芽孢杆菌B01固态发酵及其对园林废弃物堆肥的影响

菌剂的使用是目前促进园林废弃物堆肥的有效方法,但常用的菌剂往往为液态菌剂,其制作存在无菌操作要求高、产品存在运输不便等问题,拟尝试通过固体菌剂加以克服.以芽孢杆菌(Bacillus sp.)B01为研究对象,对其固态发酵过程中的载体、保护剂、接种量、装瓶量等常见工艺参数进行优化,制成固体菌剂,并与市售常见液体菌剂——EM菌进行对比,探究其对园林废弃物堆肥过程的影响.结果表明:B01固态发酵的最优载体配比为麦麸35%、米糠45%、乳糖6%、黄豆粉6%、硅藻土8%,保护剂为5%海藻糖,接种量为15%,装瓶量为15%,料水比为1∶1.在该发酵条件下,B01固态发酵物活菌体数可达到2.62×1010 CFU g(以干质量计),存储90 d后,25℃下的存活率为30.19%.与EM菌相比,固体菌剂——B01可使园林废弃物堆肥过程中纤维素降解率提高11.04%、木质素降解率提高15.47%、腐殖质含量提高19.91%.研究显示,通过固态发酵条件的优化成功地将B01制成固体菌剂,该固体菌剂具有较高的活菌数量和较长的保质期,还可促进园林废弃物堆肥过程中木质素、纤维素的降解以及腐殖质的合成,具有显著的应用潜力.

固定化木质素降解菌对园林废弃物堆肥的影响

【目的】以生物质炭和米糠为载体,将木质素降解菌No.11通过固定化的方式制备促进园林废弃物堆肥腐熟的固体菌剂。【方法】通过单因素试验探究接菌量(5%、10%、15%、20%、25%)、保护剂体积分数(0、4%、8%、12%、16%、20%)、含水率(5%、10%、15%、20%、25%)的优化范围,再通过正交试验在该范围内寻找固体菌剂的最佳制备条件。以市售常见有效微生物复合菌(EM菌)菌剂为对比,将制得的菌剂添加到园林废弃物堆肥中,探究其对木质素、纤维素降解和相关酶活力的影响。【结果】木质素降解菌No.11的最佳固定化条件为:接菌量10%、保护剂体积分数8%、含水率15%,制得的菌剂中有效活菌数达1.26×1011 CFU·g−1。园林废弃物堆肥中添加自制菌剂后木质素降解相关酶(漆酶、锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶)的活力均得到提高。与添加EM菌相比,木质素降解率提高8.69%;与不添加菌剂相比,木质素降解率提高23.91%,纤维素降解率提高8.34%,堆肥产品达到腐熟标准。【结论】通过固定化木质素降解菌制备的固体菌剂,其有效活菌数符合GB 20287−2006《农用微生物菌剂》的相关要求,将菌剂添加到园林废弃物堆肥中可提高木质素和纤维素降解率,促进堆肥产品腐熟。

补益之品“闭门留寇”与“扶正祛邪”矛盾浅析

[目的]探讨补益之品出现"闭门留寇"与"扶正祛邪"两种矛盾作用的原因。[方法]以人体"损补自调"为着眼点,分析补益之品在正虚邪盛时有"闭门留寇"与"扶正祛邪"两种作用效果的原因。[结果]正虚邪盛时,补益之品"扶正""留邪"之争,是"司外揣内"的结果,乃源于医家们以药后效果立论,而忽略了人体"损补自调"之力。机体"损补自调"机制是"泻实补虚"治则得以确立的内在原因,补益之品"留邪"或是"扶正"乃取决于医者是否能谨察人体"损补自调"之机。若能审时度势,契合人体欲"补"之时,且用药得宜,使补药之偏在自"损"自"补"调节范围之内,即表现"扶正";若未能察得机体欲"补"之机,或用药之偏,超出机体"损补"之力,则显现"留邪"。[结论]人体"损补自调"是补益药在正虚邪盛时表现出"闭门留寇"与"扶正祛邪"两种作用结果的根本原因。

700 MW水内冷发电机纯水系统橡胶膨胀节的研究与应用

纯水系统作为发电机定子重要冷却系统,直接影响着机组的安全运行。某大型水力发电厂纯水系统现均使用橡胶膨胀节直接安装在管路上,橡胶膨胀节的可靠性关乎纯水系统运行的可靠性。本文着重介绍某大型水电厂700 MW水内冷发电机纯水系统所选用的橡胶膨胀节,研究橡胶膨胀节的结构,并分析其不足。为解决所发现的问题,设计一种新型橡胶膨胀节并将之应用于现场。

关于乡村振兴实践路径的文献综述

随着我国乡村振兴战略的有序推进,有关乡村振兴实践路径的研究也逐渐增多。本文经过文献梳理,对乡 村振兴实践路径相关研究内容追本溯源,梳理了学者们对乡村振兴实践路径的理论研究成果,包括乡村振兴的发展模 式、制度改革和产业结构等方面。在此基础上,认为现有研究缺乏更深层面的探讨,研究内容需要拓展和深化,后期研 究可以从制度层面和法律层面探寻乡村振兴的根源问题,形成系统而全面的理论发展体系。

疏肝健脾活血方对肝纤维化模型小鼠肝组织CUG结合蛋白1表达及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法48只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾活血方组、CUGBP1敲减组,每组12只。CUGBP1敲减组一次性尾静脉注射CUGBP1敲减腺相关病毒,其余各组尾静脉注射对照腺相关病毒,每只小鼠注射量为100μl,病毒滴度不少于1×10^(12)vg/ml。4周后,除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20%四氯化碳(CCl_(4))2.5 ml/kg,每3天注射1次,连续4周,诱导肝纤维化模型;同时疏肝健脾活血方组小鼠予33.3 g/(kg·d)疏肝健脾活血方药液灌胃,正常组、模型组及CUGBP1敲减组予10 ml/kg蒸馏水灌胃,每天1次,连续4周。末次给药12 h后取材,采用HE染色、Masson染色、天狼星红染色进行肝脏病理学观察;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量;检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α平滑肌激动蛋白(α-SMA)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad7、CUG结合蛋白1(CUGBP1)蛋白表达,肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、CUGBP1 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组小鼠肝组织病理显示肝细胞排列紊乱,有大量炎性细胞浸润与大量胶原纤维沉积,并且形成明显的纤维间隔;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量上升,肝组织中CollagenⅠ、CUGBP1、p-Smad2、p-Smad3、α-SMA蛋白表达升高,TGF-β1、CollagenⅠ、CUGBP1、α-SMA mRNA表达升高,Smad7蛋白及mRNA表达下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,疏肝健脾活血方组和CUGBP1敲减组小鼠肝组织病理显示有少量炎性细胞浸润,纤维组织增生不明显,纤维间隔稀疏;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量下降,上述蛋白及mRNA水平均有所改善(P<0.05或P<0.01)。与疏肝健脾活血方组比较,除Smad7 mRNA表达升高外,CUGBP1敲减组其余各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾活血方可能通过抑制肝组织CUGBP1表达,从而阻断TGF-β1/Smads信号后续转导,进而抑制肝纤维化进展。

基于IFN-γ/STAT1/Smad7通路探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化作用机制

目的:探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法:36只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组12只;除正常组外,其余组小鼠利用20%四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化,中药组按33.3 kg/mL疏肝健脾活血方药灌胃干预,连续4周。采用HE染色、Masson染色、天狼猩红染色观察各组小鼠肝组织病理变化;免疫组化检测肝组织平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)分布情况;检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平变化;采用Western Blot法检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α-SMA、信号转导与转录活化因子1(STAT1)、磷酸化信号转导与转录活化因子1(p-STAT1)、Smad7蛋白表达水平;采用RT-PCR法检测各组小鼠肝组织中CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、γ-干扰素(IFN-γ)mRNA水平变化。结果:与模型组比较,中药组肝组织中炎症细胞浸润减少,肝细胞点状坏死减少,肝细胞排列相对整齐,汇管区及中央静脉区纤维增生减少,部分纤维间隔消失,胶原沉积明显减少;血清中ALT与AST水平显著下降(P<0.01,P<0.05);肝组织中CollagenⅠ与α-SMA蛋白水平显著下降(P<0.05),Smad7与p-STAT1/STAT1蛋白水平显著上升(P<0.05);肝组织中CollagenⅠ与α-SMA mRNA水平显著下降(P<0.01),Smad7与IFN-γmRNA水平显著上升(P<0.01)。结论:疏肝健脾活血方能够减少肝脏炎症的发生与胶原纤维增生,抑制肝星状细胞的活化,从而起到防治肝纤维化的作用,其作用机制可能与促进IFN-γ/STAT1/Smad7信号通路有关。

一株分离自绿化废弃物堆肥枯草芽孢杆菌的常压室温等离子诱变及其发酵条件

【背景】为了提高堆肥降解有机废弃物的效率,高效堆肥菌剂成为了研究热点,其中以真菌应用的研究为多,但真菌也有对氧气和底物敏感等缺点,细菌对堆肥的作用开始被研究。本实验室以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为底物,从绿化废弃物堆肥中筛选得到枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis,B.subtilis) BL03,它具有较好的纤维素分解能力,能提高绿化废弃物堆肥中纤维素降解和腐殖质合成的速度。【目的】进一步提高B.subtilisBL03的纤维素酶生产能力。【方法】利用常压室温等离子(Atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变BL03菌,通过CMC-刚果红固体培养基观察水解透明圈,以及液体发酵后检测酶活力的方法进行3轮筛选;通过连续多代培养观察突变株的遗传稳定性;通过梯度温度、p H培养研究突变株发酵的最适生长温度、培养基初始pH;利用正交设计方法研究适合突变株发酵培养的工业级原料配方。【结果】筛选到2株正突变株,酶活力分别提高了69%和72%;连续10代培养稳定,验证了突变株的遗传稳定性;其中酶活力最高的突变株BLA3890最适培养温度为37°C、培养基初始pH为5.0-6.5,研究得到较经济的发酵培养基配方。【结论】ARTP诱变B. subtilis BL03后得到的突变株BLA1973和BLA3890在绿化废弃物堆肥或其他纤维素降解行业具有进一步研究和应用的价值。

浅谈温肝暖阳法在逆转慢性肝病肝纤维化过程中的作用

肝纤维化是慢性肝病发展到肝硬化的必经阶段,抗肝纤维化治疗是中医治疗慢性肝病最突出的优势之一。但目前,顾护肝阳对于机体抗肝纤维化的作用尚未得到详尽论述。为了进一步完善中医药抗肝纤维化的理论,进一步提高中医治疗肝纤维化的辨证水平,文章从肝阳的生理作用入手,从肝肺、肝脾、肝肾等多个角度详细阐释了温阳暖肝法对于肝纤维化治疗的意义。肝阳有解郁之功,蠲饮之能,祛瘀之效,肝阳常运不虚,则瘀血痰饮无以留,湿浊气郁无以生。肝阳升发有力则肺可降气,脾可升清,肾可足阳,肝自难有纤维之变。故而,温肝暖阳法在逆转慢性肝病肝纤维化过程中至关重要,当为医者之所系。

基于数据挖掘探讨姚真敏治疗老年不寐的经验及学术特色

目的:探究姚真敏教授(以下尊称姚老)治疗老年不寐的临证经验及学术特色。方法:运用Excel、SPSS Modeler 18.0、SPSS 22.0、BICOMB2、UCINET、NetDraw等数据挖掘软件,对"姚老治疗老年不寐数据库"进行数据处理、频数分析、关联规则、聚类分析及复杂网络分析。结果:频数分析发现,高频症状25个,高频药物29味,其中补气药居多,甘温之品最频,且多归心经;关联规则发现经典药对24组;聚类分析发现,姚老治疗老年不寐的5种证型和5个基本方;复杂网络发现,姚老治疗老年不寐的核心处方1个。结论:姚老治疗老年不寐善用安神七法:化痰安神、活血安神、滋阴安神、清心安神、和胃安神、交通心肾安神、补血益气安神,尤重补气安神。