渝西地区奶牛隐孢子虫的分离和基因型鉴定

为鉴定渝西地区奶牛隐孢子虫分离株的种类和基因型,本研究利用巢氏PCR(Nested PCR)扩增18S rRNA基因,PCR产物进行限制性片段长度多态性分析(Restriction fragment length polymorphism analysis,RFLP);将目的片段克隆至pGEM-T Easy载体,对阳性克隆进行测序,序列用BLAST和MEGA 4.0进行同源性和种系发育分析。结果表明阳性样品均成功扩增出约830bp的目的基因片段,PCR产物分别经SspⅠ和MboⅡ酶切后进行RFLP分析,显示渝西地区存在3种隐孢子虫,即C.andersoni、C.bovis、C.ryanae。其中C.andersoni为优势虫种。鉴定结果为进一步开展奶牛隐孢子虫的病原生物学研究及该地区隐孢子虫病的监测奠定了基础。

寄生虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶研究进展

丝／苏氨酸蛋白磷酸酶（Proteinserine／threonine phosphatases，PSTP）属于蛋白磷酸酶家族中重要的细胞内调节蛋白，能够催化磷酸化丝氨酸或磷酸化苏氨酸的去磷酸化反应，并参与许多关键的生物学过程，例如细胞周期进程、细胞凋亡和胞外分泌等。蛋白质的磷酸化和去磷酸化是调节多种细胞功能的基本过程。蛋白激酶从ATP将磷酸基团转移到蛋白质上（磷酸化），而蛋白磷酸酶催化磷酸基团从蛋白质的特定残基移除（去磷酸化）。

荣昌猪miR-182基因序列多态性分析

实验旨在研究免疫相关基因miR-182的序列多态性,以期为荣昌猪抗病育种提供新的遗传变异素材。利用PCR、测序、序列多重比对、计算机模拟miRNA折叠、qRT-PCR等方法,分析了275头荣昌猪新生小猪的miR-182基因序列,计算了miR-182基因在荣昌猪群体中各基因频率和基因型频率,检验了miR-182基因在荣昌猪群体中的遗传平衡状态,并检测了miR-182基因序列突变对其成熟体和靶基因表达量的影响。结果表明:miR-182前体第95位发生了一个G/A突变,该位点在哺乳动物中是高度保守;荣昌猪群体中G、A基因频率分别为0.5945、0.4055,GG、AA、GA,基因型频率分别为0.3535、0.1644、0.4821,且该突变在群体内已处于平衡状态;该突变能影响miR-182的空间结构,导致前体自由能升高9.86%,显著影响其成熟体在皮下脂肪组织中的表达量。

重庆荣昌犬钩虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析

利用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬钩虫rDNA的ITS及5.8S序列,然后将PCR扩增产物回收纯化后连接到pMDTM19-T载体上进行克隆.重组质粒通过菌落PCR鉴定,将阳性重组质粒进行序列测定并且进行序列分析.结果显示,5株犬钩虫荣昌分离株ITS序列的总长为833 bp^834 bp.ITS-1序列总长无差异,但存在个别碱基的差异;5.8S序列总长与序列均无差异;ITS-2序列总长存在差异(221 bp^222 bp).通过与GeneBank上报道的其他钩虫的ITS序列进行相似性分析,发现犬钩虫荣昌分离株(RCF)与犬钩虫广州分离株相似性最高,为99.9%,与美国北海狮弯口属钩口线虫ITS序列的相似性最低,为86.1%.表明ITS可作为分子标记用于犬钩虫种属以及种间的鉴定.该研究结果旨在为今后犬钩虫的分类鉴定、种群遗传关系、分子流行病学调查以及对该病的防治等方面的更深入研究奠定基础.