｓｆｌｏｒｉｄａｎａ），可由桃蚜（Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ）传播。病叶汁液稀释限点（ＤＥＰ）为１０￣（－２）－v１０￣（－３）；失毒温度（ＴＩＰ）为５５一６０℃；体外保毒期（Ｌ）为４８－７２小时。病毒粒体形态呈线条状７２０×１２ｎｍ，病叶脉坏死部细胞质中含风轮状内含体。病毒提取物的紫外最大吸收为２６５ｎｍ，最小吸收为２４５ｎｍ，Ａ＿（２８０）／Ａ＿（２６０）为０．８２。该病毒分离物与ＰＶＹ￣０抗血清呈阳性反应。以病毒ＲＮＡ为模板，按国外报道的ＰＶＹ￣Ｎ序列合成引物经逆转录合成ｃＤＮＡ。用ＰＣＲ扩增出约０．８０ｋｂ的ＣＰ基因片段，将这一片段插入载体ｐＧＥＭ７Ｚ－ｆ（＋）中转化Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５ａ菌株得到了ＣＰ基因的克隆。ｃＤＮＡ序列分析表明，和国外报道的ＰＶＹ￣Ｎ序列同源性极高，初步表明引起辽宁地区烟叶脉坏死病的毒原为ＰＶＹ￣Ｎ。

工厂化蔬菜生产中主要病害的发生规律及生态防治研究

对北方地区工厂化蔬菜生产中番茄灰霉病、番茄晚疫病和黄瓜白粉病3种主要病害的发生规律进行了详细研究 ,并对低温型病害 (番茄灰霉病、晚疫病 )以及高温型病害 (黄瓜白粉病 )分别提出了相应的生态防治措施 :调控温湿度、阻断紫外线。

辽宁省辣椒花叶病毒分离鉴定

在辽宁省主要蔬菜区获得辣椒花叶病毒两个分离物,一为烟草叶病毒辣椒分离株(TMV—P),其表现黄斑驳花叶症,病毒粒子呈长杆状,稀释限点10^(-6);致死温度97℃;体外存活期为10天以上,另一为黄瓜花叶病毒辣椒分熟株(CMV—P),病毒粒子球状,稀释限点1:3000,致死温度60～65℃。体外存活期3～4天。

转马铃薯Y病毒基因烟草的构建研究初报

转马铃薯Ｙ病毒基因烟草的构建研究初报王振东，吴元华，房德纯，刘玉乐，田波（沈阳农业大学植保系，沈阳１１０１６１）（中国科学院微生物研究所，北京１０００８０）ＡＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＳｔｕｄｙｏｆｔｈｅＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＰＶＹＴｒａｎｓｇｅｎ...

弱毒疫苗N14的生产流程及抗血清制备

弱毒疫苗Ｎ１４的生产流程及抗血清制备王艳红王振东房德纯闫宝旺徐风春（沈阳市科技情报研究所，沈阳１１００３１）（沈阳农业大学，沈阳１１０１６１）郑玉辉（开原市八宝镇农科站，开原１１２３２２）目前，各种植物病毒病发生严重，而当前的化学农药及一些制剂对毒病...

用多聚酶链反应(PCR)鉴定茄子花叶病

以茄子花叶病病叶为试材,经差速离心结合聚乙二醇(PEG—MW6000)沉淀法抽提病毒粒子,SDS-酚法提取病毒RNA,通过逆转录酶合成互补DNA(cDNA)。以此cDNA-RNA 杂交体为模板,用一对烟草花叶病毒特异性引物进行多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction;PCR),扩增产物经1%agarose-EB 电泳检测,产生了±200bp 的特异性核酸片断。从而表明沈阳地区茄子花叶病系由烟草花叶病毒引起,是我国茄子病毒病新的毒源。同时,通过实验证实,PCR 是一种敏感、快速、特异性强的植物病毒检测手段。

沈阳市蔬菜病害名录(补充)

1983～1986年,承担农业部植保总站的北方城市(北京、沈阳、西安、兰州)蔬菜病虫害调查课题,曾对沈阳市41种蔬菜上的病害进行了比较系统的调查,共发现192种病害。其后,在1987～1991年间,又继续开展研究工作,不定期调查了29种蔬菜上的病害,其中27种以前曾有过调查,2种蔬菜为新调查种类。

茄子花叶病新毒原

１９９１年从沈阳地区茄子花叶病叶片中分离到了ＳＹ－Ｉｓ分离物。经汁液摩擦接种７个科１６种植物，这一分离物可浸染４个科８种植物，但不侵染黄瓜、两葫芦和蚕豆，也不能经桃蚜和萝卜蚜传播。该分离物体外抗性的致死温度（ＴＩＰ）为９０－９５℃；稀释限点（ＤＥＰ）为１０￣（－６）－１０￣（－７）；体外保毒期（Ｌ）为一个月以上。光学显微镜下可见晶状胞质内含体。叶滴法电镜观察可见大小为±３００×１８ｎｍ的杆状病毒粒子。该病病叶汁液与烟草花叶病毒（ＴＭＶ）普通株抗血清呈明显阳性反应。用ＴＭＶ的一对引物进行多聚酶链反应（ＰＣＲ），可扩增出一特异性核酸片段。根据上述实验结果，我们认为引起沈阳地区茄子花叶病的毒原种类为ＴＭＶ，是茄子花叶病的新毒原。

植物抗病毒基因工程策略及其研究进展（Ⅱ）

植物抗病毒基因工程策略及其研究进展（Ⅱ）王振东，房德纯（沈阳农业大学植保系）二、复合基因策略复合基因策略是提高工程植株抗性的有力途径。目前采用的复合基因策略有３种，即两种不同基因控制一种病毒，多种基因控制病毒的混合侵染及抗虫基因和抗病基因结合控制一种...

植物抗病毒基因工程策略及其研究进展（Ⅰ）

植物抗病毒基因工程策略及其研究进展（Ⅰ）王振东，房德纯（沈阳农业大学植保系）植物病毒病发生普遍，危害严重，难于防治，已对农业生产构成威胁，是作物高产优质栽培的限制性因子之一。长期以来，人们苦于几乎没有对病毒病特效药剂。偶而发现有的化学物质，体外条件下...