化滞柔肝颗粒减轻非酒精性脂肪性肝炎相关肝纤维化的机制研究

目的结合网络药理学研究方法,探讨化滞柔肝颗粒(HZRG)减轻非酒精性脂肪性肝炎(NASH)相关肝纤维化的作用机制。方法借助网络药理学分析聚焦HZRG治疗NASH的潜在靶点。将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和HZRG低、高剂量组,每组8只。除对照组外,其余各组小鼠给予蛋氨酸胆碱缺乏饮食诱导NASH相关纤维化模型,造模的同时给予相应药物干预,连续4周。HE染色观察肝组织病理变化,并行非酒精性脂肪性肝病活动度评分(NAS);天狼猩红和Masson染色法观察肝脏胶原沉积情况;免疫组化法观察肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白α1链(Col1a1)的表达情况,并用ImageJ软件分析阳性表达面积。试剂盒检测肝组织总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平。采用生化分析仪检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)水平,ELISA试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Western blot法和免疫荧光法检测α-SMA、Col1a1、p53蛋白表达水平;RT-qPCR法检测p53 mRNA相对表达量。不同浓度转化生长因子-β1(TGF-β1)或Tenovin-6处理人源性肝星状细胞系LX2细胞24 h,检测相关指标。结果①网络药理学研究结果提示,p53是HZRG发挥效应的潜在靶点。②HE染色、Masson染色和天狼猩红染色结果显示,模型组小鼠肝脏脂质累积、炎细胞浸润、纤维化形成,与对照组比较,模型组小鼠肝组织病理α-SMA、Col1a1阳性表达面积增加(P<0.05),NAS评分升高(P<0.05);HZRG低、高剂量组小鼠肝细胞内脂滴减少,肝脏脂肪变和炎细胞浸润程度明显减轻,与模型组比较,HZRG低、高剂量组肝组织病理α-SMA、Col1a1阳性表达面积减少(P<0.05),NAS评分降低(P<0.05)。③与对照组比较,模型组小鼠血清ALT、AST、LDH、ALP水平升高(P<0.05);与模型组比较,HZRG低、高剂量组小鼠血清ALT、AST、LDH、TNF-α水平降低(P<0.05),HZRG低剂量组小鼠血清ALP水平降低(P<0.05)。④与对照组比较,模型组小鼠肝组织TG、α-SMA蛋白水平升高(P<0.05);与模型组比较,HZRG高剂量组小鼠肝组织α-SMA蛋白水平降低(P<0.05),HZRG低、高剂量组小鼠肝组织TG、Col1a1蛋白水平降低(P<0.05)。⑤各组小鼠肝组织p53 mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。⑥p53蛋白在NASH小鼠肝组织及活化的LX2细胞中表达降低,HZRG及Tenovin-6可上调其表达;p53蛋白表达升高,可缓解NASH小鼠肝组织纤维化进展、抑制LX2细胞活化。结论HZRG减轻NASH相关肝纤维化的机制可能与上调p53蛋白表达有关。

基于混合copula函数的沪深股市与香港股市一体化趋势分析

沪深股市与香港股市近年来分割状况改善,出现"一体化"发展趋势.测定两市相依结构和波动溢出效应对于市场参与各方具有重要意义.结合传统的协整检验、Granger因果检验和VEC模型,引入混合copula函数对两市代表性指数——沪深300指数和恒生中国企业指数进行相关性分析.参数估计方面,利用非参数核密度方法估计边缘分布,结合EM算法计算混合copula的参数.实证结果表明两个市场具有显著相关性,且上尾相关性大于下尾相关性;混合copula函数与单copula函数分析结果一致,拟合效果优于单copula函数.

城市老旧小区社区治理体系研究——以厦门市湖里街道为例

随着新时代城市的发展,传统社区治理体制已不再适应当下社会发展,社区治理作为打通城市治理的“最后一公里”,迫切需要寻找新的变革与创新。将社区治理的研究范围聚焦于老旧小区,选取厦门市湖里街道内的老旧小区为研究对象,运用IPA研究方法探索当前城市老旧小区的社区治理策略。通过构建居民对老旧小区社区治理的满意度评价指标体系,并基于指标IPA的模型分析,得到案例小区治理的综合评价结果并总结治理问题。最后提出相应的治理体系优化策略,以期为相似类型的老旧小区在社区治理过程中提供参考。

化滞柔肝颗粒抑制内质网应激改善非酒精性脂肪性肝炎的作用机制研究

目的:探究中药复方化滞柔肝颗粒改善非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用机制。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组,模型组,化滞柔肝颗粒低、高剂量组,以蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导NASH模型并予化滞柔肝颗粒干预;检测小鼠体质量、肝重、肝体比、血清肝酶[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)]、肝脂[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)]及血清炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平,结合肝组织病理染色结果评估化滞柔肝颗粒对NASH小鼠表型的影响;通过RNAseq、RT-qPCR、Western Blot、ELISA和TUNEL染色等方法探究化滞柔肝颗粒调节内质网应激(ERS)与细胞凋亡改善NASH的效应机制。结果:化滞柔肝颗粒可降低NASH小鼠血清ALT、AST,肝脏TC、TG和血清炎症因子水平(P<0.01,P<0.05),减轻肝脏脂肪变和炎症浸润,下调ERS相关基因和蛋白的表达;其有效成分大黄素能降低Raw264.7细胞的炎症因子水平,下调Bcl-2/Bax/Caspase3信号通路基因和蛋白的表达,抑制细胞凋亡。结论:化滞柔肝颗粒能有效改善NASH,其机制可能与通过Bcl-2/Bax/Caspase3信号通路抑制巨噬细胞凋亡,改善ERS有关。

强肝胶囊促进肝糖原合成降低大鼠高血糖的机制研究

目的:探讨强肝胶囊对高糖饮食诱导的高血糖大鼠的降糖效应及其作用机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组和高糖饮食组,分别给予普通饲料和高糖饲料。饲喂6周后,高糖饮食组大鼠随机分为模型组、吡格列酮(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))组、强肝胶囊低剂量(0.4 g·kg^(-1)·d^(-1))组、强肝胶囊高剂量(1.2 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每组8只。各组灌胃给予相应药物,连续4周。末次给药后,取血,分离肝组织。生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和空腹血糖(FBG)水平;ELISA检测糖化血红蛋白(HbA1c)和肝糖原含量;PAS染色后光镜下观察肝脏糖原分布;Western blot检测肝脏糖原合酶激酶3β(GSK3β)、糖原合酶(GS)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶2(PCK2)、肝糖原磷酸化酶(PYGL)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)的蛋白表达。结果:(1)与模型组相比,强肝胶囊低、高剂量组血清ALT和AST水平显著降低(P<0.01),强肝胶囊低剂量组HDL水平显著升高(P<0.05),LDL水平显著降低(P<0.05)。(2)与模型组相比,强肝胶囊低、高剂量组FBG和HbA1c水平显著降低(P<0.05,P<0.01),肝糖原含量明显升高(P<0.05)。PAS染色观察显示,强肝胶囊干预后模型大鼠肝脏糖原着色面积明显增加。(3)模型组大鼠肝组织p-GSK3β/GSK3β和p-GS/GS蛋白表达比值较正常组显著升高(P<0.05),而低剂量强肝胶囊干预可明显下调模型大鼠p-GSK3β/GSK3β和p-GS/GS蛋白表达比值(P<0.05)。各组大鼠肝组织PYGL、PCK2和G6PC蛋白表达的比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:强肝胶囊对高糖饮食诱导的高血糖大鼠具有降糖效应,其作用机制与增加肝糖原含量、降低糖原合成过程中GSK3β和GS磷酸化水平有关。