胃乐散对大鼠胃溃疡黏膜EGF、EGFR和TGFβ_1的影响及意义

目的观察胃乐散对大鼠实验性胃溃疡表皮生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)及转化生长因子β1(TGFβ1)的影响,并探讨其作用机理。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型对照组、胃乐散低剂量组、胃乐散中剂量组、胃乐散高剂量组和雷尼替丁组,采用冰醋酸烧灼法制备大鼠胃溃疡模型,连续用药后第14天处死大鼠,取溃疡部位及周围组织提取蛋白,用免疫印迹法检测组织中EGF、EGFR、TGFβ1的含量。结果与正常对照组比较,模型组EG-FR、TGFβ1水平降低(P<0.05),胃乐散高剂量组及雷尼替丁组EGFR升高(P<0.01),胃乐散中、高剂量组的TGFβ1含量高于正常对照组(P<0.01),而模型组EGF的含量较正常对照组增加(P<0.05),但胃乐散各组及雷尼替丁组增加更为明显(P<0.01)。与模型组比较,胃乐散中、高剂量组及雷尼替丁组EGFR、TGFβ1及EGF的表达均显著提高(P<0.01)。结论胃乐散治疗胃溃疡可能是通过促进细胞因子TGFβ1的分泌及促进胃黏膜中EGF和EGFR的表达实现的。

胃乐散对大鼠溃疡组织TXA_2、PGI_2及COX-2含量的影响及意义

目的观察胃乐散对大鼠实验性溃疡血栓素A2(TXA2)和前列腺素I2(PGI2)及环氧合酶2(COX-2)的影响,并探讨其作用机理。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、胃乐散低剂量组、胃乐散中剂量组、胃乐散高剂量组和雷尼替丁组。采用冰醋酸烧灼法制备大鼠胃溃疡模型,连续用药后第14天处死大鼠,取溃疡部位组织提取蛋白。用ELISA法检测组织中血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的水平变化,并观察TXB2/6-Keto-PGF1α的比值变化。Western blot检测组织中COX-2的含量。结果与正常对照组比较,模型组6-Keto-PGF1α、COX-2水平降低(P<0.05),TXB2及TXB2/6-Keto-PGF1α升高(P<0.05);胃乐散高剂量组6-Keto-PGF1α的含量高于正常对照组(P<0.05)。与模型组比较,胃乐散中、高剂量组及雷尼替丁组6-Keto-PGF1α、COX-2的含量增加,特别是胃乐散高剂量组增加更为明显(P<0.01),胃乐散高剂量组及雷尼替丁组TXB2低于模型组(P<0.05),特别是TXB2/6-Keto-PGF1α降低更为显著(P<0.01)。结论胃乐散治疗胃溃疡可能是通过促进PGI2分泌,纠正TXA2/PGI2的失衡来实现的。

胃乐散对大鼠胃溃疡黏膜碳酸氢盐转运蛋白CFTR、SLC26A3及SLC26A6的作用

目的研究胃乐散对大鼠胃溃疡黏膜碳酸氢盐分泌的影响,并探讨其作用机制。方法 SD大鼠48只,随机分为正常对照组,模型组,胃乐散低剂量组[0.075g/(mL·kg)]、中剂量组[0.150g/(mL·kg)]、高剂量组[0.300g/(mL·kg)]和雷尼替丁组[0.030g/(mL·kg)],每组8只。采用冰醋酸烧灼法制备大鼠胃溃疡模型,制模后第2天,各用药组开始给药,连续用药后第14天处死大鼠,取溃疡部位组织提取蛋白,用免疫印迹法(Western blot)检测组织Cl-/HCO-3离子交换体solute carrier26A3(SLC26A3)及solute carrier26A6(SLC26A6)的含量;将大鼠胃溃疡及周围组织切片,用免疫荧光法观察囊性纤维化跨膜转运调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的变化。结果与模型组比较,用药后胃乐散高剂量组及雷尼替丁组大鼠胃黏膜中SLC26A3的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);雷尼替丁组,胃乐散中、高剂量组大鼠胃黏膜中SLC26A6的表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);胃乐散中、高剂量组大鼠胃溃疡黏膜的CFTR表达也明显增加,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论胃乐散能提高大鼠胃溃疡黏膜SLC26A3、SLC26A6和CFTR的表达,增加碳酸氢盐的分泌,保护胃黏膜。

IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在人结直肠腺瘤和结直肠癌中的表达及意义

目的探讨IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ与结直肠腺瘤及结直肠癌发生、发展的关系。方法用免疫组化法检测IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在人结直肠腺瘤和结直肠癌中的表达,用IPWIN60软件测量染色情况,计算平均光密度。结果 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ在正常肠粘膜中少量表达,在结直肠管状腺瘤和绒毛状腺瘤中表达明显增强,结直肠癌中则高表达。与正常肠粘膜组比较,结直肠管状腺瘤组、绒毛状腺瘤组、结直肠癌组的表达均有显著差异(P<0.01);与结直肠管状腺瘤组和绒毛状腺瘤组比较,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在结直肠癌中的表达显著增强(P<0.01)。结论 IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在正常结直肠粘膜、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、结直肠癌中的表达依次增加,IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ可能在结直肠腺瘤及结直肠癌的发生、发展中起一定作用。

小鼠原发性肝癌中胰岛素样生长因子2和H19的表达及意义

目的观察IGF2、H19在原发性肝癌中的表达并了解其意义。方法建立原发性肝癌模型,模型建立后第20周处死小鼠取肝癌及癌旁组织储存于-80℃备用,另取正常小鼠肝脏作对照,用Real time RT-PCR方法检测IGF2、H19 mRNA的变化。结果与对照组比较,IGF2、H19在癌旁及癌组织中的表达都显著增加,在癌组织中增加更为显著P<0.05。结论 IGF2、H19的异常变化与小鼠原发性肝癌的发生发展有关。

胰岛素和IGF-Ⅱ水平的变化与结直肠癌的关系

目的探讨胰岛素和GF-Ⅱ与结直肠癌发生、发展的关系及生物学意义。方法用免疫组化法检测胰岛素在人结直肠腺瘤和结直肠癌中的表达情况;用免疫印迹(Western Blotting)方法检测IGF-Ⅱ在人结直肠腺瘤和结直肠癌中的表达。结果胰岛素在人正常结直肠粘膜及结直肠腺瘤中基本不表达,在结直肠癌中高表达,与正常对照组比较,P<0.01,在Ducks分期的各阶段中表达无差异。IGF-Ⅱ在正常结直肠粘膜中有微量表达,在结直肠腺瘤中的表达较正常结直肠粘膜增加,与正常对照组比较,P<0.01,而在结直肠癌中则高表达,与正常对照组及腺瘤组比较,P<0.01,其在结直肠癌中的表达与Duck分期无显著差异。结论胰岛素在人结直肠癌中高表达;IGF-Ⅱ在人结直肠腺瘤及结直肠癌中均有表达,在结直肠癌中表达更高。这说明胰岛素、IGF-Ⅱ与结直肠癌发生、发展有关。

脑灵素胶囊对小鼠游泳耐力及耐缺氧能力的影响

目的 观察脑灵素胶囊对小鼠游泳耐力及耐缺氧能力的影响。方法 小鼠游泳耐力试验是将小鼠放入温度为 2 0℃、直径 2 5cm、深 15cm的水浴中 ,观察小鼠游泳至下沉时间 ;小鼠耐缺氧能力试验是将小鼠置于容积为2 80ml密闭的广口瓶中 ,瓶内放置 10g干燥的钠石灰 ,观察小鼠在瓶内存活时间。结果 脑灵素胶囊 0 .2g/kg、0 .4g/kg能显著提高小鼠游泳耐力和耐缺氧能力。结论 脑灵素胶囊对小鼠游泳耐力及耐缺氧能力呈剂量依赖性提高。

陈香露白露胶囊对实验性急性胃炎的作用

目的观察中成药陈香露白露胶囊对大鼠急性实验性胃炎的作用。方法分别用0 .3g/kg(低剂量 )、0 .6g/kg(中剂量 )和 1.2g/kg(高剂量 )陈香露白露胶囊灌胃给药 ,观察并比较其对乙醇致大鼠胃粘膜损伤、水杨酸钠诱发大鼠急性胃炎和醋酸致小鼠发生扭体反应的影响。结果陈香露白露胶囊 0 .6g kg和 1.2g/kg均能明显降低乙醇致胃粘膜损伤和水杨酸钠诱发的急性胃炎的溃疡指数 ,0 .3g/kg、0 .6g/kg和 1.2g/kg均可明显降低醋酸所致小鼠发生的扭体反应次数。结论陈香露白露胶囊对大鼠的乙醇致胃粘膜损伤和水杨酸钠诱发的急性胃炎有明显的保护作用 。

反相HPLC法测定兔血浆异钩藤碱浓度及其药物代谢动力学

用ＯＤＳ柱分离，甲醇—水（９５∶５）为流动相，检测波长ＵＶ２５４ｎｍ，建立了兔血浆异钩藤碱浓度的ＨＰＬＣ测定方法。结果显示，血药浓度在００１６～１６μｇ·ｍｌ－１范围内呈线性关系，血浆最低检测浓度为００１６μｇ·ｍｌ－１，绝对回收率为８０５％～８５１％。兔ｉｖＩＲＨＹ２及５ｍｇ·ｋｇ－１，药代动力学过程符合二室开放模型，Ｔ１／２β分别为１３２ｈ和１２５ｈ。兔经十二指肠给２及５ｍｇ·ｋｇ－１后，Ｔ１／２β分别为１７５ｈ和１２６ｈ。生物利用度为４２４％～６９４％。此法简便、快速。ＩＲＨＹ在兔体内吸收迅速，消除也较快。

刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34^+造血干/祖细胞增殖分化能力的影响

目的:观察刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34+造血干/祖细胞(HSPC)增殖分化能力的影响。方法:采用MTT法测定活细胞OD值,计算CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率。免疫磁珠分选人脐血CD34+造血干/祖细胞,细胞记数、双色直接免疫荧光标记法和流式细胞仪分析细胞增殖分化能力变化。结果:MTT检测法显示,0.01~10μmol.L-1的CL1处理,剂量依赖性和时间依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞生长。经14 d的培养,与细胞对照组相比,10、1μmol.L-1的CL1细胞数有下降趋势,但差异无显著性;表达粒系/单核巨噬系细胞表型CD15和CD11b的细胞百分数无显著差异。经14 d的培养,与培养0 d比较,CD15显著增高(P<0.05),CD11b有增高趋势,但无显著性差异。结论:CL1对胃癌SGC-7901细胞的体外生长具有抑制作用,但对人脐带血CD34+HSPC的增殖、和向粒细胞、单核巨噬细胞分化无明显影响,表明CL1在抗肿瘤作用剂量下,不会明显抑制造血干/祖细胞向粒-单细胞的增殖分化,提示CL1可能不会引起明显的造血抑制。

NCX1在肝癌中的表达、调控Ca^(2+)浓度及其对肝癌细胞增殖和迁移的影响

背景与目的:钠钙交换体亚型1(Na^+-Ca^(2+) exchanger isoform 1,NCX1)可通过对细胞Ca2+平衡的调节参与癌症的发生,但是否参与肝癌的发生、发展及其作用机制的研究鲜见报道。该研究旨在探讨NCX1在肝癌中的表达变化,对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测NCX1 m RNA及蛋白在人正常肝细胞株LO2、肝癌细胞株HepG2、人正常肝组织和原发性肝细胞癌患者癌组织中的表达。采用共聚焦显微镜技术观察NCX1在细胞外无钠溶液刺激活化后,对正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2中钙离子浓度的调控。采用MTT法、细胞划痕实验检测NCXl特异性的阻断剂KB-R7943对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移的影响。结果:在肝癌细胞株HepG2和肝细胞癌组织中,NCX1 m RNA和蛋白质的表达均高于正常肝细胞株LO2和正常肝组织(P<0.05)。共聚焦显微镜实验发现,细胞外无钠溶液可以激活细胞内钙升高,正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2细胞内钙离子浓度均增高,但肝癌细胞HepG2细胞内钙离子增高的幅值明显高于LO2细胞(P<0.05),NCXl特异性阻断剂KB-R7943可以显著阻断胞外无钠诱导的细胞内钙离子升高(P<0.05)。KB-R7943可以显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖及迁移(P<0.05)。结论:原发性肝癌中NCX1的表达量上调,NCX1的活化可以调节细胞内钙变化,抑制NCX1的活性可以进一步抑制肝癌细胞的增殖和迁移。这提示NCX1可能在原发性肝癌的发生、发展中起了重要的作用。

刺梨提取物CL对胃癌细胞的抑制作用

目的观察刺梨提取物CL的体外抗肿瘤作用。方法采用溴化3-(4,5-二甲基噻唑2)-2,5-二苯基四氮唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2.5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)检测法测定CL对胃癌-7901和MKN-45细胞的细胞毒性作用,台盼蓝排染法计数不同浓度药物作用下,不同时间点的活细胞数,绘制细胞生长曲线。结果MTT法检测显示,0.01μl·ml1～100μg·ml-1的CL 处理12～96h胃癌SGC-7901细胞和MKN-45细胞生长的抑制率均呈现剂量依赖性和时间依赖性, 细胞生长曲线显示:随CL浓度的升高曲线逐渐右移,且100μg·ml1的CL对SGC-7901细胞的生长曲线呈逐渐下降趋势。结论CL对胃癌7901和MKN-45细胞的体外生长具有一定的抑制作用,这种抑制作用均呈刺量依赖性和时间依赖性,提示CL有一定的体外抗肿瘤作用。

茶多酚对ACC-M细胞株Fas、Fasl表达的影响

目的体外观察茶多酚对肺高转移性腺样囊性癌细胞株(ACC-M)生长、Fas及其配体Fasl表达的影响。方法(1)采用MTT比色实验法观察茶多酚对ACC-M细胞增殖的影响;(2)用免疫组化(SP法)检测不同浓度茶多酚对ACC-M细胞中Fas及其配体Fasl表达的影响。结果(1)茶多酚对ACC-M细胞增殖抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.05);(2)细胞免疫组化结果显示,加入不同浓度茶多酚后,Fas蛋白在ACC-M细胞中表达增高,差异有统计学意义(P<0.05),Fasl表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),且随浓度增加更为明显。结论茶多酚可影响ACC-M细胞中Fas、Fasl表达,茶多酚具有抑制ACC-M细胞生长的作用可能与此有关。

夏天无注射液对小鼠脑缺血和神经元保护作用的实验研究

目的观察夏天无注射液对小鼠脑缺血和神经元损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法采用小鼠断头张口喘气模型初步筛选ICDP对动物脑缺血的影响,分光光度法测定脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)和蛋白含量;原代培养乳鼠神经元制备低糖缺氧模型,MTT染色测定神经元细胞活力,流式细胞仪观察神经元凋亡。结果静脉注射ICDP2mg/kg、5mg/kg组后可明显延长小鼠张口喘气时间,且ICDP5mg/kg组断头张口喘气模型小鼠脑组织内AchE活性明显降低。低糖缺氧6h后,ICDP(含生物碱5ng/ml～500ng/ml)明显增加神经元的存活率,并可抑制神经元凋亡。结论ICDP对脑缺血损伤有保护作用,可降低脑组织内AchE活性,保护神经元、抗神经元凋亡可能是其抗脑缺血损伤的机制之一。

钩藤碱对大鼠脑内去甲肾上腺素、5-羟吲哚乙酸的影响

目的测定钩藤碱对大鼠脑内去甲肾上腺素 (norepinephrine ,NE)、5 羟吲哚乙酸 (5 hydroxyindoleaceticacid ,5 HIAA)影响 ,进一步探讨钩藤碱的镇静作用机制。 方法利用脑微透析方法收集药前及药后纹状体、海马及大脑皮质的细胞外液 (透析液 )。经反相高效液相电化学法 (HPLC -ECD)检测其NE、5 HIAA的变化。结果Rhy增高正常鼠脑纹状体及海马细胞外液中 5 HIAA的含量 ,降低海马和皮层中NE的含量。结论钩藤碱的镇静作用 ,可能与其改变脑内单胺类递质及其代谢产物的含量有关。

胃泌素及丙谷胺对胃癌细胞株MKN45增殖及EGF表达的影响

目的:观察五肽胃泌素(PG)及其受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对人胃癌细胞株MKN45增殖及表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法:MTT法检测人胃癌细胞株MKN45增殖;放射免疫法(RIA)测定表皮生长因子(EGF)的表达。结果:PG(10-6mol/L)明显促进人胃癌细胞株MKN45增殖,24、48h的促细胞增殖率分别为11.24%、17.63%,丙谷胺(2.0～10.0mmol/L)能阻断这一促增殖作用,并可剂量依赖性地抑制胃癌细胞的生长,且随作用时间延长而增强。同时,在胃癌细胞株MKN45培养液中可检测到EGF,且随培养时间延长EGF含量增加;PG(10-6mol/L)可显著增加MKN45培养液中EGF的含量,丙谷胺(6.0mmol/L)不仅明显阻断PG诱导的EGF增加,并且能够减少胃癌细胞MKN45培养液EGF的含量。结论:五肽胃泌素能促进胃癌细胞株MKN45增殖及EGF表达,而其受体拮抗剂丙谷胺不仅能阻断这一的促进作用,并可抑制胃癌细胞株MKN45增殖及EGF的表达。提示PG的促胃癌细胞增殖作用可能与促进EGF表达有关。

反相HPLC法测定异钩藤碱的含量

反相ＨＰＬＣ法测定异钩藤碱的含量遵义医学院药理学教研室５６３００３黄彬吴芹文国容陆远富石京山异钩藤碱（Ｉｓｏｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌｉｎｅ）是传统中药钩藤中所含的主要生物碱，具有降低血压及明显负性变时等效应［１，２］，而钩藤总碱可对抗实验性心律失常［...

幽门螺杆菌感染对十二指肠黏膜上皮细胞碳酸氢盐转运蛋白表达的影响

目的探究幽门螺杆菌(HP)感染对小鼠十二指肠上皮细胞碳酸氢盐转运蛋白表达的影响。方法 C57小鼠随机分为四组,三组分别给予HP菌株SS1、NCTC11637、NCTC11639感染,一组仅给予同等量的磷酸盐缓冲液(PBS)灌胃(对照组),2 w后收集组织。体外培养十二指肠上皮细胞,与HP菌株共培养,其中对照组给予等量PBS干预,收集细胞。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹检测组织及细胞中碳酸氢盐转运蛋白表达的影响。结果 HP感染小鼠后,由吉姆萨染色镜检见,感染后可见大量紫蓝色小体,呈逗点状、短棒状;细胞实验:HP菌株NCTC11637与十二指肠上皮细胞共培养后应用RT-PCR扩增HP16srRNA,小鼠及细胞实验均目的基因为单一扩增,扩增良好。小鼠及细胞实验均3种HP菌种囊性纤维跨膜传导调节因子(CFTR)、离子交换体(SLC)26A3及SLC26A6感染2 w后,碳酸氢盐转运蛋白mRNA及蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。结论从体内到体外,HP可通过调控碳酸氢盐转运蛋白含量来干预疾病的进展。

CD44、CD24、MMP9在涎腺腺样囊性癌的表达及意义

目的探讨CD44、CD24、MMP9在腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)中的表达,进一步揭示涎腺腺样囊性癌的生物学特性。方法免疫组化SP法检测CD44、CD24、MMP9在ACC-M中的表达情况。结果CD44阳性表达率为93%±3.03,CD24阳性表达率为27%±3.14,MMP9阳性表达率为89%±3.67。结论CD44、CD24和MMP9的表达与ACC-M的生物学特性有关。

胃乐散对小鼠肠运动功能影响的实验研究

目的观察胃乐散对小鼠小肠推进运动的影响。方法分别用 1.2 5 %、2 5 %胃乐散混悬液灌胃 ,观察并比较其对正常小鼠、腹腔注射新斯的明小鼠和腹腔注射吗啡小鼠小肠推进运动的影响。结果小鼠灌胃胃乐散混悬液 (1.2 5 %,2 .5 %)后 ,与生理盐水空白对照组比较 ,小肠蠕动无明显变化 ,差异无显著意义 (P >0 .0 5 ) ;可拮抗新斯的明引起的小鼠小肠亢进的推进运动 (P <0 .0 5 ) ;可促进吗啡引起的小鼠小肠减慢的肠蠕动 ,与吗啡组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论胃乐散对正常小鼠肠运动功能无明显作用 ,而对新斯的明及吗啡引起的小鼠异常肠运动功能具有双相调节作用 ,能使异常的肠运动趋复正常。