背景与目的:采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split1,Hes1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用。材料与方法:通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体p...背景与目的:采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split1,Hes1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用。材料与方法:通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1,将2种表达载体分别转染肝原始细胞系(LEPCs),应用RT_PCR和Real-timePCR技术检测胆管细胞分子标志物CK19、GGT,胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β,肝细胞分子标志物GS、BGP和肝卵圆细胞的分子标志物Thy-1的表达,并在荧光显微镜下观察EGFP标记的LEPCs细胞系荧光强度的变化。结果:成功构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1。RT-PCR和Real_timePCR检测均表明胆管细胞分子标志CK19、GGT表达量上调;胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β表达上调;肝细胞分子标志GS、BGP表达量下调;卵圆细胞的分子标志Thy-1表达量下调;LEPCs细胞系绿色荧光增强。结论:初步证明小鼠肝原始细胞经Hes1的表达诱导后可向胆管上皮细胞方向分化,推测Hes1为胆管上皮细胞分化的转录调控因子。展开更多
目的研究高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)联合经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对颅脑损伤致昏迷患者的临床疗效。方法回顾性选取120例颅脑损伤致昏迷患者,未接受HBO或rTMS治疗患者为对照组,其中...目的研究高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)联合经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对颅脑损伤致昏迷患者的临床疗效。方法回顾性选取120例颅脑损伤致昏迷患者,未接受HBO或rTMS治疗患者为对照组,其中格拉斯哥昏迷量表(Glasgow coma scale,GCS)评分6~8分为CA组,GCS评分3~5分为CB组;接受HBO治疗患者中,GCS评分6~8分者为HA组,GCS评分3~5分者为HB组;接受HBO联合rTMS治疗患者中,GCS评分6~8分者为rTA组,GCS评分3~5分者为rTB组。6组均给予神经营养、抗感染、维持电解质平衡等脑外伤常规治疗。HA组、HB组加用HBO治疗,汀A组、rTB组加用HBO、rTMS治疗。其中,HBO治疗压力为0.25MPa,1次/d,每个疗程10d,连续治疗3个疗程;rTMS方案设定刺激强度为0.72T,磁场频率0.5Hz,每个序列刺激30次,1个序列/d,每个疗程12d,连续治疗3个疗程。观察和统计分析治疗前后患者格拉斯哥昏迷量表GCS评分、治疗后格拉斯哥预后量表(Glasgow outcome scale,GOS)评分的改变。结果连续治疗3个疗程后,GCS评分6~8分的患者存常规治疗加用HBO联合rTMS后的GCS评分(11.15±4.17)高于仅加用HBO后的GCS评分(9.05±3.12),且均高于常规治疗方案(7.50±1.99),差异均有统计学意义(P〈0.05);常规治疗加用HBO联合rTMS后的GOS评分(4.45±0.83)高于常规治疗(3.90±0.55),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论GCS评分6~8分的颅脑损伤致昏迷患者接受HBO联合rTMS疗法后的临床疗效较好。展开更多
文摘背景与目的:采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split1,Hes1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用。材料与方法:通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1,将2种表达载体分别转染肝原始细胞系(LEPCs),应用RT_PCR和Real-timePCR技术检测胆管细胞分子标志物CK19、GGT,胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β,肝细胞分子标志物GS、BGP和肝卵圆细胞的分子标志物Thy-1的表达,并在荧光显微镜下观察EGFP标记的LEPCs细胞系荧光强度的变化。结果:成功构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1-Hes1。RT-PCR和Real_timePCR检测均表明胆管细胞分子标志CK19、GGT表达量上调;胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β表达上调;肝细胞分子标志GS、BGP表达量下调;卵圆细胞的分子标志Thy-1表达量下调;LEPCs细胞系绿色荧光增强。结论:初步证明小鼠肝原始细胞经Hes1的表达诱导后可向胆管上皮细胞方向分化,推测Hes1为胆管上皮细胞分化的转录调控因子。
文摘目的研究高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)联合经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对颅脑损伤致昏迷患者的临床疗效。方法回顾性选取120例颅脑损伤致昏迷患者,未接受HBO或rTMS治疗患者为对照组,其中格拉斯哥昏迷量表(Glasgow coma scale,GCS)评分6~8分为CA组,GCS评分3~5分为CB组;接受HBO治疗患者中,GCS评分6~8分者为HA组,GCS评分3~5分者为HB组;接受HBO联合rTMS治疗患者中,GCS评分6~8分者为rTA组,GCS评分3~5分者为rTB组。6组均给予神经营养、抗感染、维持电解质平衡等脑外伤常规治疗。HA组、HB组加用HBO治疗,汀A组、rTB组加用HBO、rTMS治疗。其中,HBO治疗压力为0.25MPa,1次/d,每个疗程10d,连续治疗3个疗程;rTMS方案设定刺激强度为0.72T,磁场频率0.5Hz,每个序列刺激30次,1个序列/d,每个疗程12d,连续治疗3个疗程。观察和统计分析治疗前后患者格拉斯哥昏迷量表GCS评分、治疗后格拉斯哥预后量表(Glasgow outcome scale,GOS)评分的改变。结果连续治疗3个疗程后,GCS评分6~8分的患者存常规治疗加用HBO联合rTMS后的GCS评分(11.15±4.17)高于仅加用HBO后的GCS评分(9.05±3.12),且均高于常规治疗方案(7.50±1.99),差异均有统计学意义(P〈0.05);常规治疗加用HBO联合rTMS后的GOS评分(4.45±0.83)高于常规治疗(3.90±0.55),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论GCS评分6~8分的颅脑损伤致昏迷患者接受HBO联合rTMS疗法后的临床疗效较好。