分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征

分泌IgA和IgG的浆细胞是黏膜免疫系统中两种重要的效应细胞。本研究旨在探究分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征。以20只健康成年家兔为研究对象,根据硬腭褶皱和牙齿特征,依次将家兔鼻腔分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ5段,运用组织学、免疫组织化学、图像分析及统计学方法,对分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征进行了详细的研究。免疫组化结果显示:分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔每段都有分布,主要弥散分布于鼻黏膜固有层中;其形态呈圆形或卵圆形,核一般位于细胞一侧,胞质丰富呈阳性反应。统计结果显示:分泌IgA和IgG的浆细胞在鼻腔不同段的分布密度由高到低依次是:鼻腔第Ⅳ段、第Ⅴ段、第Ⅲ段、第Ⅱ段、第Ⅰ段。其中分泌IgA的浆细胞在鼻腔Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ段的分布密度显著高于鼻腔Ⅰ、Ⅱ段(P<0.05),在上颌鼻甲、鼻中隔和筛鼻甲的分布密度显著高于上鼻甲(P<0.05);与分泌IgA的浆细胞相比,分泌IgG的浆细胞除鼻腔第Ⅳ段的分布密度显著高于鼻腔Ⅲ、Ⅴ段(P<0.05)外,其分布变化趋势基本与分泌IgA的浆细胞类似。结果证明,分泌IgA和IgG的浆细胞弥散分布于家兔每段鼻腔的鼻黏膜固有层中,有利于SIgA和IgG分子在整个鼻黏膜形成完整的保护屏障;分泌IgA和IgG的浆细胞主要分布在家兔鼻腔Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ段及上颌鼻甲、筛鼻甲和鼻中隔,提示这些区域是家兔鼻腔免疫的重要效应部位。本研究为家兔呼吸系统疾病的预防及进一步探讨家兔鼻腔免疫应答的机制提供重要的理论依据。

双峰驼TLR3蛋白的表达与抗体制备及在肾脏的分布

为制备双峰驼Toll样受体3(TLR3)的抗体,分析其在肾脏中的表达特征。用生物信息学分析及原核表达方式,分析、表达和纯化了双峰驼TLR3重组蛋白,并制备多克隆抗体,用间接酶联免疫吸附试验和免疫印迹法测定抗体效价及其特异性,利用制备的多克隆抗体采用免疫组织化学染色观察TLR3在双峰驼肾脏组织中的表达。结果显示,得到的目的蛋白大小与预测结果相符,为74 ku, IPTG最佳诱导浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导时间为6 h,重组蛋白主要以包涵体形式表达,抗体效价达1∶64 000;免疫印迹结果显示,原核表达的TLR3蛋白和双峰驼肾脏组织中表达的TLR3蛋白均能被该抗体特异性识别,TLR3在双峰驼肾小管上皮细胞和肾小球系膜细胞均有表达。研究结果为进一步探究双峰驼TLR3在肾脏中发挥作用的机制积累了资料。

血管内皮生长因子B在牦牛间脑和脑干相关组织的表达与定位

目的了解牦牛间脑和脑干不同区域血管内皮生长因子B(VEGF-B)的表达及分布特征,探讨其与低氧适应性之间的关系。方法选取5头健康牦牛,按照脑大体解剖结构进行分区并采集间脑和脑干相关组织,具体包括垂体、丘脑、下丘脑、延髓和脑桥5个部位。利用Real-time PCR、Western blotting及免疫组织化学技术对VEGF-B在牦牛间脑和脑干相关区域的表达与定位进行研究。结果牦牛间脑和脑干相关组织中VEGF-B mRNA表达水平最高的部位为垂体,显著高于其他部位(P<0.05),其余表达水平依次为下丘脑、丘脑和延髓,脑桥表达量最低;牦牛间脑和脑干相关组织VEGF-B蛋白表达水平除丘脑高于下丘脑外,其余部位表达水平与mRNA表达趋势一致。免疫组织化学结果显示,与阴性对照组相比,VEGF-B蛋白阳性物质主要分布于上述各类细胞的胞质。其中,垂体中VEGF-B阳性着色主要表达于嗜酸性细胞中;丘脑和下丘脑中VEGF-B阳性着色主要集中于多形细胞;延髓和脑桥中VEGF-B阳性反应主要集中在神经元胞体中。结论VEGF-B蛋白在牦牛间脑和脑干中均有表达,可能与其所担负的抗细胞凋亡、“生存因子”以及血管再生等功能密切相关;间脑和脑干不同区域的表达差异可能与各区域的组织特异性及其功能差异有关。