肝郁气滞、肝郁脾虚证慢性应激模型大鼠外周血Th17/Treg平衡偏移的比较

目的 以慢性应激大鼠为研究对象,比较肝郁气滞和肝郁脾虚2种不同证型大鼠外周血Th17/Treg平衡偏移的异同。方法 用慢性束缚、束缚+过度疲劳+饮食失节、过度疲劳+饮食失节的方法,分别建立肝郁气滞、肝郁脾虚、脾虚动物模型。检测大鼠体质量改变;旷场实验、糖水偏好实验检测大鼠行为学的变化;Elisa法检测大鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-17A、IL-10、IL-6、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的含量;流式细胞术检测大鼠外周血单个核细胞中Th17、Treg细胞占比。结果 与空白组比较,肝郁气滞组、肝郁脾虚组、脾虚组大鼠的体质量增长明显变慢(P<0.05);肝郁气滞组和肝郁脾虚组大鼠的糖水偏好率,旷场实验中总路程、中央路程、平均速度较空白组和脾虚组都显著下降(P<0.05);肝郁气滞组大鼠脾脏指数较空白组显著降低(P<0.01)。与空白组比较,肝郁气滞组和肝郁脾虚组大鼠外周血中Treg细胞占比显著下降(P<0.01,P<0.05),肝郁气滞组大鼠外周血Th17的细胞占比显著降低(P<0.01);大鼠外周血清中,Th17相关细胞因子方面,肝郁气滞组大鼠的IL-17A、IL-6表达较空白组降低(P<0.01),肝郁脾虚组大鼠的IL-17A含量较空白组显著下降(P<0.05);Treg细胞相关细胞因子方面,肝郁气滞组和肝郁脾虚组大鼠较空白组IL-10含量显著降低(P<0.01);肝郁气滞组大鼠外周血Th17/Treg和血清IL-17A/IL-10的比值明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论 慢性应激模型大鼠中,肝郁气滞和肝郁脾虚证都会引起机体免疫功能下降,肝郁气滞证模型大鼠的免疫功能倾向于Th17/Treg细胞偏移引起的免疫抑制,肝郁脾虚证模型大鼠的免疫功能下降与Th17/Treg平衡偏移无关。

柴胡疏肝散及逍遥散对慢性心理应激大鼠血清皮质酮及胃肠激素的影响

目的研究慢性应激状态下大鼠血清皮质酮(CORT)及胃肠激素(GAS、MOT)水平的变化及逍遥散与柴胡疏肝散的干预作用。方法大鼠分为空白对照组、模型组、柴胡疏肝散组及逍遥散组。除空白对照组外,各组均复制慢性多相性应激模型,同时,柴胡疏肝散组及逍遥散组分别灌服柴胡疏肝散及逍遥散21d,空白对照组与模型组灌服等容积生理盐水。以旷场实验观察各组大鼠的行为学变化,以放免法检测各组大鼠血清CORT、GAS及血浆MOT。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体重明显降低(P<0.01),旷场活动次数明显减少(P<0.01),血清CORT明显升高(P<0.01),血清GAS及血浆MOT明显下降(P<0.01);与模型组比较,柴胡疏肝散组及逍遥散组大鼠体重明显增加(P<0.05,P<0.01),旷场活动次数明显增加(P<0.05,P<0.01),血清CORT明显下降(P<0.01),血清GAS与血浆MOT也明显回升(P<0.05)。结论慢性多相性应激通过对大鼠血清CORT、GAS及血浆MOT的影响,致使大鼠精神状态异常、胃肠功能紊乱以及生长发育减缓。中药柴胡疏肝散及逍遥散通过对大鼠CORT、GAS及MOT的调节来抑制慢性应激对大鼠精神状态、胃肠功能及生长状态的不良影响。

逍遥散对慢性应激状态下大鼠海马神经细胞内糖皮质激素受体表达的影响

探讨逍遥散治疗血清对慢性应激大鼠状态下海马神经细胞内糖皮质激素受体蛋白表达的影响。方法:采用免疫印迹法检测慢性应激大鼠模型血清以及逍遥散治疗血清干预体外培养的海马神经细胞后,其胞内糖皮质激素受体(iGR)表达情况。结果:慢性应激大鼠模型血清与谷氨酸(Glu)共同作用于大鼠海马神经细胞对iGR表达下调的作用最明显,MK-801未能完全阻断iGR的表达下调,逍遥散治疗血清能够明显对抗慢性应激引起的iGR表达下调,但与空白组比较还存在差异,当与MK-801共同作用时,这种对抗iGR含量降低的作用倾向更加显著。结论:模型血清中可能存在Glu-NR以外途径的其他信号通路下调GR表达,逍遥散治疗血清对维持海马神经细胞iGR表达量的稳定起到一定作用,与MK-801可能协同性地促进慢性应激状态下海马负反馈调节功能的恢复。逍遥散可能通过包括Glu-NR-Ca2+-cAMP-iGR细胞信号传导通路在内的多种途径维持海马神经细胞iGR的稳态,以促进过度的应激反应尽快终止。

逍遥散对慢性应激大鼠海马突触体结构可塑性的影响

目的:观察逍遥散对多相性应激大鼠海马CA3区神经元结构的影响,探究逍遥散抗应激损伤大鼠海马神经突触结构可塑性的机制。方法:W istar大鼠随机分为空白组、模型1组、模型2组、治疗1组、治疗2组,每组10只。采用慢性多相性应激模型,透射电镜观测比较各组大鼠CA3区神经突触超微结构变化。结果:模型1组及模型2组大鼠海马神经元突触的数密度与面密度较空白组均有明显降低(P<0.01),突触连接带的平均面积则无明显变化(P>0.05),而治疗1组与治疗2组大鼠海马神经元突触的数密度与空白组相比则无明显差异(P>0.05);面密度与突触连接带的平均面积则均有所减小。与模型1组相比,两个治疗组大鼠海马神经元突触的数密度与面密度均明显增大。结论:多相性应激可以损伤大鼠的神经突触结构,影响突触间的相互连接。而逍遥散则能减少应激对原有的突触及突触连接的损伤,促进新的突触与突触连接的形成。

肝肾“藏泄互用”内涵发微

肝肾藏泄互用关系通常指肝主疏泄与肾主藏精对人体生殖功能的协同调控作用。认为成体干细胞是先天之精的物质基础;对于肝藏象理论的深入研究证实,中医学中肝藏象的功能与以"下丘脑—垂体"为核心的"神经—内分泌—免疫"网络密切相关。肝肾藏泄互用的关系不仅体现在维持人体正常生殖功能方面,更广泛的生理意义体现在维持人体正常的生长发育及机体疾病或损伤后的修复过程。

逍遥散对应激大鼠海马神经元内Ca^(2+)浓度及NR_1 mRNA表达的影响

目的:研究逍遥散对慢性应激大鼠海马神经元内Ca2+浓度及NR1 mRNA表达的影响,探讨逍遥散对应激损伤学习记忆保护的作用机制。方法:采用慢性多相性应激大鼠模型,以Fura-2负载及荧光分光光度计检测大鼠海马突触体内Ca2+浓度,RT-PCR法检测海马神经元内NR1 mRNA表达的变化。结果:模型组大鼠海马突触体内Ca2+浓度及NR1 mRNA表达均明显上升(P<0.01),而与模型组比较,逍遥散组大鼠突触体内Ca2+浓度及NR1 mRNA表达明显回落(P<0.05,P<0.01)。结论:抑制慢性应激所导致的大鼠海马神经元内NR1 mRNA的过度表达,减少神经细胞膜上NR的数量,从而减轻慢性应激状态下海马神经元内Ca2+超载所致的细胞毒性损伤。这可能是逍遥散抗应激损伤的关键机制。

逍遥散对应激大鼠海马突触体内PKC活性及Ca^(2+)浓度的影响

目的:探讨逍遥散对慢性心理应激大鼠海马突触体内Ca2+浓度及蛋白激酶C(PKC)活性的影响,进一步研究其对心理应激损伤学习记忆保护作用的机制。方法:Wistar大鼠随机分为五组,采用慢性多相性应激模型,以Fura-2负载及荧光分光光度计检测大鼠海马突触体内Ca2+浓度,采用琼脂糖凝胶电泳法检测突触体内PKC活性。结果:两个模型组大鼠海马突触体内Ca2+浓度及PKC活性均有上升(P<0.01),而逍遥散组与模型组比较,突触体内Ca2+浓度及PKC活性则明显回落(P<0.05或P<0.01)。结论:慢性多相性应激可升高大鼠海马突触体内Ca2+浓度及PKC活性,逍遥散具有对抗应激升高大鼠海马突触体内Ca2+浓度及PKC活性的作用。

三焦的实质及其临床意义

三焦的概念历来争议较多 ,众说不一。从临床的角度对三焦的实质进行探讨 ,提出了作为六腑之一的三焦为体腔内包裹于脏腑之外的网膜结构 ,但在生理上还包括了肺、脾、肝、肾等脏腑的部分功能 。

心理应激相关疾病的研究探要

心理应激是机体通过认识、评价而察觉到应激原的威胁时引起的心理、生理机能改变的过程。是个体对面临的威胁或挑战作出适应和应对的过程。通常心理应激引起的防御反应是一种保护机制 ,不一定引起病理改变过程。心理应激主要通过下丘脑 -垂体 -肾上腺轴 (HPAA)为中心的神经 -内分泌 -免疫(NIM)网络来影响大脑某些脑区如 :海马、蓝斑核等的功能 ,引起这些脑区的功能紊乱甚或器质性损伤 ,从而导致各类精神性疾病的发生。心理应激是全身多个系统疾病发生的诱因。近年来 ,随着人们生活节奏的加快 ,工作紧张度的升高 ,因心理应激所引发的各种相关疾病的发生率也越来越高 ,就近年来心理应激相关疾病的研究动态作了系统的回顾 ,并对其机制进行了初步探讨 ,为这类疾病的防治提供了一些有益的思路。

葛根芩连汤新用

葛根芩连汤出自<伤寒论>,由葛根、黄芩、黄连、炙甘草等组成.原用于治疗太阳病误下后,表证未解而兼有里热下利的太阳病变证.

“毒邪”的内涵及其致病特点

系统回顾历代医籍中有关毒邪论述,对毒邪的概念进行了归纳分类,提出毒邪(邪之甚者)致病的发展过程分为气、血、精三个阶段,并概括毒邪致病在不同阶段的临床特征,为毒邪致病的临床辨治提供新的思路。

加味四逆散抗慢性心理应激损伤的机理研究——对下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素及环核苷酸系统的影响

[目的]观察加味四逆散(JSS)对慢性心理应激大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及环核苷酸系统的影响。[方法]Wistar大鼠随机分为3组,即正常组、模型组和加味四逆散(JSS)组;除正常组外,其他组大鼠均采用束缚法复制慢性心理应激反应模型,JSS组于造模前1 h按3.38 g/kg剂量灌胃给药,连续14 d;采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测下丘脑CRH信使核糖核酸(CRH mRNA)的表达,放射免疫法检测下丘脑环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸乌苷(cGMP)含量。[结果]慢性心理应激大鼠下丘脑CRH mRNA表达显著增高(P<0.05),JSS可降低下丘脑CRH mRNA的表达(P<0.05);慢性心理应激可使大鼠下丘脑cAMP、cGMP均显著升高(P<0.01),JSS可显著降低下丘脑cAMP含量(P<0.05),但对cGMP无显著影响。[结论]JSS可通过影响下丘脑CRH和环核苷酸系统参与对慢性心理应激反应的调控,CRH和cAMP可能是JSS抗慢性心理应激损伤的作用环节或靶点。

逍遥散对慢性心理应激损伤大鼠海马神经元的影响

目的:观测逍遥散对多相性应激大鼠海马神经元结构的影响,探究逍遥散抵抗应激损伤大鼠海马神经元结构的机制。方法:大鼠采用慢性多相性应激模型,造模后取材进行Nissl体染色观测海马神经元内Nissl体及Sevier Munger海马神经纤维,以Fura 2负载及荧光分光光度计检测大鼠海马突触体内Ca2 + 浓度。结果:造模组Nissl体数量明显减少,神经元胞体溃变、减少,神经纤维减少、排列紊乱;逍遥散治疗组Nissl体及神经元胞体及神经纤维数量有明显增加,排列更整齐;海马突触体内Ca2 + 浓度均明显升高。结论:多相性应激使大鼠海马神经元损伤从而致神经元内Nissl体减少,这种损伤是可逆或部分可逆的,逍遥散能明显抑制应激对大鼠海马神经元造成的损伤及神经元内Nissl体的减少。海马神经元细胞内Ca2 + 超载可能是慢性心理应激损伤大鼠空间学习记忆重要的神经机制,逍遥散也可能是通过抑制海马神经元细胞外Ca2 + 大量内流,阻止Ca2 + 超载,从而改善应激大鼠的学习记忆状况。

肠易激综合征的中医证候判别分析

目的从计量诊断学的角度研究肠易激综合征(IBS)的中医证候诊断,建立证候判别函数,为IBS中医证候诊断及鉴别诊断提供客观依据。方法对518例IBS患者进行中医临床流行病学调查,以症状为变量,运用逐步判别分析进行统计。结果得出7个判别函数,分别是肝郁脾虚证=-6.185+0.719X1-0.150X2+……-0.185X31-1.869X32;脾肾阳虚证=-12.415+6.788X1+0.221X2+……-0.876X31-0.206X32;脾胃虚弱证=-9.103-0.039X1-1.807X2+……+3.015X31+1.939X32;肝郁气滞证=-8.379-0.563X1+0.793X2+……+1.314X31+5.954X32;脾胃湿热证=-12.804+5.025X1-1.613X2+……-2.569X31-4.810X32;肠燥津伤证=-14.049+3.563X1-1.006X2……+1.303X31-1.532X32;寒湿困脾证=-10.672+6.145X1+1.308X2+……+1.578X31+0.389X32。回顾性误判概率为8.7%,交叉验证误判率为17.2%。结论建立的7类函数判别效果好,对IBS的中医证型诊断及鉴别诊断有一定的参考意义。

逍遥散对慢性心理应激大鼠空间学习记忆能力的影响

目的研究慢性心理应激对学习记忆功能的损害及逍遥散的保护作用。方法Wistar大鼠随机分为空白对照组、病理对照 1组、病理对照 2组、治疗 1组、治疗 2组 ,每组 10只。采用慢性多相性应激模型 ,以Morris水迷宫对大鼠空间学习记忆能力进行测试。结果各组大鼠的平均潜伏期无明显差异 ;空间觅向时间 :与正常对照组相比 ,病理对照 1组及病理对照 2组大鼠明显减小 ( P <0 .0 1) ;而治疗 1组及治疗 2组大鼠的空间觅向时间则无明显差异 (P >0 .0 5 )。与病理对照 1组相比 ,治疗 1组及治疗 2组明显增大 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;与病理对照 2组相比 ,治疗 2组增大 (P >0 .0 5 ) ,治疗 1组无明显变化。结论慢性心理应激可以损伤大鼠的空间学习记忆能力 ,这种损伤可能是部分可逆的。逍遥散对慢性心理应激损伤大鼠学习记忆力具有一定的保护作用。

心理应激人群中医证候分布规律的初步研究

【目的】探讨心理应激人群中医证候的分布规律。【方法】以2870例社会人群为研究对象,运用90项症状自评量表(SCL-90)、自评抑郁量表(SDS)等多个心理量表以及中医五态性格测量表、中医证候四诊信息采集表等进行调查,筛选出心理应激人群,进行中医证候诊断,建立心理应激人群的中医证型及症状、体征的基本信息数据库,初步寻找出心理应激人群中医证型的分布规律。【结果】2870例调查对象中,心理应激组人群2 156例,非心理应激组人群714例。2 156例心理应激组人群中,构成中医典型证型的有1 233例,未构成中医典型证型的有923例,分别占心理应激组总样本数的57.19%和42.81%。心理应激反应所致中医证型多有证候兼挟的特点,但可基本概括为两大类证:肝郁类和脏腑虚损类。证候病位主要在肝(胆)、心、脾(胃),尤以肝(胆)系统为多。【结论】心理应激反应可以形成有一定分布规律可循的中医证型,肝气郁结与脏腑虚损是心理应激病理过程中中医证候形成的两个主要病理因素。中医证候病位分析结果符合中医有关七情伤脏主要损及心肝脾三脏的理论。

逍遥散对慢性心理应激大鼠海马突触体内Ca^(2+)浓度的影响

[目的]观察逍遥散对慢性心理应激大鼠海马突触体内Ca2+的影响,进一步研究逍遥散对心理应激损伤学习记忆保护作用的机制。[方法]Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型Ⅰ组、逍遥散Ⅰ组、模型Ⅱ组、逍遥散Ⅱ组共5组,除空白对照组外,其他组动物均复制慢性多相性应激模型,同时,逍遥散Ⅰ组和逍遥散Ⅱ组分别灌服逍遥散水煎液(1.06g/只)21 d和42 d。空白对照组及模型Ⅰ、Ⅱ组灌胃等容积生理盐水,给药结束后断头取海马匀浆,以Fura-2负载及荧光分光光度计检测大鼠海马突触体内Ca2+浓度。[结果]模型组大鼠海马突触体内Ca2+浓度明显升高,与空白对照组比较,具有显著性差异(P<0.01);逍遥散Ⅰ组Ca2+浓度水平低于模型组Ⅰ组(P<0.01);逍遥散Ⅱ组则低于逍遥散Ⅰ组(P<0.05);与模型Ⅰ组相比,模型Ⅱ组大鼠海马突触体内Ca2+浓度降低(P<0.05)。[结论]应激可使大鼠海马突触体内Ca2+浓度升高,但应激原去除后,其Ca2+浓度又有所回落,表明应激所致的大鼠海马突触体内Ca2+浓度升高是可逆或部分可逆的;逍遥散具有对抗应激所致大鼠海马突触体内Ca2+浓度升高的作用,且这种作用与用药时间呈正相关。

慢性心理应激大鼠下丘脑环核苷酸和不同脑区核团c-fos蛋白表达及加味四逆散的影响

目的 观察慢性心理应激反应大鼠下丘脑环核苷酸系统和不同脑区核团c -fos蛋白表达的变化以及加味四逆散(JWSNS)的影响。方法 采用束缚制动的方法建立慢性心理应激反应大鼠模型,放射免疫法和免疫组织化学法检测大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量和不同脑区核团c -fos蛋白表达的情况。结果 慢性心理应激可使大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量显著升高 ( 1. 309±0. 62和 0. 136±0. 05 ) (P均 <0. 01),并可诱导c- fos在大鼠海马、大脑皮质、杏仁核、下丘脑室旁核(Pa)、室周核(Pe)以及弓状核(Arc)内广泛持续表达,其中以大脑皮质、杏仁核最为密集。JWSNS可明显降低心理应激大鼠下丘脑cAMP、cGMP含量(0. 877±0. 05和 0. 051±0. 02) (P均<0. 05)和上述脑区核团fos样免疫阳性神经元的数目,减少fos蛋白的表达。结论 cAMP、cGMP和c -fos参与慢性心理应激反应的机制;而JWSNS可能通过影响环核苷酸系统和c- fos蛋白的表达对慢性心理应激反应进行调控。

对抑郁症与五脏关系的探讨

抑郁症是一种包括多种精神症状和躯体症状的复杂的情感性精神障碍,其发病机制复杂多样,目前对于该病,还没有一个完整的病机学说。历来抑郁症多从肝郁论治,但现代一些学者通过临床或实验研究发现本病从"心阳郁遏""心胆阳虚""思则气结""肾阳虚""肺气郁、肺阴虚"等除肝以外的其他四藏入手治疗亦能收到良好效果,打破了抑郁症多从肝论治的传统,创新了抑郁症的基本病机,对后世医家在本病的病机认识上起到了启示的作用,为抑郁症的治疗提供了理论基础和依据。

不同治法方药对抑郁模型大鼠海马区自噬的影响

目的:观察抑郁模型大鼠海马脑区自噬水平变化的情况,探讨不同治法方药对其调节作用。方法:60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、右归丸组、四逆散组、四君子汤组,建立慢性不可预知应激抑郁模型。选用糖水偏好实验作为行为学指标,采用免疫荧光、蛋白免疫印迹法检测大鼠海马自噬相关蛋白表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠糖水偏好率显著降低(P<0.01),各给药组糖水偏好率较模型组均显著升高(P<0.05);模型组大鼠海马CA3区LC3绿色荧光增强,各给药组大鼠荧光强度均减弱,四逆散组减弱程度较为明显;模型组大鼠海马组织P62蛋白表达显著降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高(P<0.01),各给药组上述表达趋势均显著逆转(P<0.01),其中四逆散组逆转程度最为显著。结论:慢性应激抑郁模型大鼠海马脑区存在自噬功能异常,四逆散、四君子汤、右归丸治疗抑郁症的机制可能与抑制慢性应激诱导的过度自噬有关,疏肝方药对自噬活性的下调效果优于健脾、补肾方药。