黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺优化

目的优化黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺。方法在单因素试验基础上,以蒸制时间、蒸制次数、烘制温度为影响因素,外观性状,红景天苷、特女贞苷、女贞苷G13、醇溶性浸出物含量,DPPH、ABTS自由基清除率的总评“归一值”(OD值)为评价指标,星点设计-响应面法优化炮制工艺。结果最优工艺为蒸制时间70 min,蒸制次数7次,烘制温度90℃,OD值为0.8415。结论该方法简便可靠,稳定可行,可用于黑豆黄酒共制女贞子。

炮制对川产郁金活血化瘀作用影响研究

目的研究川产郁金及其炮制品的活血化瘀作用。方法结合郁金传统功效,建立了气滞血瘀大鼠模型,观察黄丝郁金、绿丝郁金及其酒炙、醋炙品对血浆血管性血友病内皮因子(vWF)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、前列腺素2(PGI 2)/血栓素A2(TXA 2)及其稳定代谢产物6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF 1α)/血栓素B2(TXB 2)的影响。结果模型组vWF、ET-1、TXA 1、TXB 2水平升高;NO、NOS、PGI 2、6-keto-PGF 1α、PGI 2/TXA 2和6-keto-PGF 1α/TXB 2显著降低(P<0.01)。与模型组相比,黄丝郁金、绿丝郁金及其炮制品使各项指标不同程度地回调,酒黄丝郁金可显著提高NO、NOS、PGI 2/TXA 2、6-keto-PGF 1α/TXB 2(P<0.05或P<0.01)。结论酒炙增强郁金活血化瘀作用的炮制原理可能在于增强郁金对NOS/NO体系和花生四烯酸环氧合酶代谢的调控,从而抑制血小板聚集、扩张血管、保护血管内皮。

黄丝郁金产地加工与饮片炮制工艺的一体化研究

目的优化黄丝郁金产地加工与饮片炮制的一体化工艺(以下简称“一体化炮制工艺”)。方法按热浸法测定黄丝郁金中醇溶性浸出物的含量,采用高效液相色谱法测定姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的含量;在确定产地加工工艺的基础上,以醇溶性浸出物及姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量的总评归一(OD)值为考察指标,切片含水量、切片厚度、干燥温度为考察因素,以单因素实验结合星点设计-响应面法优化黄丝郁金的炮制工艺并验证,同时与按2020年版《中国药典》(一部)方法制备的黄丝郁金传统饮片进行比较。结果最优一体化炮制工艺为取新鲜黄丝郁金药材,置于沸水中煮5 min,于50℃烘箱中干燥至切片含水量40%,切2 mm片,再置于50℃烘箱中干燥至饮片含水量≤15.0%。经实验验证,醇溶性浸出物及姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量的平均OD值(0.8113,RSD=2.13%)与预测值(0.8481)的偏差为4.34%。与传统炮制工艺所得饮片比较,一体化炮制工艺所得黄丝郁金饮片中醇溶性浸出物及姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量的OD值均较高。结论优化所得一体化炮制工艺操作简便且稳定、可行。

基于化学计量学研究黄丝郁金及醋制品化学成分差异

目的:比较黄丝郁金生品、不同醋制品(醋蒸、醋煮、醋炒)中的挥发性成分及姜黄素类成分。方法:样品经水蒸气蒸馏法提取,利用GC-MS技术分析3批生品及其不同醋制品中挥发性成分,采用多元统计分析方法找出主要差异性成分,并以3个主要姜黄素类成分为评价指标,分析不同醋制方法之间的差异。结果:3批生品、醋蒸品、醋煮品、醋炒品中分别鉴定出化合物23、31、29、28个,共有成分12个。此外,醋制能增加姜黄素的溶出度。结论:对黄丝郁金及其不同醋制品姜黄素类成分及挥发性成分进行对比研究,有助于促进各地醋制工艺统一,为筛选出最佳醋制工艺提供理论依据;对促进不同醋制品的临床应用也具有积极指导意义。

盐制对五子衍宗丸主要化学成分含量的影响

目的:通过测定不同炮制品组方五子衍宗丸中浸出物及绿原酸、鞣花酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲的含量,研究盐制对五子衍宗丸中浸出物及8个成分含量的影响。方法:按照2020年版中国药典四部2201项下方法测定水溶性及醇溶性浸出物含量;采用HPLC法测定样品中上述8个成分的含量。结果:五子衍宗丸中药物炮制后组方水溶性及醇溶性浸出物的含量明显增加,增加程度为盐制组>药典组。炮制后组方没有新的化学成分出现,但峰面积发生变化;药典组及盐制组绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷的含量升高,紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲的含量降低;盐制组鞣花酸的含量升高,但药典组鞣花酸的含量降低。结论:五子衍宗丸药物炮制后组方能促进饮片中化学成分的溶出,增加复方浸出物的含量;所建立的含量测定方法稳定、可靠,8个成分含量的变化可为研究五子衍宗丸中药物炮制前后组方化学成分、药理药效提供一定的依据。

炮姜饮片炮制过程中颜色变化与其成分含量的相关性分析

目的:建立不同炮制程度炮姜中7个成分(姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、10-姜酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚)的含量测定方法,同时分析其与颜色的相关性。方法:利用HPLC和色彩色差计测量数据,通过SPSS 26.0进行统计学分析。结果:在炮姜炮制过程中,随着炮制程度的加深,样品粉末的色度值L^(*)、b^(*)值降低,a^(*)值呈现先升后降的趋势;姜酚类成分含量降低,姜酮和姜烯酚类成分含量呈现先升后降的趋势。主成分分析根据炮姜中7个成分含量对不同炮制程度的炮姜进行区分,并得出7.5 min为最佳炮制终点。结论:该结果为炮姜饮片质量评价提供了一种新的检测指标,为炮姜炮制工艺优化和质量评价提供了参考。

姜的炮制沿革及炮制品现代研究进展

姜作为一种药食同源品种,具有广泛的应用价值。历代医药古籍记载,姜有生姜、干姜、炮姜、煨姜、姜炭等多种炮制品。笔者对古今相关文献进行查阅和梳理,理清姜炮制的发展历程,总结其炮制工艺、炮制前后化学成分和炮制品的药理作用等现代研究进展,为姜及其炮制品的深入研究提供参考依据。

天然药物治疗糖皮质激素性骨质疏松症的研究进展

糖皮质激素被广泛用于治疗各种炎症和自身免疫性疾病,其中糖皮质激素性骨质疏松症(glu-cocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)是其毒副作用之一[1]。作为一种继发性骨质疏松症,GIOP的临床表现为骨量减少等,导致骨折发生率增加。现代医学对GIOP的治疗是以药物为主。

黑豆黄酒共蒸女贞子HPLC指纹图谱及抗氧化活性的谱效关系

目的建立黑豆黄酒共蒸女贞子药材的HPLC指纹图谱,并研究其与抗氧化活性之间的谱效关系。方法采用高效液相色谱(HPLC)法建立15批黑豆黄酒共蒸女贞子的指纹图谱,并进行相似度评价和共有峰指认。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)以及羟基等自由基清除率评价女贞子的抗氧化活性,并采用灰色关联度法和偏最小二乘分析法分析黑豆黄酒共蒸女贞子中共有峰与抗氧化活性的谱效关系。结果建立了15批黑豆黄酒共蒸女贞子的HPLC指纹图谱,确定了其中30个色谱峰为共有峰,相似度均不低于0.953;通过对照品比对法指认了其中7个色谱峰。谱效关系表明,色谱峰7、11、14(红景天苷)、16、18、19、20、26(特女贞苷)和30号色谱峰为女贞子中与DPPH自由基清除能力相关性大的成分;色谱峰7、11、18和30号色谱峰为女贞子中与ABTS自由基清除能力相关的关键成分;色谱峰5、6和13号峰为女贞子中与羟基自由基清除能力具有相关性的成分,可为该药材质量控制与应用开发提供参考。结论通过谱效关系可得出女贞子抗氧化作用是多种成分共同作用的结果,可为黑豆黄酒共制女贞子的药效物质基础研究与质量控制提供参考。

基于指纹图谱及化学模式识别研究盐制对五子衍宗丸化学成分的影响

目的建立不同炮制品组方五子衍宗丸(Wuzi Yanzong Pills,WYP)的HPLC指纹图谱,研究盐制对WYP化学成分的影响。方法采用HPLC法建立不同炮制品组方WYP的指纹图谱,并进行相似度评价,采用方差分析、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)与偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对结果进行评价。结果WYP全生品组、药典组、盐制组指纹图谱相似度均大于0.9,标定了18个共有峰,利用对照品指认出绿原酸(5号峰)、鞣花酸(10号峰)、金丝桃苷(11号峰)、异槲皮苷(12号峰)、毛蕊花糖苷(13号峰)、紫云英苷(14号峰)、槲皮素(15号峰)、山柰酚(17号峰)、五味子醇甲(18号峰)9个成分,归属性分析表明峰2来源于枸杞子,峰3、5、7、9、11、12、14、15、17来源于菟丝子,峰6、8、10、16来源于覆盆子,峰13来源于车前子,峰18来源于五味子,峰1是覆盆子和五味子共有成分,峰4是枸杞子和覆盆子共有成分。药物炮制后组方WYP未出现色谱峰的增加,但峰面积发生变化。通过CA将WYP全生品组、药典组、盐制组聚为3类,PCA筛选出4个主成分,PLS-DA标记出峰1、13(毛蕊花糖苷)、10(鞣花酸)、7、4、11(金丝桃苷)、12(异槲皮苷)、3、5(绿原酸)共9个差异性成分;绿原酸、鞣花酸、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰酚、五味子醇甲及峰1、3、4、7、8共11个成分可能是不同炮制品组方WYP的差异标志物。结论建立的指纹图谱测定方法稳定、可靠,炮制后组方WYP的化学成分发生变化,结果可为WYP中如何选用药物炮制品提供一定的依据。

不同炮制方法对川芎中化学成分的影响研究

通过测定川芎不同炮制品中浸出物的含量及绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、藁本内酯的含量,研究不同炮制方法对川芎醇溶性浸出物及6种成分含量的影响。浸出物的测定按照2020年版《中国药典》四部2201项下醇溶性浸出物测定法进行;含量测定采用Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.5%醋酸溶液(B),梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长285 nm,进样量10μL。结果表明,与生川芎相比,川芎炮制品的浸出物含量均明显增加,增加程度为蜜川芎>酒川芎>芷川芎>茶川芎。高效液相测定方法便捷、可靠,川芎及其炮制品中绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、藁本内酯线性关系良好,精密度、重复性、稳定性及加样回收率均良好。川芎炮制前后共有色谱峰15个,指认了其中8个,与炮制前相比,川芎蜜炙、酒炙后新增2个色谱峰,白芷提取物炮制后新增了4个色谱峰;酒川芎中绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、藁本内酯的含量均减少;蜜川芎、茶川芎、芷川芎中除阿魏酸含量增加外,其余5种成分含量均减少。黄酒、蜂蜜、茶叶及白芷提取物均能促进川芎中化学成分的溶出,增加浸出物的含量;川芎不同炮制品中6种成分含量的变化可为研究川芎不同炮制品化学成分、药效变化提供一定的依据。

五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的:观察由不同炮制品组方的五子衍宗丸对肾精亏虚大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨其对生精细胞的保护作用。方法:将SD大鼠随机分成空白组、模型组、全生品组、药典组、盐制组,每组8只。通过给予雷公藤多苷片复制肾精亏虚模型(剂量20 mg·kg^(-1)),利用流式细胞术(FCM)分析睾丸中生精细胞凋亡情况,运用免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测睾丸中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。采用高效液相色谱法(HPLC)比较由不同炮制品组方的五子衍宗丸中8个成分(绿原酸、鞣花酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲)的含量,流动相乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,5%~15%A;5~10 min,15%~17%A;10~25 min,17%A;25~35 min,17%~26%A,35~60 min,26%~56%A),检测波长254 nm。结果:与模型组比较,各给药组对生精细胞总凋亡率,Bcl-2和Bax表达均有改善作用,且药典组与盐制组有显著作用(P<0.01);同时,药典组与盐制组的改善作用明显优于全生品组(P<0.05)。药物炮制后组方的五子衍宗丸中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷含量增加;盐制组鞣花酸含量增加,但药典组鞣花酸含量减少;盐制组样品中毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲的含量高于药典组样品。结论:五子衍宗丸可能通过抑制Bax和促进Bcl-2的蛋白表达来减少大鼠睾丸中生精细胞的凋亡,发挥其补肾益精作用;组方药物炮制后抗生精细胞凋亡作用增强可能与炮制后化学成分含量的变化有关。

知母黄柏盐制前后组成滋肾丸对慢性前列腺炎及肠道菌群的对比研究

目的:对比研究知母黄柏盐制前后组成滋肾丸对慢性前列腺炎(CP)的药效,并基于16S rRNA技术探讨盐制缓和知母黄柏苦寒之性对大鼠肠道菌群的影响。方法:采用注射角叉菜胶的方法制备CP模型,模型制备成功后,将大鼠随机分为模型对照组、盐制滋肾丸5.4 g/kg、1.8 g/kg组、生品滋肾丸5.4 g/kg、1.8 g/kg组,前列康1.5 g/kg组,另设正常对照组,并按所述剂量灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,连续给药21 d。于末次药后,检测相关指标。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠前列腺组织的病变程度、CD45细胞数量以及前列腺匀浆液中COX-2、LTB4和TNF-α的水平显著增加(P<0.01);与模型对照组相比,前列康1.5 g/kg组、盐制滋肾丸5.4 g/kg组、生品滋肾丸5.4 g/kg组的病变程度、CD45细胞数量显著降低(P<0.01),前列腺匀浆液中COX-2、LTB4和TNF-α水平明显降低(P<0.05或P<0.01),生品滋肾丸1.8 g/kg组的病变程度明显降低(P<0.05),盐制滋肾丸1.8 g/kg组的前列腺匀浆液中COX-2、LTB4和TNF-α水平明显降低(P<0.05);盐制滋肾丸5.4 g/kg组在降低TNF-α水平明显优于生品滋肾丸5.4 g/kg组(P<0.05)。与正常对照组相比,模型对照组中厚壁菌门和乳杆菌属相对丰度明显降低(P<0.05)。与模型对照组比较,盐制滋肾丸5.4 g/kg组以及生品滋肾丸5.4 g/kg组均表现出不同的群落组成。与生品滋肾丸5.4 g/kg组比较,盐制滋肾丸5.4 g/kg组乳杆菌属相对丰度显著增加(P<0.01)。但各滋肾丸组大鼠肠道菌群与正常对照组之间仍存在差异,给药后并没有恢复到正常状态。结论:知母黄柏盐制前后组成滋肾丸对CP都有显著的疗效,对CP大鼠肠道菌群发挥不同的调控作用,并且知母黄柏盐制后组方疗效略优。

基于16S rDNA测序技术分析药对知母-黄柏盐炙前后配伍对2型糖尿病大鼠肠道菌群的影响

目的:研究药对知母-黄柏盐炙前后配伍对2型糖尿病(T2DM)大鼠肠道菌群的影响,探讨不同配伍药对防治T2DM与肠道菌群的关系。方法:以100只SPF级雄性SD大鼠为研究对象,从中随机选取10只作为正常对照组,其余采用高脂高糖饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ,45 mg/kg)腹腔注射建立T2DM大鼠模型。造模成功的大鼠随机分为模型对照组、生知母-生黄柏6.48 g/kg组、盐知母-盐黄柏6.48 g/kg组、生知母-盐黄柏6.48 g/kg组、盐知母-生黄柏6.48 g/kg组。T2DM大鼠按6.48 g/kg(按生药量计)每天灌胃各配伍药对水煎液,模型对照组与正常对照组则给予等体积的生理盐水10 mL/kg。造模和给药前后定期监测大鼠空腹血糖及体质量,连续给药30 d后取大鼠粪便。基于16S rDNA高通量测序技术对各组大鼠肠道菌群进行基因测序。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠空腹血糖值(FBG)显著升高(P<0.01),体质量显著降低(P<0.01),并出现明显的肠道菌群紊乱,包括chao1、Shannon、Simpson和PD指数显著降低(P<0.01),及门到属水平下的菌群变化:拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟杆菌纲(Bacteroidia)、芽孢杆菌纲(Bacilli)及乳酸杆菌属(Lactobacillus)丰度明显增加(P<0.01),而厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、梭菌纲(Clostridia)、Romboutsia及拟杆菌属(Bacteroides)丰度明显降低(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,"知母-黄柏"盐炙前后配伍药对能明显地降低T2DM大鼠血糖水平(P<0.01),增加体质量(P<0.05),提高肠道菌群多样性,增加梭菌纲、Romboutsia及拟杆菌属等有益菌的丰度,降低乳酸杆菌、致病菌芽孢杆菌的丰度,有效调节与改善T2DM大鼠的肠道菌群紊乱,尤以盐知母-盐黄柏6.48 g/kg组效果为最佳。结论:由"知母-黄柏"均盐炙后的配伍药对降低T2DM大鼠血糖水平及改善肠道菌群紊乱的效用更加明显,提示药对盐炙后增效机制可能与其调节肠道微生态相关。