马链球菌兽疫亚种PepO蛋白原核表达及其免疫保护试验

以马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus,SEZ)ATCC35246株基因组为模板,根据NCBI数据库已公布的pepO基因序列设计引物进行扩增,利用同源重组技术连接至pCold-SUMO质粒进行原核表达及纯化,并以纯化的蛋白制备兔抗SEZ PepO多克隆抗体。将兔多克隆抗体与SEZ野生菌株混合后进行mBMEC细胞的被动抗体保护试验,同时以不加抗体组作为对照,结果显示PepO多抗能够在细菌黏附侵袭细胞的过程中对细胞形成有效保护。经纯化后蛋白免疫的BALB/c小鼠腹腔注射5×10^(4)CFUATCC35246菌液(5×LD_(50)),连续观察并记录7日内小鼠的临床表现及存活情况,结果显示PepO免疫组小鼠存活率达到70%。结果表明,SEZ PepO具有良好的免疫保护效力,能够作为SEZ亚单位疫苗的候选抗原。