Bloom+PBL教学模式在家畜繁殖学课程教学中的应用研究

为了探索Bloom+PBL教学模式在家畜繁殖学课程教学中的应用效果,文章选取贵州大学动物科学学院2018级、2019级两届动物科学专业本科生(共148名学生)为研究对象,分为两组,其中2018级(n=68)为常规教学组,2019级(n=80)为Bloom+PBL教学组,通过过程考核(30%)、实验考核(20%)、期末测评(50%)综合评定此次教学改革效果,结果表明,Bloom+PBL教学组的课程成绩、平时成绩、实验成绩和期末考试成绩均显著高于常规教学组;Bloom+PBL教学组学生在理解类题、分析类题、应用类题和论述类题的平均得分均高于常规教学组,两组学生的记忆类题目得分差异不大。

柯乐猪和大白猪胎盘发育与繁殖性能的相关性分析

旨在探讨柯乐猪与大白猪胎盘组织形态及营养转运、血管生成、抗氧化应激和细胞凋亡与其繁殖性能差异的相关性。比较大白猪与柯乐猪窝均产仔数、产活仔率、初生重、胎盘绒毛数量、血管数量,以及胎盘营养转运、血管生成、抗氧化应激、细胞凋亡相关基因的mRNA表达水平。结果显示:柯乐猪的窝均产仔数、产活仔率和平均初生重均显著低于大白猪(P<0.05);通过组织形态学分析发现,柯乐猪胎盘相较于大白猪表现为绒毛数量不足和发育不良;实时荧光定量PCR显示,柯乐猪胎盘中葡萄糖转运基因溶质载体家族2成员1(SLC2A1)和氨基酸转运基因溶质载体家族38成员10(SLC38A10),抗氧化应激相关基因铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和过氧化氢酶(CAT),抗细胞凋亡基因B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)的转录水平显著低于大白猪胎盘(P<0.05),而脂肪酸转运蛋白4(FATP4)的转录水平显著高于大白猪胎盘(P<0.05);柯乐猪胎盘中超氧化物歧化酶(SOD)、CAT酶活性显著低于大白猪胎盘(P<0.05),而活性氧(ROS)自由基水平显著高于大白猪胎盘(P<0.05);通过TUNEL分析显示,柯乐猪胎盘组织的细胞凋亡水平极显著高于大白猪胎盘(P<0.01)。结论:胎盘组织形态发育不良以及营养转运、抗氧化、抗凋亡能力不足可能是造成柯乐猪胎儿数量少和初生重低的重要原因,这可为探究柯乐猪繁殖性能的调控机制提供重要依据。

摘除卵巢后藏姜杂交母猪体重、体尺、GH、GHR、SS的变化分析

实验旨在分析摘除卵巢对藏姜杂交母猪体重、体尺、生长激素(GH)、生长激素受体(GHR)、生长抑素(SS)的影响,为进一步深入探究藏姜杂交母猪的生长发育、科学饲养和管理方案提供参考。实验选择半同胞、断奶重及体况相近的健康藏姜杂交仔母猪60头,随机分为实验组和对照组,每组30头,实验组45日龄时手术摘除卵巢,对照组不做任何处理。在管理、饲养相同的条件下,在性成熟前定期测量体重、体长、胸围、腹围、体高、体宽并检测血清中GH、GHR、SS激素水平;t检验2组之间的差异,分析体重与体尺之间的相关性,并用Logistic模型、Gompertz模型和Von Bertalanffy模型对体重和体尺数据进行拟合分析。结果表明:81日龄与154日龄时,实验组体重显著高于对照组;124日龄与139日龄时,实验组体重极显著高于对照组;154日龄时,实验组体长显著低于对照组,体高极显著低于对照组;124日龄时,实验组胸围极显著高于对照组;139日龄时,实验组体长、体宽以及体高显著高于对照组。2组的体重与体尺相关性均为极显著。实验组血清中的GH和GHR水平先降后升,最终实验组与对照组趋于同一水平,实验组的SS水平一直低于对照组。3种生长拟合曲线对2组体重的拟合度均在0.99以上;结合真实测量数据分析生长拐点体重与拐点日龄发现,Logistic模型对藏姜杂交猪的体重拟合最佳。

基于转录组测序的摘除卵巢藏姜母猪背最长肌脂代谢相关基因筛选与分析

【目的】探究摘除卵巢后藏姜母猪背最长肌脂肪沉积的动态规律,为揭示脂肪沉积的调控机制提供理论依据。【方法】于45日龄手术摘除藏姜母猪卵巢(试验组),对照组藏姜母猪在腹部相同部位进行创伤处理但不摘除卵巢。分别记录45、154和300日龄藏姜母猪的血清雌激素、甘油三酯和总胆固醇含量变化,300日龄屠宰采集背最长肌组织样品制作石蜡切片,并通过Illumina NovaSeq 6000测序平台完成测序。以|log2 Fold Change|>1且P<0.05为标准,采用DESeq2筛选出背最长肌组织中的差异表达基因(DEGs),通过GO和KEGG数据库分别进行GO功能注释分析及KEGG信号通路富集分析,找出可能参与脂代谢的基因,并以实时荧光定量PCR进行转录组测序结果验证。【结果】试验组藏姜母猪的血清甘油三酯含量显著高于对照组藏姜母猪(P<0.05,下同),总胆固醇含量极显著高于对照组藏姜母猪(P<0.01,下同),雌激素含量极显著低于对照组藏姜母猪,背最长肌脂肪含量显著低于对照组藏姜母猪。试验组与对照组藏姜母猪间存在278个DEGs,其中有33个DEGs与脂代谢相关。DEGs主要注释在胆汁酸分泌、磷脂酰肌醇3-激酶信号传导、蛋白激酶B信号传导、G蛋白偶联受体结合、糖胺聚糖结合、趋化因子活性及趋化因子受体结合等GO功能条目上,且主要富集在糖酵解/糖异生、淀粉和蔗糖代谢、碳水化合物消化和吸收、MAP激酶丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性、雌激素2-羟化酶活性及cGMP-PKG信号等KEGG信号通路中。实时荧光定量PCR检测到的目的基因表达趋势与转录组测序结果基本一致,表明转录组测序数据可靠。【结论】摘除卵巢后藏姜母猪血清雌激素水平降低,甘油三酯和总胆固醇水平升高,背最长肌的肌间脂肪含量降低,与CALML5、PLCZ1、PIK3C2G、IL6等33个参与脂代谢调控DEGs的差异表达有关,且涉及胆汁酸分泌、磷脂酰肌醇3-激酶信号传导调控等功能条目及糖酵解/糖异生、淀粉和蔗糖代谢等信号通路。

不同妊娠期猪胎盘IGF2和H19基因的表达和印记状态分析

实验旨在探究不同妊娠阶段的猪胎盘IGF2/H19基因的表达规律和印记模式,选用15头遗传背景和产仔数相近的经产母猪,随机均分为3个组,妊娠第40天(D40)、65天(D65)和95天(D95)选择其中1个组采集胎盘组织,利用qRT-PCR技术和亚硫酸氢盐测序法分别检测和比较D40、D65和D95猪胎盘IGF2和H19基因的mRNA表达水平和IGF2基因的差异甲基化区域(DMR2)及H19基因的印记控制区(CTCF3)的甲基化水平。结果表明:D95胎盘的IGF2转录水平显著高于D65胎盘,但与D40无显著差异;H19的mRNA表达水平在3个妊娠期都无显著差异,但在D65胎盘中有上调趋势;相对于D40和D95胎盘,D65胎盘的DMR2呈现高度甲基化状态;D65胎盘的CTCF3甲基化程度低于D40和D95胎盘,但差异不显著。猪胎盘IGF2/H19基因簇的印记控制区甲基化通过调控IGF2/H19表达来促使胎盘完成形态和功能上的变化,从而满足胎儿的生长需求。本研究可为阐明表观遗传调控胎盘发育的分子机制提供重要依据。

克隆哺乳动物的胎盘发育缺陷

克隆又称体细胞核移植（Somatic cell nuclear transfer, SCNT），该技术已在多种哺乳动物中成功建立并被逐渐应用。然而，利用该技术获得的哺乳动物克隆胚胎的发育效率非常低（一般只有1%~5%），这严重限制了克隆技术的应用。胎盘发育缺陷被认为是抑制克隆胚胎发育的一个主要原因。几乎所有的 SCNT 来源胎盘都会出现不同的发育缺陷，如胎盘增生、胎盘血管缺陷、脐带畸形等。胎盘异常的根本原因是滋养层细胞基因组在发育过程中未能建立正确的表观遗传修饰，导致胎盘发育调控相关的重要基因，特别是印迹基因的表达出现异常。印迹基因表达异常导致胎盘的形态异常和功能缺陷，进而影响克隆胚胎的发育能力。目前，虽然有许多提高克隆胚胎发育能力的研究报道，然而在大多数研究中克隆效率并没有得到大幅度的提高，主要原因之一是克隆胚胎的胎盘发育仍然存在诸多缺陷。本文综述了克隆哺乳动物的胎盘异常及其印迹基因表达，并对未来提高克隆效率的研究提出展望。

体细胞克隆猪发育异常研究进展

克隆又称体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT),是一种将已分化的细胞重编程恢复全能性而生产与供体细胞基因型完全相同后代的无性繁殖技术。猪的克隆技术具有重要的应用价值,包括扩繁优良种猪、制备基因修饰猪、保护珍贵和濒危猪种以及研究猪体细胞重编程机制。然而,克隆猪存在出生率和初生重低以及死胎率、新生期死亡率和畸形率高等问题,这些都严重影响了克隆猪的应用前景。供体核的表观重编程错误被认为是克隆效率低和胚胎发育异常的主要原因,但是目前大多数研究通过修正表观重编程错误并没有大幅度提高克隆猪的出生率和健康率。本文综述了克隆猪的异常表型、发育异常的原因以及提高猪克隆效率的有效方法,以期为提高克隆猪的成活率提供参考。

“家畜繁殖学”课程教学改革探讨与思考

“家畜繁殖学”是高等农业院校动物科学专业必修的核心主干课程,是研究家畜动物生殖活动及其调控规律和调控技术的一门基础应用学科。随着现代畜牧业的快速发展,社会对应用型专业人才需求逐步提升,培养高素质动物生产人才的使命更加艰巨。针对新时期背景下课程教学中出现的问题,从优化教学内容、推动科研反哺教学、创新教学方法与手段、增强校企合作等方面,提出了“家畜繁殖学”教学改革的举措与建议,旨在增强学生的创新能力和实践能力。

日粮添加中草药对母猪繁殖性能及免疫机能的影响

试验旨在研究复方中草药对母猪繁殖性能及免疫力的影响。选取80头遗传背景相近、健康、体重相近、经产2胎的母猪,随机分为4组,每组4个重复,每个重复5头猪。对照组为基础日粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、2.0%中草药。预试期10 d,正式试验期从产前10 d开始至25 d断奶。结果显示:与对照组相比,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组仔猪从出生至断奶时的成活率显著提升(P<0.05);试验Ⅰ组母猪从断奶至再次发情的间隔天数显著缩短(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅱ组母猪血清总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)含量显著升高(P<0.05);试验Ⅱ组、试验Ⅲ组母猪血清神经肽Y(NPY)含量均显著升高(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅲ组母猪血清促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、四碘甲状腺原氨酸(T4)含量显著升高(P<0.05),试验Ⅱ组三碘甲状腺原氨酸(T3)、催乳素(PRL)含量显著升高(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅲ组母猪血清总抗氧化能力(T-AOC)显著提高(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅲ组母猪血清补体C3和免疫球蛋白M(IgM)含量显著升高(P<0.05);各试验组母猪血清免疫球蛋白G(IgG)和白细胞介素-2(IL-2)含量显著提高(P<0.05);试验Ⅱ组母猪血清白细胞介素-4(IL-4)含量显著升高(P<0.05)。研究表明,日粮中添加复方中草药可通过调节机体生殖激素水平,增强母猪机体的抗氧化和免疫力,提高仔猪断奶存活率,适宜添加量为1.0%。

从江香猪miR-146b-3p的组织表达、靶基因预测及其初步研究

本研究以从江香猪和大白猪为实验对象,用颈环qRT-PCR法分析miR-146b-3p在从江香猪和大白猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、大肠、小肠8种组织中的表达量,利用软件miRNA22.2和TargetScan预测从江香猪miR-146b-3p的靶基因及其结合位点,并用普通PCR技术对从江香猪miR-146b-3p前体序列进行克隆验证,构建其真核表达载体并转染至从江香猪肌细胞,同时采用qRT-PCR方法检测生长相关基因生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)与IGF-1的表达情况。结果显示:miR-146b-3p在从江香猪小肠组织中的相对表达量最高,显著高于其他组织,在背最长肌组织中表达量最低(P<0.01);miR-146b-3p在大白猪肝脏和肺脏组织中表达量最高,心脏中最低(P<0.01)。除心脏与大肠外,miR-146b-3p在从江香猪其余组织中的表达量均显著高于大白猪(P<0.05)。分析发现miR-146b-3p与GHR 3’UTR存在靶位点;在从江香猪肌细胞中超表达miR-146b-3p后能极显著下调GHR的表达,而对IGF-1表达量的影响不显著。以上结果表明miR-146b-3p在动物生长发育过程中扮演着至关重要的角色,该结果为下一步研究miR-146b-3p调控相关基因参与动物生长发育的分子机制奠定了理论依据和实验基础。

新生仔猪的护理及寄养

仔猪生长和存活直接关系到养猪生产的经济效益。初生仔猪免疫调节能力较差,营养、环境以及生理等因素变化都会对仔猪的生长和存活造成影响,因此初生仔猪的科学护理和合理寄养是提高仔猪断奶前存活率的关键措施。本文将从仔猪断奶前死亡的原因分析、护理和寄养措施等方面进行论述,为提高养猪生产效率提高参考。

过表达H3K9me3去甲基化酶对猪克隆胚胎体外发育效率的影响

为了探索过表达组蛋白H3K9me3去甲基化酶KDM4B/KDM4D对猪克隆胚胎体外发育效率的影响,研究构建了鼠源KDM4B/KDM4D表达载体,通过体外转录获得KDM4B/KDM4D mRNA并将其分别显微注射至猪克隆胚胎。结果显示两组注射的克隆胚胎的H3K9me3水平、卵裂率和囊胚率与对照克隆胚胎无显著差异,但两组注射的克隆胚胎的H3K9me3去甲基化酶表达水平显著高于无注射的对照克隆胚胎,且注射KDM4B mRNA的克隆胚胎的囊胚细胞数显著高于注射KDM4D mRNA的克隆胚胎及对照克隆胚胎,表明过表达组蛋白H3K9me3去甲基化酶KDM4B可以显著提高猪克隆胚胎的体外发育效率。

预防母猪难产与产后护理措施

产仔数是关乎养猪效益的重要经济指标,但在母猪分娩和哺乳过程中,母猪群体会出现难产、产后咬仔、产后瘫痪等现象,对母猪的生产性能和仔猪的存活率产生负面影响。母猪出现难产可能与母猪年龄小、产道窄、母猪过肥、胎儿过大等因素有关。因此,做好母猪的适时配种、加强妊娠母猪的饲养管理以及产后护理是提高母猪繁殖机能和生产效益的重要措施。

猪胎盘营养转运相关基因在不同妊娠期的表达

【目的】探究不同妊娠时期猪胎盘的氨基酸、葡萄糖、脂肪酸转运体的表达模式。【方法】选择15头遗传背景、产仔数接近的杜洛克2~4胎经产健康母猪平均分为3组,所有母猪发情后使用相同公猪精液进行人工授精,在妊娠第40天(D40)、65天(D65)和95天(D95)通过麻醉分别取出每组母猪子宫,快速打开子宫分离出每个胎儿的胎盘组织,提取胎盘组织总RNA并反转录合成cDNA,利用合成的引物进行普通PCR扩增,用2.0%琼脂糖凝胶检测扩增产物。采用实时荧光定量PCR检测并比较3个时期胎盘中氨基酸、葡萄糖、脂肪酸转运体相关基因mRNA相对表达水平。【结果】PCR检测结果显示,氨基酸转运体相关基因(SLC7A1、SLC7A2、SLC7A3、SLC7A4、SLC7A10、SLC1A3、SLC1A5、SLC38A10、SLC36A1)、葡萄糖转运体相关基因(SLC2A1、SLC2A2、SLC2A3、SLC2A10、SLC2A12、SLC2A13)及脂肪酸转运体相关基因(FATP1、FATP2、FATP3、FATP4、FABP3、FABP5、FABP7、CD36)的片段长度均与预期相符。实时荧光定量PCR结果显示,在氨基酸转运体中,D65胎盘中SLC7A4、SLC7A10、SLC38A10基因表达水平显著高于D40胎盘(P<0.05),而SLC7A2基因表达水平显著低于D40胎盘(P<0.05),且D65胎盘的SLC1A3和SLC7A4基因表达水平均显著低于D95胎盘(P<0.05);在葡萄糖转运体中,D65和D95胎盘的SLC2A3和SLC2A13基因表达水平显著高于D40胎盘(P<0.05),D95胎盘的SLC2A1、SLC2A2和SLC2A12基因表达水平显著低于D65胎盘(P<0.05);在脂肪酸转运体中,D65胎盘的FATP2、FATP4、FABP3、FABP5、FABP7和CD36基因表达水平显著高于D40胎盘(P<0.05),而FATP1、FATP4和CD36基因表达水平显著低于D95胎盘(P<0.05)。【结论】在猪妊娠过程中,胎盘中SLC7A10、SLC38A10、SLC7A4、SLC2A3、FATP1、FATP4、FABP5、CD36等基因可能是影响胎儿生长发育的重要营养转运基因。

PBL教学模式在家畜繁殖学实验教学改革中的应用探索

家畜繁殖学是一门实践性很强的课程,探索实验教学新模式对提高该课程教学效果具有重要作用。教师将学生分为两组,即采用传统教学模式的传统组和应用PBL教学模式的PBL组,对比问题式学习教学方法(problem-based learning,PBL)和传统方法在家畜繁殖学实验教学中的效果。结果表明:PBL组学生在实验报告、实验操作和结果展示等方面的能力提升优于传统组;问卷调查显示,PBL组学生对实验趣味性、实验创新性、能力提升等方面的满意度高于传统组。说明PBL教学法有助于提高家畜繁殖学的教学效果。