高压氧暴露大鼠肺组织内PPAR通路分子变化规律

目的:研究高压氧暴露大鼠肺组织内过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR)通路分子表达变化规律。方法:27只雄性SD大鼠随机分为高压常氧对照组(0.23 MPa空气)、高压氧时间序列处理组(0.23 MPa纯氧,分别暴露2 h、4 h、6 h和8 h),持续小流量通风,维持舱内O2浓度>99%。应用HE染色观察各组大鼠肺组织形态学变化;应用oligo芯片检测各个时间表达谱;应用RT-PCR验证发生改变的部分PPAR通路基因。结果:与高压常氧对照组相比,高压氧时间序列处理组造成的肺损伤逐渐加重;表达谱芯片的基因本体论(Go)富集分析结果中有一类PPAR通路类,包含有多个PPAR通路分子;RT-PCR结果提示PPARδ-和PPARγ-均在较长时间高压氧暴露的肺组织中上调。结论:高压氧长时间暴露造成的肺型氧中毒可引起PPAR通路的激活。

端粒酶和端粒生物学在医学领域中的应用

研究表明,正常细胞、肿瘤细胞和原始干(祖)细胞中端粒的长度、端粒酶活性有着明显的差异,而正是这种差异却具有非常重要的潜在临床应用价值。本文就这一领域的研究进展进行了介绍。

不同压力氧气对大鼠潜水减压病的预防作用

目的:研究不同压力氧气对大鼠减压病的预防作用。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为减压病组、1 ATA预吸氧组、2 ATA预吸氧组、3 ATA预吸氧组。减压病组置于脱险舱内,以"压缩空气3 min内匀速加压至0.7 MPa,停留60 min后,3 min内匀速减压"方案处理后出舱。预吸氧组分别于进舱前吸不同压力的氧20 min后再按上述方案加减压出舱。出舱后30 min内观测大鼠死亡率、行为学改变;取大鼠肺组织,测其干湿重比、支气管肺泡灌洗液蛋白量以及肿瘤坏死因子(TNF-α)表达含量变化。结果:和减压病组比较,预吸氧对减压病的死亡率及发病率无明显影响。但1 ATA预吸氧组大鼠支气管肺泡灌洗液蛋白量和炎症因子TNF-α值下降明显,肺干湿重比升高明显(P<0.05)。结论:预吸氧对减压病的死亡率及发病率无明显改善,但是常压吸氧可减轻存活大鼠肺泡灌洗液中蛋白渗透、降低肺组织中炎症因子的表达。

中国人群HER2基因655位密码子多态性与胃癌的关系

目的探讨HER2基因Ile655Val多态性在中国人群中的分布特点及其与胃癌的易感性、临床病理特征等方面的关系。方法运用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)法检测210例胃癌患者和278例正常对照者HER2基因655位基因型,分析其与胃癌发病风险及临床病理分期之间的关系。结果与Ile/Ile基因型相比,Val/Val基因型患者发病风险OR值为3.15(95%CI=1.07～6.71);Ile/Val基因型的发病风险OR值为1.90(95%CI=1.18～3.10)。携带Val等位基因者与Ile纯合子相比,进展期(T2～T4)病例分别为55/98(P=0.021);淋巴结阳性(N1～N3)病例分别为44/71(P=0.019);远处转移(M1)病例分别为23/31(P=0.051);低分化病例分别为35/55(P=0.002)。结论 HER-2基因Ile655Val多态性与胃癌的易感性存在相关。与Ile/Ile基因型相比,Val/Val基因型患者发病风险最高,Ile/Val基因型的发病风险次之。Ile655Val突变的病例,在病理学上显示出浸润深度深、多有淋巴结转移、低分化比例高的特点,与出现远处转移无明显相关性。

Hes1基因诱导小鼠肝原始细胞分化为胆管上皮细胞(英文)

背景与目的:采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split1,Hes1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用。材料与方法:通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1,将2种表达载体分别转染肝原始细胞系(LEPCs),应用RT_PCR和Real-timePCR技术检测胆管细胞分子标志物CK19、GGT,胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β,肝细胞分子标志物GS、BGP和肝卵圆细胞的分子标志物Thy-1的表达,并在荧光显微镜下观察EGFP标记的LEPCs细胞系荧光强度的变化。结果:成功构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1。RT-PCR和Real_timePCR检测均表明胆管细胞分子标志CK19、GGT表达量上调;胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β表达上调;肝细胞分子标志GS、BGP表达量下调;卵圆细胞的分子标志Thy-1表达量下调;LEPCs细胞系绿色荧光增强。结论:初步证明小鼠肝原始细胞经Hes1的表达诱导后可向胆管上皮细胞方向分化,推测Hes1为胆管上皮细胞分化的转录调控因子。

快速上浮脱险致减压病动物肺组织病理改变的研究

目的研究快速上浮脱险致减压病动物肺组织病理的改变特点。方法雄性SD大鼠80只,随机选取60只为模拟快速上浮脱险组(简称脱险组),其余20只为空白对照组。空白对照组仅放于加压舱内相同时间不做加压处理。脱险组空气加压以2t/7指数速率加压至1.5 MPa,停留4 min后匀速减压至常压出舱。出舱后0.5 h观察大鼠存活率,留取所有大鼠肺组织作病理检查,对肺组织损伤程度进行评分,利用R语言进行统计分析。结果大鼠死亡率50%,肺组织病理主要以肺间质增厚、水肿、充血为主要特点。Kruskal非参检验分析发现各组间总体上有显著差异(P=0.0016),用Nemenyi检验作两两比较发现,脱险组死亡与未死亡动物的评分与空白对照组相比均有显著性差异(P<0.05),而死亡与未死亡动物之间无显著性差异。结论快速上浮脱险所致减压病可显著破坏血肺屏障引起肺组织水肿。

尼卡地平对快速上浮脱险致减压病动物肺组织影响的研究

目的研究尼卡地平对快速上浮脱险致减压病动物模型肺组织损伤的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只。实验组于进舱前0.5 h给予尼卡地平50 mg/kg灌胃,对照组于进舱前0.5 h给予相同体积的生理盐水灌胃,空白对照组仅放于加压舱内相同时间不做加压处理。空气以2t/7指数速率加压至1.5 MPa,停留4 min后匀速减压至常压出舱。出舱后0.5 h观察大鼠存活率、肺组织病理,通过ELISA检测IL1-β和TNF-α表达量,并通过Western印迹检测肺组织半胱天冬蛋白酶(caspase)3表达的改变。结果对照组发病率和死亡率分别为80%和50%,实验组发病率和死亡率分别为100%和80%。两组存活动物的肺组织病理均可见肺泡、肺间质出血,肺间质增宽。实验组TNF-α较正常组有明显升高,而IL1-β未见明显改变。尼卡地平处理后前半胱天冬蛋白酶(pro-caspase)3无显著改变,但裂解半胱天冬蛋白酶(cleaved-caspase)3明显增高。结论减压前使用尼卡地平对快速上浮脱险致减压病造成的肺损伤有促进作用,并促使了炎症加重和细胞凋亡增加。

快速上浮脱险致减压病动物凝血纤溶系统变化的实验研究

目的 研究快速上浮脱险致减压病动物凝血纤溶系统的变化,从而为快速上浮脱险减压病筛选能反映其损伤程度的敏感指标.方法 雄性SD大鼠80只,按数字表法随机分为2组,正常对照组（对照组）20只,快速上浮脱险实验组（实验组）60只,根据动物是否死亡进而分为死亡组和存活组.实验组以2^t/7指数速率加压至1.5 MPa（表压）,停留4 min后匀速减压至常压.观察实验组大鼠出舱后30 min内的存活状况.如果大鼠30 min内死亡,则立即抽取其下腔静脉血;如果30 min内未死亡,则在30 min后抽取其下腔静脉血,血标本置于3.5％枸橼酸钾及1％肝素内抗凝,用于检测凝血6项指标和血小板计数.结果 实验组大鼠30 min内死亡率30只（50％）.对照组、存活组与死亡组大鼠的血小板计数比较差异无统计学意义（P＞0.05）;存活组、死亡组及对照组大鼠的凝血酶时间分别为（28.00±1.69）s、（27.21 ±3.82）s与（30.91±2.82）s,组间比较差异均有统计学意义（P＜0.01）,对照组大鼠的纤维蛋白原（2.91±0.43）g/L和死亡组（3.72±1.55）g/L比较差异有统计学意义（P＜0.05）,存活组大鼠的D-二聚体（0.19±0.05） μg/L和死亡组（0.24±0.08） μg/L比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 凝血酶时间、纤维蛋白原和D-二聚体可综合反映快速上浮脱险致减压病的发生以及造成损伤的严重程度,可作为反映损伤程度的指标.

30 m高压预吸氧对快速上浮脱险致减压病的预防作用研究

目的：研究30 m高压预吸氧对快速上浮脱险致减压病发病和心肺损伤的影响。方法雄性Wistar大鼠60只，采用数字表法随机分为3组，每组20只。实验组于动物舱套舱内给予加压30 m预吸氧10 min，对照组于动物舱内常压呼吸空气暴露10 min，之后，实验组与对照组用空气以2t／7指数速率加压至1．5 MPa，停留4 min后匀速减压至常压出舱。空白对照组仅放于加压舱内相同时间不做加减压处理。出舱后0．5 h观察大鼠的死亡和发病情况、检测心肺组织病理改变。结果对照组发病率和死亡率分别为80％和75％，实验组发病率和死亡率均为40％。对照组存活动物的肺组织可见肺泡、肺间质出血、肺间质增宽。心尖组织可见心肌纤维显著水肿，甚至断裂。空白对照组和实验组的肺组织均未见明显出血和渗出，肺间质无增宽。心尖组织可见心肌纤维有轻微的水肿。结论30 m高压预吸氧10 min对快速上浮脱险致减压病造成的心、肺损伤有保护作用，可预防减压病的发生。

高压氧联合经颅磁刺激治疗颅脑损伤致昏迷患者的疗效观察

目的研究高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）联合经颅磁刺激（repetitive transcranial magnetic stimulation，rTMS）对颅脑损伤致昏迷患者的临床疗效。方法回顾性选取120例颅脑损伤致昏迷患者，未接受HBO或rTMS治疗患者为对照组，其中格拉斯哥昏迷量表（Glasgow coma scale，GCS）评分6～8分为CA组，GCS评分3～5分为CB组；接受HBO治疗患者中，GCS评分6～8分者为HA组，GCS评分3～5分者为HB组；接受HBO联合rTMS治疗患者中，GCS评分6～8分者为rTA组，GCS评分3～5分者为rTB组。6组均给予神经营养、抗感染、维持电解质平衡等脑外伤常规治疗。HA组、HB组加用HBO治疗，汀A组、rTB组加用HBO、rTMS治疗。其中，HBO治疗压力为0．25MPa，1次／d，每个疗程10d，连续治疗3个疗程；rTMS方案设定刺激强度为0．72T，磁场频率0．5Hz，每个序列刺激30次，1个序列／d，每个疗程12d，连续治疗3个疗程。观察和统计分析治疗前后患者格拉斯哥昏迷量表GCS评分、治疗后格拉斯哥预后量表（Glasgow outcome scale，GOS）评分的改变。结果连续治疗3个疗程后，GCS评分6～8分的患者存常规治疗加用HBO联合rTMS后的GCS评分（11．15±4．17）高于仅加用HBO后的GCS评分（9．05±3．12），且均高于常规治疗方案（7．50±1．99），差异均有统计学意义（P〈0．05）；常规治疗加用HBO联合rTMS后的GOS评分（4．45±0．83）高于常规治疗（3．90±0．55），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GCS评分6～8分的颅脑损伤致昏迷患者接受HBO联合rTMS疗法后的临床疗效较好。

N-乙酰半胱氨酸对快速上浮脱险致减压病大鼠心肺组织的影响

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对快速上浮脱险致减压病大鼠心肺组织的影响。方法雄性SD大鼠80只,随机分为4组,每组20只。实验组于进舱前1 h通过腹腔注射NAC溶液(注射剂量分别为250、500和1000 mg/kg),对照组于进舱前1 h腹腔注射相同体积生理盐水。压缩空气以指数速率2t/7加压至1.5 MPa,停留4min后匀速减压至常压出舱。出舱后即观察大鼠行为学表现并统计存活率,出舱后0.5 h活杀大鼠,取心、肺组织,观察其病理变化。结果 NAC 500 mg/kg组大鼠存活率(90%)显著高于对照组(65%)(P<0.05);对照组大鼠肺泡结构大面积破坏融合,肺泡腔内可见红细胞渗出;心肌纤维水肿、变性,断裂明显。而NAC组大鼠肺泡壁增厚程度和心肌纤维水肿程度均较对照组轻微。结论 NAC可通过减轻大鼠心肺组织的损伤和炎症预防快速上浮脱险所致减压病的发生。

模拟大深度潜艇艇员快速上浮脱险致减压病大鼠模型的建立

目的建立稳定的模拟大深度潜艇艇员快速上浮脱险致减压病大鼠模型。方法雄性sD大鼠80只，采用数字表法随机分为4组：正常对照组，高压暴露2、4、8min组，每组20只。高压暴露各组置于空气加压舱内以2“指数速率加压至150m，分别停留2、4、8min后，以3m／s匀速减压至常压出舱。观察各组大鼠行为学和肺、脑、脊髓组织病理结果。结果高压暴露2、4、8min组大鼠出舱后均出现竖毛、搔抓、行动迟缓、反应性差等行为状态。病理结果显示，大鼠肺泡和肺间质及脊髓组织出血明显，细胞水肿，脑组织未见明显改变。暴露2、4、8min组大鼠发病率分别为20．0％、55．0％、10．0％，死亡率分别为0、20．0％、85．0％，3个高压暴露组大鼠发病率及死亡率差异均有统计学意义（P〈0．01）。由于8min方案暴露时间过长，制备的大鼠模型出舱后死亡率较高，而2min方案高压下停留时间不够，制备的大鼠模型发病率较低，高压暴露4min方案大鼠死亡率低且减压病发病率高。结论本实验以高压暴露4min方案成功地建立了大深度潜艇艇员快速上浮脱险致减压病动物模型。

CXCR4抑制剂对大鼠肺型氧中毒肺损伤的干预作用

目的研究趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)特异性拮抗剂AMD3100在大鼠肺型氧中毒(pulmonary oxygen intoxication)肺组织损伤中的干预作用。方法 40只雄性SD大鼠随机分为常压空气PBS组、常压空气抑制剂组、纯氧暴露PBS组及纯氧暴露抑制剂组,每组10只。纯氧暴露PBS组及纯氧暴露抑制剂组利用0.23 MPa纯氧加压暴露,出舱后通过HE染色切片观察大鼠肺组织病理改变,ELISA法测定炎症因子TNF-α及IL-1β含量变化,应用Western印迹方法研究大鼠肺组织caspase-3含量变化。结果纯氧暴露抑制剂组大鼠肺组织淤血、水肿、出血与纯氧暴露PBS组相比程度较轻。纯氧暴露抑制剂组TNF-α、IL-1β及活化的caspase-3含量均低于纯氧暴露PBS组。结论应用AMD3100阻断CXCR4来减轻肺型氧中毒肺损伤是有效的。

氯吡格雷对减压病的预防作用

目的不安全减压产生的气泡导致血小板凝集、活化,是减压病产生的主要原因。氯吡格雷可通过抑制纤维蛋白原和二磷酸腺苷(adenosine diphosphatase,ADP)结合而抑制血小板聚集。该研究拟探讨氯吡格雷对快速上浮脱险所致减压病的预防作用,并探讨其干预机制。方法 111只雄性SD大鼠,分为正常组对照(20只)、减压病组(46只)和减压病氯吡格雷干预组(45只)。减压病组置于脱险舱内,以2t/4的指数速率快速加压至1.5 MPa,加压及停留时间共4.5 min,以3 m/s的速度匀速减压。出舱后30 min内观测大鼠死亡率、行为学改变。分析肺脏病理表现及湿干比,外周血白细胞及血小板计数,流式细胞术检测外周血活化血小板表达率,免疫组化检测肺组织中CD41的表达率。结果发现氯吡格雷可有效降低快漂减压病的死亡率(减压病+氯吡格雷组为11/45,减压病组为28/46,P<0.01)。氯吡格雷可减轻肺组织损伤、降低肺组织湿/干比、减少肺组织中血小板及白细胞聚集、降低外周血中白细胞数、活化血小板比例。结论氯吡格雷可通过降低血小板的聚集、活化,减少炎性细胞的激活,对减压病起到预防作用。

保存全血中泛素对人外周血单个核细胞分泌细胞因子的影响

同种异体输血产生的免疫调节不良作用，称为输血相关免疫调节（Transfusion-Related Immunomodulation，TRIM）。我们通过体外观察保存全血血浆中泛素对LPS刺激的人外周血单个核细胞（PBMNC）分泌细胞因子的影响，探讨其在TRIM中的作用。

不同程度肺型氧中毒大鼠血气指标变化的实验研究

目的通过测定高压氧暴露不同时间后大鼠的血气分析值,探究肺型氧中毒时体内酸碱平衡的动态改变。方法 50只雄性SD大鼠,随机分为5组,分别暴露于2.3绝对压(ATA)、100%氧气中3、6、9、12 h,空气暴露组作为对照。出舱后观测大鼠生存率、行为改变、肺组织湿干比。抽取股动脉血,行血气分析。结果在2.3 ATA、100%氧气暴露后大鼠体内酸碱平衡呈现动态改变。与空气暴露组相比,血气分析值在暴露后3 h无明显改变;暴露6及9 h组与暴露3 h相比有显著的统计学差异;而暴露12 h组与6及9 h相比又有显著性差异。肺湿干比的结果显示,暴露3 h组与空气暴露组相比无明显差异,暴露6、9及12 h组显著上调,12 h组与3、6及9 h组相比明显增高。结论高压氧导致的肺型氧中毒动物体内酸碱平衡紊乱,从代偿期向失代偿碱中毒过渡,最后发展至失代偿性酸中毒。血气分析值在判断肺型氧中毒的疾病发展阶段具有重要的指导意义。

趋化因子受体4在高压氧致肺型氧中毒大鼠模型肺组织中含量的变化

目的 研究肺型氧中毒（pulmonary oxygen toxicity）大鼠肺组织损伤中趋化因子受体4（chemokine receptor4,CXCR4）的变化规律.方法 雄性健康SD大鼠30只,体质量200～ 220 g,按数字表法随机分为6组,每组5只.其中1组为常压空气对照组,该组大鼠暴露于自然大气环境中,禁食水,不进行任何加减压实验处理;另外5组分别在高压纯氧环境下暴露2、4、6、8、10 h后逐组出舱进行动物存活实验动物处理.实验动物氧舱底铺设新鲜钠石灰,100％氧气持续灌舱10 min,氧流量计测定舱内氧浓度达99％后,以0.1 MPa/min的速率匀速加压至0.23 MPa.持续微量通风,维持舱内氧浓度＞99％.观察各组大鼠肺组织病理改变,应用蛋白免疫印记法检测CXCR4,并与常压空气对照组对比.结果 随着氧暴露时间增加,肺组织出现淤血、水肿,出血程度不断加重.CXCR4表达在8h内随时间增加而增高,但在10h组表达有所下降.结论 高压纯氧暴露后大鼠发生了肺脏组织损伤,与CXCR4变化规律基本一致.

减压病预防措施的研究进展

减压病是指机体在高气压环境下暴露一定时间后，由于外界压力下降过快，溶解于体内的惰性气体来不及随呼吸排出体外，而在组织和血液中形成气泡所引起的一种疾病。减压病严重威胁潜水员的健康，可表现为皮疹、关节及四肢的疼痛、中枢神经系统紊乱、呼吸困难、偏瘫等症状。目前常规的减压程序无法完全避免减压病的发生，如何采取有效预防措施减少减压病的发生率，是援潜救生的研究重点。本文就最近的减压病的预防措施进行综述。

32％氮氧混合气潜水作业水下阶段减压表的计算与动物实验验证

目的制订32％氮氧（32％氧＋68％氮）混合气水下阶段减压表。方法根据Haldane理论，确定适合32％氮氧混合气水下阶段减压表计算的假定时间单位、理论组织分类、氮过饱和安全系数及其选取方法，建立潜水减压表的计算方法；通过376羊次、94个加压方案的动物实验，观察动物出舱后的行为学改变，检测多普勒气泡音及肺、脑组织病理学变化。结果按计算得到的减压表加减压出舱后的动物均未出现行为学异常；多普勒血流气泡音检测均为零级；肺、脑组织病理学结果显示，组织结构清晰，未见充血水肿。结论理论计算得到的减压方案安全可靠。

高压氧对保留性神经损伤模型小鼠神经病理性疼痛治疗作用的行为学研究

疼痛控制日益受到医务工作者的重视,如果不能有效缓解疼痛,会导致临床转归不佳,患者生活质量下降.然而,至今疼痛的治疗方法和药物仍很匮乏.高压氧虽已在临床应用多年,疼痛仍未纳入其适应征,有文献报道临床上观察到高压氧能缓解包括复杂区域疼痛综合征（complex regional pain syndrome,CRPS）、原发性三叉神经痛、纤维肌痛综合征、偏头痛、丛集性头痛等慢性疼痛疾患;基础研究初步发现高压氧处理能降低周围神经损伤大鼠的痛觉异常敏感,减轻实验性关节炎疼痛.但是,关于高压氧对神经病理性疼痛的确切作用及其相关机制尚不明确.