3 T MRI三维T2加权快速梯度回波序列显示胎儿脊柱解剖及椎体畸形的评价

目的分析3 T MRI三维T2加权快速梯度回波(three-dimensional T2-weighted fast field echo,3D-T2*-FFE)序列显示胎儿脊柱解剖及椎体畸形的价值。材料与方法本研究纳入46例产前超声提示胎儿椎体异常或脊柱部分显示不清的中晚期孕妇,所有胎儿均行脊柱MRI检查,扫描序列包括:3D-T2*-FFE、二维单次激发快速自旋回波(two-dimensional single shot fast spin echo,2D SSH TSE)和二维平衡式自由稳态进动(two-dimensional balance turbo fast field echo,2D BTFE)。由两名诊断医师对三个序列获得的脊柱各节段图像质量进行评分,采用非参数检验之Friedman检验比较各序列图像之间评分的差异。对所有病例勾画感兴趣区(region of interest,ROI),并分别计算三个序列颈、胸、腰骶段相应的椎体与椎间盘信号差值比,以评价图像对比度,通过单因素方差分析比较三个序列各节段信号差值比的差异是否有统计学意义。结果与2D SSH TSE和2D BTFE序列相比3D-T2*-FFE可以获得更好的胎儿颈椎图像,2D BTFE与3D-T2*-FFE序列在胎儿胸椎及腰骶椎的图像质量均优于2D SSH TSE序列;3D-T2*-FFE和2D BTFE序列的信号差值比高于2D SSH TSE序列,且差异有统计学意义(P<0.05);胎儿胸椎和腰椎在各序列的信号差值比差异无统计学意义(P>0.05)。结论3D-T2*-FFE序列对胎儿椎体成像效果较好,能显示更多脊柱解剖细节,其不受胎儿体位影响,且扫描时间较短,临床MRI扫描时可将其作为胎儿脊柱成像的重要补充序列。

SPIO-PLL-pshRNA分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞及MR成像研究

目的:利用多聚赖氨酸修饰的超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide modified with Poly-L-lysine,SPIO-PLL)及质粒pGenesil1-shRNA构建SPIO-PLL-pshRNA分子探针,并初步评价其体外转染卵巢癌细胞SKOV3及MR成像的可行性。方法:利用静电吸附法连接SPIO-PLL和质粒pGenesil1-shRNA,微量分光光度计检测复合物离心后上清液中质粒DNA浓度,评测SPIO-PLL与质粒的结合能力;凝胶阻滞实验及zeta电位测定验证两者结合;通过普鲁士蓝染色法观察铁的入胞情况及荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达来检测复合物的细胞转染能力;MR扫描观察细胞转染后信号改变。结果:DNA结合实验、凝胶阻滞实验结果显示当SPIO-PLL和质粒质量比达6∶1时,二者可有效结合;激光粒度仪测定SPIO、SPIO-PLL、SPIOPLL-pshRNA 3组样品的zeta电位分别为(-14.8±0.35)、(15.2±0.55)、(3.6±0.35)mV,3组结果差异有统计学意义(F=6323.782,P=0.000;LSD-t:均P=0.000);所制备的SPIO-PLL-pshRNA分子探针体外转染细胞后,用普鲁士蓝染色法可检测到细胞内有铁颗粒分布,荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白表达,MR扫描结果示无探针转染组及10、20、40μg/ml 3种浓度探针转染组的T2*信号强度值分别为(558±19)、(427±16)、(283±19)、(191±8),琼脂糖组及蒸馏水组分别为(600±36)、(670±16),随着探针浓度升高,信号强度降低,各组结果差异有统计学意义(F=279.667,P=0.000;SNK-q:均P<0.05)。结论:SPIO-PLL纳米粒可有效结合质粒pGenesil1-shRNA,制得SPIO-PLL-pshRNA分子探针,该探针于体外成功转染卵巢癌SKOV3细胞,并于MR扫描下T2*WI信号强度降低。

超顺磁性氧化铁(SPIO)与多聚赖氨酸(PLL)纳米粒的制备、结构验证及其空间结构表征

目的 探讨葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁（super-paramagnetic iron oxide,SPIO）与多聚赖氨酸（polylysine,PLL）纳米粒的制备及其结构验证和空间结构表征。方法 在共沉淀法制备葡聚糖修饰的SPIO基础上,加入PLL制备出一种新的SPIO-PLL纳米粒,利用粒度电位分析仪、透射电镜（transmission electron microscopy,TEM）对SPIO-PLL的粒径、电位、形貌学进行检测;高效液相凝胶色谱法（gel permeation chromatography,GPC）、红外光谱（fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）及核磁共振氢谱法（1HNMR）对SPIOPLL连接成功与否进行验证;高精度的原子力显微镜（atomic force microscope,AFM）对SPIO-PLL的结构、形态及连接状态进行空间结构表征。结果 粒度电位分析和TEM结果显示SPIO-PLL的平均粒径为7.37 nm,平均电位为13.6 mV;GPC、FTIR及1HNMR结果显示SPIO及PLL之间已经成功连接;高精度AFM清楚显示出SPIO与PLL之间以亚胺键形式稳定相连。 结论 成功制备出一种性质稳定、粒径较小的新型SPIO-PLL纳米粒,这将对随后的肿瘤特异性探针制备奠定一定的基础。

超顺磁性氧化铁-短发夹RNA双功能分子探针体外转染卵巢癌细胞的最佳浓度

目的：采用不同质量浓度的超顺磁性氧化铁-短发夹RNA（superparamagnetic iron oxide-short hairpin RNA,SPIO-ShRNA）分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞,观察细胞形态,检测细胞的生物学行为,寻找最佳的转染浓度。方法：将铁浓度分别为5、15、30、45、75、100 mg/L的探针转染SKOV3细胞后,采用荧光倒置显微镜观察探针进入细胞情况,普鲁士蓝染色及透射电镜观察细胞形态及细胞内铁颗粒,原子吸收光谱仪法测定细胞内铁含量,cell counting kit-8（CCK-8）检测细胞活性,流式细胞术观察细胞凋亡,Western blot检测细胞内表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）蛋白的表达,磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）检测细胞内信号强度变化。结果：在5∽30 mg/L铁浓度范围内,细胞摄取量随探针铁质量浓度增加而增大,当探针铁浓度为45 mg/L时,进入细胞达到饱和,标记率接近100%;细胞活性随探针质量浓度的增加而降低,各实验组细胞活性分别为94.626%±1.050%、93.373%±1.180%、91.700%±3.122%、75.100%±4.362%、72.983%±3.233%、71.010%±2.910%,5、15、30 mg/L组细胞活性未见明显下降,差异无统计学意义（P=0.475,P=0.226,P=0.068）;≥45 mg/L细胞活性明显下降（P〈0.001）;探针浓度≥45 mg/L时,探针对SKOV3细胞EGFR蛋白表达抑制率明显增加,45 mg/L组蛋白表达率为68.905%±3.510%,与5、15、30 mg/L组相比差异具有统计学意义（P〈0.001,P=0.001,P=0.003,P均〈0.01）;MRI显示随着探针质量浓度增加,细胞信号强度逐渐降低,45 mg/L组细胞信号强度为165.55±4.92,信号强度明显降低,45 mg/L组与空白组（相同体积的磷酸盐缓冲液）、正常细胞组（未标记的卵巢癌SKOV3细胞）、5、15、30 mg/L各组信号强度相比,差异均有统计学意义（P均〈0.001）。结论：当SPIO-ShRNA分子探针铁浓度为45 mg/L时,可有效转染并特异性抑制卵巢癌SKOV3细胞的表达,能被MRI所检测,初步证实具有诊断与治疗的双重作用。

卵巢癌特异性MR分子探针的制备

目的制备针对卵巢癌的特异性磁共振(magnetic resonance,MR)分子探针,并评价其体外转染SKOV3细胞的可行性。方法琼脂糖凝胶阻滞实验确定探针中的多聚赖氨酸修饰的超顺磁性氧化铁(SPIO-PLL)及质粒p Genesil1-shRNA的最佳质量比,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达以检测探针是否进入细胞;透射电子显微镜观察探针中铁在细胞中的部位;CCK-8法检测探针的细胞毒性;MR扫描检测探针转染后细胞的T2*信号强度改变。结果当SPIO-PLL和质粒的质量比达6∶1时,二者有效结合;探针体外转染细胞后,可观察到绿色荧光蛋白表达,检测到铁颗粒存在于胞质内;在探针浓度低于50 mg/L的范围内,细胞存活率高于80%;探针转染后细胞的T2*信号强度明显降低(P<0.01)。结论成功制备卵巢癌特异分子探针,在体外成功转染卵巢癌SKOV3细胞,对细胞毒性小,可被MR扫描敏感检测。

T2WI-FS序列影像组学诊断宫颈癌转移及脉管间隙浸润的价值

目的研究T2加权脂肪抑制序列(T2-weighted imaging fat suppression,T2WI-FS)影像组学诊断宫颈癌(cervical cancer,CC)淋巴转移及脉管间隙浸润(lymph vascular space invasion,LVSI)的价值。材料与方法回顾性分析2017年6月至2020年6月间66例CC患者临床资料及术前磁共振成像横轴位T2WI-FS图像,勾画病灶感兴趣区域(region of interest,ROI),将患者预处理图像与ROI图像依次导入A.K.软件,提取T2WI-FS图像上病灶组学特征,经特征降维处理后,建立逻辑回归模型影像组学标签,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,分析T2WI-FS组学标签在诊断CC淋巴转移及LVSI中的价值。结果病理检查结果提示存在淋巴转移者共22例,无转移者44例,分析发现,淋巴转移与患者宫颈间质浸润深度及LVSI有关(P值均<0.01);LVSI阳性患者共27例,阴性患者39例,分析发现,LVSI与患者组织分化程度、宫颈间质浸润深度及淋巴结转移有关(P值均<0.01);T2WI-FS影像组学标签评估患者淋巴转移的曲线下面积(area under the area under the curve,AUC)=0.857,诊断敏感度(sensitivity,Sen)=85.0%,特异度(specificity,Spe)=86.7%,评估患者LVSI的AUC=0.807,诊断Sen=68.3%,Spe=88.3%。结论淋巴结转移及LVSI间相互影响,两者均受到宫颈间质浸润深度的影响,T2WI-FS影像组学标签在评估患者淋巴转移及LVSI中均具有较高的效能,在宫颈癌患者术前病情评估,指导手术治疗方案及预后预测中均具有较高的应用价值。

葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁纳米颗粒最佳工艺条件确定及质量评价

目的 确定葡聚糖修饰的SPIO纳米颗粒最佳工艺条件并对其质量进行评价.方法 利用影响SPIO纳米颗粒粒径的4因素（溶液pH值、葡聚糖浓度、反应温度、搅拌速度）3水平正交实验设计,得出SPIO纳米颗粒的最佳制备工艺条件,并在该条件下制备SPIO纳米颗粒样品,分别用透射电镜、粒度分析仪对其进行形貌观察及粒径检测,用原子吸收光谱仪测定其铁含量,红外光谱仪分析表征,X射线粉末衍射法进行成分鉴定,振动样品磁强计测定磁学参数,并用其标记SKOV3卵巢癌细胞,验证其磁学性质.结果 制备葡聚糖修饰SPIO纳米颗粒的最佳工艺条件为：葡聚糖浓度10mg/ml,反应溶液pH值10,反应温度80℃,搅拌速度600 r/min.制备的SPIO纳米颗粒呈球形,分布较均匀,大小较一致,平均粒径7.0 nm,铁含量（12.36±0.08） g/L;红外光谱分析示样品外成功包裹葡聚糖,样品成分为Fe3O4,有超顺磁性;可进入待标记细胞,并使细胞带有磁性.结论 最佳工艺条件下制备的葡聚糖修饰SPIO纳米颗粒性质稳定、粒径较小、分散性较好,能顺利进入待标记细胞并使细胞具有一定磁性,为后续研究奠定了良好基础.

胎儿纵隔巨大毛细血管瘤一例

本文报道1例晚孕期发现胎儿胸腔积液及胸腔巨大占位的纵隔毛细血管瘤病例。孕妇因“停经36周+3,发现胎儿胸部占位11 d”就诊于成都市妇女儿童中心医院,常规彩超及MRI检查均提示胎儿右侧胸腔积液,胸腔巨大占位。孕36周+5阴道分娩一活男婴,出生后CT、血管造影及三维重建提示为纵隔血管瘤,予口服普萘洛尔出院。患儿生后1个月因“肺炎、呼吸增快”再次入院,多学科会诊后行右侧胸腔纵隔肿物切除术,病理结果示纵隔毛细血管瘤。术后患儿继续口服普萘洛尔,定期儿童保健及康复,截至2021年1月已7月龄,尚未发现异常。

胎儿巨大骶尾部畸胎瘤破裂后足月分娩1例

本文报告了1例妊娠14周经超声发现胎儿骶尾部畸胎瘤,超声联合MRI提示肿瘤分型为Ⅰ型。妊娠26周前肿瘤囊性部分占比>60%,妊娠28周肿瘤囊性部分自行破裂。妊娠期密切监测,妊娠36周+5时,肿瘤体积增至12.8 cm×9.7 cm×12.3 cm。孕妇于妊娠37周行剖宫产术分娩。新生儿生后4 d于小儿外科行肿瘤切除术,术后随访无生理功能障碍,预后良好。