微波辅助提取石榴皮多酚工艺研究

研究从石榴皮中微波辅助提取多酚的工艺。采用单因素试验及正交试验,考察不同条件下石榴皮多酚提取率。结果表明,提取溶剂乙醇体积分数、微波功率、提取时间及料液比均对石榴皮多酚提取率有显著影响;石榴皮多酚的最佳提取条件为50%(体积分数)乙醇作溶剂,微波功率300 W,提取时间120s,料液比1∶35(m∶V)。该条件下提取石榴皮多酚,提取率可达21.41%。

鞣花酸和石榴皮多酚提取物抗氧化活性的比较

对鞣花酸提取物(EA)和石榴皮多酚提取物(PE)的抗氧化活性进行比较研究。通过HPLC法检测EA和PE中鞣花酸的含量,Folin-酚法检测PE中总多酚含量;采用H2O2处理HepG2细胞建立细胞氧化应激损伤模型,MTT法比较不同浓度的EA和PE对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用;采用DPPH法、·OH清除法检测PE和EA体外抗氧化作用。结果表明:与EA相比,PE中鞣花酸含量很低,但PE和EA均以剂量依赖的方式提高氧化损伤的HepG2细胞生存率,有显著的保护作用,且在同一的浓度下,PE的保护作用显著高于EA。PE和EA对DPPH法、·OH清除法的清除率均呈剂量依赖性增强。

脂肪酸对成肌细胞增殖和分化的影响

目的研究不同种类的脂肪酸对成肌细胞增殖和分化的影响。方法采用不同浓度(200、100、50、25和12.5μmol/L)的棕榈酸(PA)、油酸(OA)和亚麻酸(LA)处理C2C12、L6和3T3-L1细胞,分别于不同时间(2、4、6和8d)MTT法检测细胞增殖;为了考察脂肪酸对成肌细胞分化的影响,分别在C2C12和L6细胞诱导分化前2d,分化第0、2和4d采用25μmol/L的PA、OA或LA处理细胞,油红O染色观察细胞转分化,姬姆萨染色和肌酸激酶(CK)测定观察细胞分化。结果 3种脂肪酸对细胞增殖的抑制作用及其时间-效应和剂量-效应随脂肪酸种类和细胞株不同而具有明显的差异。PA和OA比LA具有更显著的细胞增殖抑制作用,且OA对3种细胞的抑制作用没有明显的剂量依赖关系,而LA在100μmol/L以下时对C2C12和L6成肌细胞的增殖没有明显的时间-效应;与3T3-L1比较,C2C12和L6细胞增殖对脂肪酸的抑制作用更加敏感。在成肌细胞C2C12和L6诱导分化后用脂肪酸处理未观察到显著的作用,但在诱导分化前2d加入脂肪酸能显著影响成肌细胞的分化,LA处理使多核肌管数量和CK含量增加,促进向骨骼肌细胞的分化,而PA和OA处理使细胞内脂滴积累,多核肌管数量和CK含量下降,抑制向骨骼肌的分化而促进向脂肪细胞的转分化。结论脂肪酸暴露影响体外培养的成肌细胞的增殖和分化,其作用与脂肪酸种类、细胞类型和暴露时期有关。