反相高效液相色谱法同时检测3种探针药物

用反相高效液相色谱同时测定血清中咖啡因、氨苯砜、氯唑沙宗探针药物的质量浓度,以乙腈 磷酸盐缓冲体系(含0 02mol/L的磷酸二氢钾和0 02mol/L的三乙胺,pH6 5)(体积比为25∶75)为流动相,以安替比林为内标,经C18柱(250mm×4 6mmi d ,5 0μm)分离,紫外检测器检测,使3种探针药物得到较好的分离,并且在有效血药浓度范围内线性良好。该法简便、快速,能够为临床安全有效的用药提供科学的依据。

Cocktail探针药物评价姜黄对肝细胞色素P_(450)酶的影响

用Cocktail探针药物法 ,研究姜黄对大鼠肝细胞P4 50 (CYP4 50 )的影响。将SD雄性大鼠分组 ,给予姜黄的水提物 ,以生理盐水组为空白对照 ,以苯巴比妥组为阳性对照 ,通过HPLC检测Cocktail探针药物的代谢率来评价各组的CYP4 50 。结果 :给予姜黄组的大鼠CYP1A2和CYP2E1的水平显著低于对照组 ,CYP3A4的水平没有显著变化。表明 :姜黄对大鼠CYP1A2和CYP2E1有抑制作用 ,但对大鼠CYP3A4的影响不显著。

S(+)盐酸氯胺酮对大鼠肝微粒体细胞色素P450同工酶的影响

目的研究S(+)盐酸氯胺酮对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)6种主要同工酶的诱导或抑制作用。方法应用HPLC-UV测定CYP450 6种主要同工酶的特异性探针底物右美沙芬(CYP2D)、双氯酚酸钠(CYP2C6)、奥美拉唑(CYP2C)、氨苯砜(CYP3A)、非那西丁(CYP1A2)和氯唑沙宗(CYP2E1)的代谢速率。大鼠iv给予S(+)盐酸氯胺酮25 mg.kg-1.d-1,连续给药7 d,评价药物对大鼠肝微粒体CYP450主要同工酶的诱导或抑制作用。结果S(+)盐酸氯胺酮50μmol.L-1时可明显抑制大鼠肝脏CYP2C,2C6和3A,分别为对照组的61.4%,45.8%和31.3%,其中以对CYP2C的抑制作用最为明显。S(+)盐酸氯胺酮1和10μmol.L-1对CYP450同工酶无明显影响,仅10μmol.L-1S(+)盐酸氯胺酮对CYP2C有轻度抑制作用。S(+)盐酸氯胺酮iv给药7 d后,对大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP2C有不同程度的诱导作用,分别诱导137.5%和117.6%,对CYP2E1,3A,2D,2C6无明显影响。结论S(+)盐酸氯胺酮50μmol.L-1时可明显抑制肝脏CYP2C,2C6和3A,连续给药7 d后可诱导CYP1A2和CYP2C,提示S(+)盐酸氯胺酮与经上述同工酶代谢的药物联合应用时,应注意药物-药物相互作用的可能性。

S（＋）盐酸氯胺酮对大鼠肝微粒体CYP450同工酶的影响

目的：研究S（＋）盐酸氯胺酮对大鼠肝微粒体CYP450 6种主要同工酶的诱导或抑制作用。方法：应用HPLC-UV法测定CYP4506种主要同工酶的特异性探针底物右美沙芬（CYP2D）、二氯酚酸钠（CYP2C6）、奥美拉唑（CYP2C）、氨本砜（CYP3A）、非那西丁（CYPlA2）和氯唑沙宗（CYP2E1）的代谢速率。大鼠静脉给予S（＋）盐酸氯胺酮25mg·kg-1·d-1，连续给药7d，评价药物对大鼠肝微粒体CYP450主要同工酶的诱导或抑制作用。结果：S（＋）盐酸氯胺酮50肛M时可明显抑制大鼠肝脏CYP2C，2C6和3A，分别为对照组的31．3％，45．8％和61．4％，其中以对CYP2C的抑制作用最为明显。S（＋）盐酸氯胺酮1和10μM对CYP450同工酶无明显影响，仅10μM S（＋）盐酸氯胺酮对CYP2C有轻度抑制作用。S（＋）盐酸氯胺酮静脉给药7d后，对大鼠肝微粒体CYPlA2和CYP2C有不同程度的诱导作用，分别诱导137．5％和117．6％，对CYP2E1，3A，2D，2C6无明显影响。结论：S（＋）盐酸氯胺酮50μM时可明显抑制肝脏CYP2C，2C6和3A，连续给药7d后可诱导CYPlA2和CYP2C，提示S（＋）盐酸氯胺酮与经上述同工酶代谢的药物联合应用时，应注意药物-药物相互作用的可能性。

Cocktail探针药物同时评价连翘对肝细胞色素P450的影响

目的 用Cocktail探针药物法 ,研究连翘对大鼠肝CYP4 5 0的影响。方法 将SD♂大鼠随机分组 ,给予连翘的水提物 ,以生理盐水组为空白对照 ,通过HPLC检测Cocktail探针药物的代谢率来评价各组CYP4 5 0。结果 给予连翘组的大鼠CYP1A2的水平显著低于对照组 ,CYP3A4的水平显著高于对照组 ,CYP2E1的水平没有显著变化。结论 连翘对大鼠CYP1A2有抑制作用 ,对大鼠CYP3A4有诱导作用 ,但对大鼠CYP2E1的影响不显著。

消旋11-去甲胡桐素A的合成方法改进及其药理学评价(英文)

本文发展一个实用改进方法以合成具有抗人免疫缺陷病毒(HIV-1)的天然产物的类似物11-去甲胡桐素A[(±)-1],方法改进包括以间苯三酚为起始原料与正丁酰乙酸乙酯在饱和氯化氢甲醇存在下,经过Pechmann反应生成5,7-双羟基-4-正丙基香豆素(3),再与巴豆酸用多聚磷酸作溶剂及催化剂进行酰化,同时分子内环合得到收率为70%关键中间体苯并二氢吡喃酮(4),并与缩醛1,1-二乙氧基-3-甲基-2-丁烯用微波辅助催化得到苯并吡喃(6),最后用Luche还原以CeCl3.7H2O作催化剂,在低温下经NaBH4选择性还原化合物(6)得到目标产物即消旋11-去甲胡桐素A(±)-1。上述4步反应总收率32%,比原方法提高1倍。体外研究表明(±)-1对HIV-1(野株)及耐药株均有明显抑制逆转录酶和P24抗原的活性,(±)-1在细胞培养内分别与作用机制不同的3种治疗艾滋病药物(AZT、T-20、Indinavir)都有明显的协同作用。小鼠急性毒性,(±)-1的LD50灌胃给药为735.65 mg.kg-1,腹腔给药为525.10 mg.kg-1。小鼠灌胃给与(±)-1血浆峰浓度(Cmax)与药时曲线面积AUC0-∞分别为0.54μg.mL-1及1.08(μg.mL-1).h。为了初步观察(±)-1的体内药效,采用血清药理学方法,小鼠腹腔注射1次(±)-1或临床有效对照药奈韦拉平,30 min和60 min后血清有相似的抑制HIV-1逆转录酶活性。实验结果提示去甲11-胡桐素A值得进一步研究。

新型免疫抑制剂SYL934的抗皮肤移植排斥反应研究

目的探讨新型免疫抑制剂SYL934对皮肤移植排斥反应的影响。方法采用体外HTRF-IP1(Homogeneous Time-Resolved Fluorescence-IP1)方法,检测SYL934的活性磷酸酯SYL934-P对鞘氨醇-1-磷酸1型受体(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1P1)及鞘氨醇-1-磷酸3型受体(sphingosine-1-phosphate receptor 3,S1P3)的激动活性,采用体内大鼠外周血淋巴细胞检测实验考察SYL934的体内免疫抑制作用,采用大鼠心率检测实验考察SYL934对心率的影响,通过小鼠异体皮肤移植实验考察SYL934对皮肤移植排斥反应的影响。结果 SYL934的活性磷酸酯SYL934-P能够在体外选择性激动S1P1而非S1P3,单次灌胃给予SD大鼠SYL934能够明显降低大鼠外周血淋巴细胞数量,发挥明显的免疫抑制效应,而不会影响大鼠心率。每天灌胃给予小鼠SYL934可以明显提高小鼠皮肤移植模型中移植皮片的存活率。结论 SYL934具有较好的体内外生物活性,具有开发成为抗皮肤移植排斥反应药物的应用前景。

鞘氨醇-1-磷酸转运体Spns2的研究进展

鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是一种鞘脂类信号分子,在细胞增殖、分化和迁移等诸多方面发挥重要的调节作用。S1P在细胞内生成,随后释放到细胞外与靶细胞膜上的S1PR受体结合。S1P的体内来源主要是造血细胞和血管内皮细胞。造血细胞中S1P的释放主要通过ABC转运蛋白家族,而血管内皮细胞中S1P的释放则是通过Spns2。Spns2是首个被发现并确认具有重要生理功能的S1P转运蛋白,属于主要协助转运蛋白超家族。应用Spns2基因敲除小鼠模型研究发现Spns2缺陷小鼠的血浆S1P水平较野生小鼠明显下降,淋巴细胞外迁受到抑制。本文将对Spns2的研究历史、结构特性、作用底物、生理功能,以及Spns2与免疫性疾病和癌症的相关性进行简要介绍,为进一步研究Spns2提供重要参考。

姜黄对肝细胞色素P4501A2的影响

目的 研究姜黄对肝细胞色素P4501A2的影响。方法 以咖啡因为工具药,HPLC法检测其药代动力学变化。结果 咖啡因因体内代谢减慢,半衰期延长。结论 姜黄可以抑制肝药酶,减慢咖啡因的代谢。

硝克柳胺在大鼠体内的药代动力学

目的研究大鼠口服不同剂量硝克柳胺后的药代动力学和生物利用度,为临床研究和应用提供参考依据。方法本研究建立了HPLC-UV方法测定血浆硝克柳胺浓度。大鼠分别口服硝克柳胺(30,100,300mg/kg)、静脉注射硝克柳胺(10mg/kg)进行药代动力学和绝对生物利用度研究。结果硝克柳胺在20-2000ng/ml呈良好线性关系(R2=0.9999),日内和日间精密度RSD均小于10%,回收率为95%-105%之间。大鼠口服不同剂量硝克柳胺后,AUC和Cmax与剂量之间线性相关。硝克柳胺自雌鼠体内吸收和消除均明显快于雄鼠。雄鼠口服硝克柳胺后生物利用度为1.34%,雌鼠为0.67%。结论HPLC-UV法具有灵敏度高、可靠和专属性强的特点,可用来测定大鼠血浆硝克柳胺的浓度。大鼠口服硝克柳胺(30-300mg/kg)体内代谢为线性动力学过程,且存在明显性别差异,绝对生物利用度较低。

HPLC-MS/MS法定量研究比格犬口服氨氯地平后的血浆药代动力学

目的建立比格犬血浆中氨氯地平的HPLC-MS/MS定量测定方法。方法 HPLC分离采用Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-水(42∶58,0.1%甲酸,4 mmol·L-1醋酸铵),流速为0.2 ml·min-1;质谱检测采用电喷雾(ESI)离子源,正离子多反应监测(MRM)方式检测。血浆样品经甲醇-乙腈混合液沉淀蛋白、高速离心后进样分析,检测反应为m/z409.4-238.1(氨氯地平),m/z256.2-167.0(苯海拉明,内标)。结果氨氯地平在比格犬血浆中定量范围为0.5～500 ng·ml-1,日内和日间精密度≤9.04%、回收率高且血浆样品稳定性好。结论本方法特异、快速、准确、可靠,可满足氨氯地平比格犬血浆动力学研究需要。

硝克柳胺在大鼠和人肝脏的体外代谢研究

研究硝克柳胺在大鼠肝微粒体和胞浆中的代谢动力学,鉴定硝克柳胺在大鼠和人肝微粒体中的主要代谢产物及参与代谢的药物代谢酶。采用高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)方法测定大鼠肝微粒体和胞浆中硝克柳胺浓度,应用选择性抑制剂鉴定参与硝克柳胺代谢的药物代谢酶类型,采用液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)法分离鉴定硝克柳胺在大鼠和人肝微粒体中的主要代谢产物。硝克柳胺在大鼠和人肝微粒体的主要代谢产物(M1)为硝基还原产物[3-(3′-羧基-4′-羟基苯胺羰基)-6-氨基-7-羟基-8-甲基香豆素],大鼠体内(血浆、尿液、胆汁及肝组织)主要代谢产物与M1一致。硝克柳胺的体外代谢是依赖多个药物代谢酶参与的酶促反应,包括微粒体CYP450还原酶、细胞色素b5还原酶和CYP2C6以及胞浆NAD(P)H脱氢酶和黄嘌呤氧化酶。

混合探针底物法测定五味子提取物对大鼠细胞色素P450同工酶的作用

本研究考察了五味子水／醇提取物多次给药对大鼠细胞色素P450酶（CYP450）6种亚型的影响。雄性SD大鼠灌胃给予五味子彬醇提取物，连续给药7天，剂量为1．5g／Kg，末次给药后处死大鼠，制备大鼠肝微粒体，将CYP450酶6种亚型特异性探针底物非那西丁（CYP1A2）、右美沙芬（CYP2D2）、双氯酚酸钠（CYP2C6）、美芬妥英（CYP2C11）、氯唑沙宗（CYP2E1）、

FB2与大鼠和人肝微粒体CYP450同工酶的相互作用

目的：FB2是新型Abl／Scr双重酪氨酸激酶抑制剂，拟用于治疗慢性髓细胞性白血病。本研究选择大鼠和人肝微粒体体外温孵系统，应用特异性探针底物法／抑制剂法，探讨参与FB2代谢的主要CYP450s以及FB2对CYP450s的抑制作用。

短链脂肪酸与代谢性疾病相关性的研究进展

短链脂肪酸(SCFA)是膳食纤维经肠道菌群发酵产生的代谢产物,在维持肠道内环境与上皮细胞功能方面发挥重要作用。作为肠-脑轴交流的重要介质,SCFA与人体内多种生理功能或疾病的发生发展密切相关,其中对肠道疾病的作用已被证实。近年来的研究发现SCFA可促进机体的新陈代谢,在控制体质量、调节血糖血脂等方面具有显著效果,其与代谢性疾病的相关性已成为研究热点。虽然作用机制尚待进一步明确,但SCFA在代谢性疾病中作用与治疗潜力令人期待。

甘氨酸生理功能与代谢研究进展

甘氨酸是结构最简单的氨基酸,参与体内多种代谢和病理生理学过程。甘氨酸在中枢神经系统中可作为神经递质参与信号传递,并在免疫调节、细胞保护、防护缺血再灌注损伤、减少自由基生成、减少休克损伤、预防酒精性肝病等方面发挥重要作用。在生物转化方面,甘氨酸除构成蛋白质外,还参与合成多种重要含氮物质,如嘌呤碱、血红素和细胞色素的卟啉环、肌酸、谷胱甘肽及甘氨胆酸等。此外,甘氨酸还可与大量内源性物质及药物发生Ⅱ相结合反应,影响相关药物的代谢排泄,起到解毒作用。本文就甘氨酸生理功能及在代谢中作用的研究进展进行综述,以期为甘氨酸在药物研发和临床合理应用方面提供参考,并为甘氨酸与药物Ⅱ相结合反应的进一步研究提供借鉴。

葡萄糖转运体1与相关疾病的研究进展

葡萄糖转运体1(GLUT1)属于葡萄糖溶质载体2A家族,介导葡萄糖的跨膜转运。GLUT1在体内绝大多数组织中均有分布,通常以低水平表达,可维持血糖水平稳定,为各种生命活动提供能量。然而,GLUT1却异常高表达于肝癌、胰腺癌、卵巢癌等恶性肿瘤细胞,可为肿瘤的增殖、侵袭迁移提供足够的葡萄糖。通过抑制GLUT1的功能阻断肿瘤的能量来源是目前抗肿瘤药研发的热点。GLUT1还与阿尔茨海默病、糖尿病、GLUT1缺乏综合征、银屑病等疾病的发生、发展密切相关。本文主要对GLUT1的结构、组织分布、功能调节、相关疾病以及抑制剂的研发等进行综述。

双环醇对二甲双胍、非诺贝特、环孢素A、他克莫司药物体外代谢的影响

目的研究双环醇对二甲双胍、非诺贝特、环孢素A、他克莫司体外代谢的影响,为双环醇与上述药物临床合理应用提供科学依据。方法将双环醇与大鼠和人肝微粒同时或预温孵后分别加入受试药物二甲双胍、非诺贝特、环孢素A、他克莫司,应用LC/MS分析方法测定受试药物原型药的减少或代谢产物的生成,计算双环醇对上述药物体外代谢的抑制率。结果双环醇(10μmol/L)同时加入或与大鼠和人肝微粒预温孵后对他克莫司和环孢素A单加氧代谢物生成的代谢抑制率均<10%,对二甲双胍含量和非诺贝特代谢产物非诺贝特酸的生成也无明显影响。结论双环醇(10μmol/L)体外对二甲双胍、非诺贝特、环孢素A、他克莫司在大鼠和人肝微粒体中的代谢无明显影响,可为双环醇与上述药物联合使用提供一定的参考依据。

鞘氨醇激酶-2与疾病相关性的研究进展

鞘氨醇激酶(SPHK)是生物体内催化鞘氨醇转化为生物活性物质鞘氨醇-1-磷酸(S1P)的关键酶,其体内表达或活性的上调与下调,与许多疾病如癌症、感染和炎症等的发生发展密切相关。该酶目前在人体主要有SPHK1和SPHK2两个亚型,两者结构虽非常相似,但SPHK2生理功能更复杂,相关研究直到近年来才逐渐被报道。目前人们对SPHK2研究尚未透彻,但其可能成为许多疾病治疗靶点的巨大潜力吸引很多学者正在不断进行更多探索,目前已发现抑制SPHK2可有效干预癌症和炎症等疾病。本文将对SPHK2与疾病发生发展及治疗的研究进展进行简要概述。