沉默生物钟基因PER1对口腔鳞状细胞癌细胞中生物钟基因网络的影响

目的探讨口腔鳞状细胞癌细胞中生物钟基因PER1对生物钟基因网络中其他生物钟基因表达的影响。方法采用RNA干扰技术沉默人口腔鳞状细胞癌SCC15细胞中PER1基因,应用流式细胞仪检测沉默后细胞的增殖和凋亡水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测生物钟基因CLOCK、BMAL1、PER1、PER2、PER3、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2、TIM、CKIE、RORA、NPAS2、REV-ERBA m RNA的表达情况。结果 PER1基因沉默后,SCC15细胞增殖指数上升,凋亡指数下降(P<0.05);PER1、PER2、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2和NPAS2 m RNA的表达水平降低(P<0.05),PER3、TIM、RORA和REV-ERBA m RNA的表达水平升高(P<0.05),CLOCK、BMAL1和CKIE m RNA的表达水平无统计学改变(P>0.05)。结论生物钟基因PER1能够调控生物钟基因网络中众多其他生物钟基因PER2、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2、NPAS2、PER3、TIM、RORA和REV-ERBA的表达,PER1在生物钟基因网络中具有重要调控作用。

不同器械预备根管对热牙胶充填根管根尖封闭能力影响的评价

目的:通过检测根尖微渗漏情况,来评价4种不同器械预备根管后对E-Q Plus热牙胶充填系统充填的根管根尖封闭能力是否存在影响以及影响大小。方法:将按实验要求40颗单根管恒前磨牙,随机分为四组,每组10颗牙,A组采用Protaper系统预备根管;B组采用Profile系统预备,C组采用K3系统预备根管,D组采用不锈钢K锉预备。各组在根管预备后,采用E-Q Plus热牙胶充填系统完成根管充填,并通过X线片检查根管充填合格后,再对根充牙进行染色,制成透明牙,最后测量并比较4组牙齿的根尖微渗漏的发生情况。结果:3组不同镍钛器械预备组根尖微渗漏发生情况均优于不锈钢k锉预备组,且有统计学差异,而3组镍钛器械预备组之间均无统计学差异。结论:不同器械预备根管对E-Q Plus热牙胶充填系统所充填根管的根尖封闭能力具有一定的影响,但镍钛器械的影响要低于不锈钢器械的影响。

PER2对人口腔鳞癌SCC15细胞增殖、凋亡以及生物钟基因表达的影响

目的探讨人口腔鳞癌SCC15细胞中生物钟基因PER2的表达改变对细胞增殖、凋亡以及其他生物钟基因的影响。方法用RNA干扰技术沉默人口腔鳞癌SCC15细胞中PER2基因;流式细胞术检测细胞增殖和凋亡水平;实时荧光定量PCR检测生物钟基因CLOCK、BMAL1、PER1、PER3、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2、TIM、CKIε、RORα、NPAS2和REV-ERBαmRNA表达。结果沉默PER2后,SCC15细胞的增殖水平显著增加,凋亡显著下降(P<0.05);SCC15细胞中生物钟基因PER3、BMAL1、DEC1、DEC2、CRY2、TIM、RORα和NPAS2 mRNA的表达水平显著降低,PER1和REV-ERBαmRNA的表达显著升高(P<0.05)。结论在癌细胞中,生物钟基因PER2对生物钟基因网络中其他生物钟基因具有重要调控作用,PER2表达降低导致细胞增殖增加和细胞凋亡水平下降。

生物钟基因PER2在人口腔鳞癌细胞中具有重要的抑癌作用

探讨生物钟基因PER2对人口腔鳞癌SCC9细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响和机理。利用RNA干扰技术沉默SCC9细胞中PER2基因,应用实时荧光定量PCR检测Ki-67、MDM2、P53、Bcl-2、Bax、C-myc、MMP-2、Timp-2和VEGFm RNA的表达改变;流式细胞仪检测沉默后细胞的增殖和凋亡水平,平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成率,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力的改变。沉默PER2基因后,SCC9细胞凋亡指数显著降低(p<0.05),细胞增殖指数、细胞迁移和侵袭能力显著升高(均p<0.05)。PER2沉默后Ki-67、MDM2、Bcl-2、C-myc、MMP-2和VEGF m RNA的表达水平显著升高(均p<0.05),p53、Bax和Timp-2 m RNA的表达水平显著降低(均p<0.05)。研究表明,生物钟基因PER2通过调控Ki-67、MDM2、P53、Bcl-2、Bax、C-myc、MMP-2、Timp-2和VEGF影响癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。因此,对PER2的深入研究有可能为癌症的治疗提供新的有效分子靶点。