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大黄鱼变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的原核表达及其多克隆抗体制备
1
作者
叶毅铭
何亮银
+4 位作者
廖青青
林永翔
刘敏
陈虹坚
文宇鑫
《宁德师范学院学报(自然科学版)》
2023年第1期57-64,共8页
为获取变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的重组蛋白,研究克隆了ompH和ompW的基因序列,构建重组表达载体并转化宿主菌,成功实现了外膜蛋白的原核表达.结果显示,ompH和ompW基因全长分别为603和690bp,对应编码200和229个氨基酸;变性聚丙烯...
为获取变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的重组蛋白,研究克隆了ompH和ompW的基因序列,构建重组表达载体并转化宿主菌,成功实现了外膜蛋白的原核表达.结果显示,ompH和ompW基因全长分别为603和690bp,对应编码200和229个氨基酸;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,OMPH和OMPW重组蛋白相对分子质量分别为25.0和28.5ku,通过Ni+亲和层析纯化后的重组蛋白条带单一.以纯化后的重组蛋白OMPH和OMPW分别免疫小鼠制备其多克隆抗体,酶联免疫吸附试验测得鼠源OMPH和OMPW多克隆抗体的效价分别为40000和50000;免疫印迹显示了抗血清与重组蛋白结合活性良好.
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关键词
大黄鱼
变形假单胞菌
外膜蛋白
原核表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
大黄鱼变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的原核表达及其多克隆抗体制备
1
作者
叶毅铭
何亮银
廖青青
林永翔
刘敏
陈虹坚
文宇鑫
机构
宁德师范学院
闽东水产品精深加工福建省高等学校工程研究中心
出处
《宁德师范学院学报(自然科学版)》
2023年第1期57-64,共8页
基金
2022年国家级大学生创新创业训练计划项目(202210398011)
宁德师范学院校级专项资助计划科研项目(2022ZX401).
文摘
为获取变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的重组蛋白,研究克隆了ompH和ompW的基因序列,构建重组表达载体并转化宿主菌,成功实现了外膜蛋白的原核表达.结果显示,ompH和ompW基因全长分别为603和690bp,对应编码200和229个氨基酸;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,OMPH和OMPW重组蛋白相对分子质量分别为25.0和28.5ku,通过Ni+亲和层析纯化后的重组蛋白条带单一.以纯化后的重组蛋白OMPH和OMPW分别免疫小鼠制备其多克隆抗体,酶联免疫吸附试验测得鼠源OMPH和OMPW多克隆抗体的效价分别为40000和50000;免疫印迹显示了抗血清与重组蛋白结合活性良好.
关键词
大黄鱼
变形假单胞菌
外膜蛋白
原核表达
多克隆抗体
Keywords
Larimichthys crocea
Pseudomonas plecoglossicida
outer membrane protein
prokaryotic expres⁃sion
polyclonal antibodies
分类号
S942 [农业科学—水产养殖]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大黄鱼变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的原核表达及其多克隆抗体制备
叶毅铭
何亮银
廖青青
林永翔
刘敏
陈虹坚
文宇鑫
《宁德师范学院学报(自然科学版)》
2023
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