结合外泌体的微针经皮给药系统研究进展

微针可以穿透皮肤屏障给药而不触及痛觉神经,有效提高经皮给药效率,改善患者依从性。外泌体具有多种生理功能且具备良好的生物相容性,是天然纳米级药物载体。本文综述了外泌体结合微针治疗疾病的途径与优势,阐述了结合外泌体的微针经皮给药系统(以下简称为外泌体微针给药系统)在各类疾病中的研究现状。外泌体微针给药系统可分为以外泌体作为治疗剂和以外泌体作为药物载体两大类:前者因外泌体独特的生理来源可以有效避免常规药物毒性及免疫原性等问题,结合微针后可直接在特定部位给药,从而大大改善口服给药的代谢消耗和注射给药的患者依从性问题;后者因外泌体的天然囊泡结构及内源性特征可保护外来药物在体内的代谢并增强靶向性,结合微针后可有效解决疗效好但稳定性差的药物的经皮给药问题。外泌体微针给药系统目前仍处于实验室阶段,但其在修复脊髓损伤、促进糖尿病溃疡伤口愈合、生发、干预心肌梗死、缓解慢性疼痛等方面展现出良好的发展前景。

活血化瘀类中药通过调控细胞自噬防治心血管疾病的研究进展

细胞自噬是由多分子多通路共同介导完成的,在心血管疾病中,自噬可以通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、腺苷一磷酸活化的蛋白激酶/mTOR、丝裂原活化蛋白激酶、p53、Wnt/β-连环蛋白等关键信号通路发挥作用。活血化瘀类中药单体如羟基红花黄色素A、人参皂苷Rb1、红景天苷、川芎内酯、姜黄素等,中药复方及制剂如黄芪保心汤、桃红四物汤、通心络胶囊、双参宁心胶囊、速效救心丸等均能通过上述关键信号通路调控细胞自噬,进而缓解心血管疾病的进程。

外泌体载药系统的研究进展

外泌体是一种由多种细胞分泌且具有脂质双层膜结构的囊性小泡,其具有良好的生物相容性、高靶向性和高稳定性,是药物递送系统中具有极大发展潜力的天然纳米级药物载体。本文对外泌体及其特性、外泌体载药途径及方法、工程化外泌体载药系统靶向治疗疾病的设计策略及外泌体载药系统在多种疾病治疗中的应用现状进行综述。外泌体载药途径可分为外源性和内源性两大类,常用的外泌体载药方法包括电穿孔法、共孵育法、超声法等;工程化外泌体载药系统可以进一步提高载药量,增强药物的靶向性,主要通过基因工程技术、物理修饰法、化学修饰法等途径对外泌体进行表面修饰。外泌体载药系统为关节炎类、肿瘤类、脑部等疾病的靶向治疗提供了新思路。

中药调控Beclin-1基因干预自噬治疗类风湿性关节炎的研究进展

类风湿性关节炎是一种难以治愈的自身免疫性疾病,其病因复杂,基本的病理表现为软骨的破坏、血管翳的生成等。有效治疗和预防类风湿性关节炎的发生及提高患者的生活质量是亟待解决的问题。现阶段临床治疗方法存在着用药量大,毒副作用强等弊端,近年来,以精准调控为优势并基于Beclin-1为代表的基因调节自噬和线粒体从而治疗类风湿性关节炎的研究不断发展,目前受到国内外专家学者的关注,具有广阔的发展前景。本文系统阐述在治疗类风湿性关节炎中Beclin-1、自噬和线粒体的相关联性,并发现中药在调节Beclin-1、自噬和线粒体治疗类风湿性关节炎的巨大潜力,因此对中药调控Beclin-1干预自噬治疗类风湿性关节炎进行系统性综述,并为该领域提供一定的科学参考。

教师的语言幽默感在初中语文教学课堂的应用研究

课堂是属于学生和教师共同所有,一堂课的质量很大程度上取决于教师给学生的价值输出,学生接受的程度在某种程度上取决于教师的语言艺术。每位教师的教学风格各具特色,而每位学生喜欢的教学风格也大相径庭。但教师的幽默感对于提升课堂教学效率起着不可忽视的作用,如果教师教学时富有幽默感,对于培养学生对该学科的兴趣、学好该学科都有极大的促进作用。

低温霜冻灾害棉田管理措施

本文总结了低温霜冻天气条件下,受灾棉田应急管理方法,供棉农参考。

棉花新陆中72号栽培管理技术

为确保棉花品种新陆中72号在盐碱地、土壤肥力低下的地块种植能够达到丰产丰收的目的,本文对在该土壤条件下新陆中72号田间管理过程进行详细介绍,以期为种植户在该类土壤状况下种植棉花提供参考。

穴位注射外泌体给药载体可行性的思考与探究

外泌体作为胞间物质交流和信息传递的重要载体,近年来通过结构修饰和装载药物已在疾病治疗中得到广泛的应用,成为了药物递送领域的研究热点。穴位注射是能够发挥针刺效应和药物性能的中西医结合疗法,具有药效强、作用快、安全性高等特点,具有巨大的开发潜力。文章基于目前穴位注射外泌体的应用现状和理论基础,提出了需解决的问题和未来展望。

医药用自愈性水凝胶性能和载体研究进展

自愈性水凝胶是一种具有网状结构,拥有自我修复能力的一种新型材料。这种材料一方面具有本征性的自愈性,通过动态化学键实现结构断裂后重新连接。另一方面,水凝胶具有动态的自我调节性以及生物相容性,是极具潜力的药物递送载体。该文综述了基于自愈性水凝胶在药物递送领域的研究进展,探讨了自愈性水凝胶的载药系统在药剂学的应用前景和研究方向。

基于川芎凝胶贴膏治疗类风湿性关节炎的PK/PD模型研究

实验以穴位联合外敷凝胶贴膏的给药形式,建立川芎治疗类风湿性关节炎的PK/PD拟合模型。首先利用卵蛋白诱导建立类风湿性关节炎模型,并采用微透析技术提取家兔的关节腔液,经UPLC-MS/MS分析川芎在家兔关节液中的药动学过程,建立药动学模型;经酶联免疫吸附技术分析川芎对炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6所产生的药效作用,建立药效学模型,拟合药动学与药效学数据得到了PK/PD模型。药动学结果说明洋川芎内酯A经典型穴位足三里给药后在关节腔中的药物质量浓度较阳陵泉高,体现典型穴位优势,而川芎嗪则是经阳陵泉给药后在关节腔中的药物质量浓度较足三里给药高,与传统穴位理论有出入。药效学结果说明药物存在滞后效应。拟合数据构建PK/PD模型,当IL-1β为药效指标时,川芎在典型穴位足三里组、非典型穴位阳陵泉组、非穴位组的PK/PD模型分别为E=115.28C_(e)/(3316.72+C_(e)),E=108.73C_(e)/(2993.47+C_(e)),E=101.34C_(e)/(3028.51+C_(e))。当TNF-α为药效指标时,川芎在典型穴位足三里组、非典型穴位阳陵泉组、非穴位组的PK/PD模型分别为E=68.31C_(e)/(3285.16+C_(e)),E=59.27C_(e)/(2919.86+C_(e)),E=53.61C_(e)/(2862.87+C_(e))。当IL-6为药效指标时,川芎在典型穴位足三里组、非典型穴位阳陵泉组、非穴位组的PK/PD模型分别为E=59.92C_(e)/(3461.17+C_(e)),E=58.34C_(e)/(2723.51+C_(e)),E=49.17C_(e)/(2862.76+C_(e))。参数表明,Emax、EC_(e)50及keo有明显差异,分析发现典型穴位足三里的PK/PD拟合效果最好,证明其仍是给药最佳部位。综上所述,说明药物与穴位间可能存在双向选择性。

基于纳米载体的药物递送系统在类风湿性关节炎治疗中的研究进展

类风湿性关节炎是一种广泛存在的自身免疫性炎症性疾病,严重影响患者的生活质量。目前用于治疗RA的常规剂型存在诸多局限性,例如非特异性、疗效不佳、用药剂量大、给药频繁以及全身性副作用。目前,纳米技术已经能够解决传统治疗的局限性并简化疾病的复杂性,因此基于纳米技术的药物递送系统正逐渐成为一种用于RA诊断和治疗的新策略,其可使负载的抗炎药物通过主动和被动靶向至发炎区域,实现对关节的特异性、克服剂量和给药频率的增加以及与之相关的不良反应。该文旨在对近年来基于纳米载体的药物递送系统在RA领域中的最新研究进行归纳总结,并阐述如何使用纳米系统将治疗药物输送到发炎关节以控制RA进展。通过探讨目前纳米药物递送系统可能存在的问题以及亟待解决的挑战,为未来深入研究基于纳米技术的共递系统提供理论支持。

荧光内窥式共聚焦显微镜下青藤碱固体脂质纳米粒注射治疗类风湿性关节炎的研究

应用荧光内窥式共聚焦显微镜(fluorescence endoscopic laser confocal microscope,FELCM)引导关节注射青藤碱固体脂质纳米粒(sinomenine solid lipid nanoparticles,Sin-SLN),并考察体外药效评估Sin-SLN治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的效果。采用乳化蒸发-低温固化法制备Sin-SLN,最佳处方工艺下制备的Sin-SLN包封率为64.79%±3.12%,载药量为3.84%±0.28%,测定平均粒径为(215.27±4.21)nm,Zeta电位为(-32.67±0.84)mV,初步稳定性考察中,Sin-SLN放置30 d后稳定性良好。皮下注射完全弗氏佐剂和卵白蛋白建立兔RA模型,药效实验设对照组、模型组、Sin组(1.5 mg·kg^(-1))、Sin-SLN组(1.5 mg·kg^(-1))和地塞米松组(阳性药,1.0 mg·kg^(-1),ig),对照组和模型组仅穿刺不注射药物,各实验组给予相应药物干预治疗。给药后,每日测量家兔膝关节直径及局部皮肤温度变化,与模型组相比,给药组膝关节直径和局部皮肤温度均下降;使用FELCM观测软骨形态学变化,Sin-SLN组膝关节软骨表面光滑,骨组织结构紧密;采用ELISA测定血清中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平,发现Sin-SLN组血清中IL-1和TNF-α表达水平降低;与模型组相比具有显著性差异,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察滑膜组织形态学变化,Sin-SLN组滑膜组织病变状况得到明显改善。因此,制备的Sin-SLN粒径均匀,性质稳定,通过关节注射给药形成药物贮库,Sin-SLN可有效减轻兔关节肿胀、减轻关节软骨损害,抑制炎症因子表达,抑制关节滑膜上皮增生和炎性细胞浸润,证明Sin-SLN可以有效抑制RA。

乌药挥发油通过AMPK/mTOR信号通路诱导胃癌AGS细胞凋亡和自噬

目的:研究乌药挥发油对人胃癌细胞AGS凋亡和自噬的的影响,并探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用。方法:利用水蒸气蒸馏法提取乌药挥发油,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测乌药挥发油对人胃癌细胞AGS细胞活力的影响,并根据半抑制浓度(IC_(50))确定最佳给药浓度与时间,用于后续研究;设置空白组、乌药挥发油低、中、高质量浓度组(0、15、30、60 mg·L^(-1))及阳性药环磷酰胺(CTX)组(350 mg·L^(-1))。用不同浓度的乌药挥发油处理AGS细胞48 h,采用细胞集落形成实验检测细胞增殖能力的变化、流式细胞仪检测细胞周期的变化、细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化、苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态的变化、Annexin-V/碘化丙啶(PI)双染法检测AGS细胞凋亡率、吖啶橙(AO)染色观察自噬水平的变化、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬效应蛋白Beclin-1、p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、剪切的多聚ADP-核糖聚合酶(cleaved PARP)、单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、雷帕霉素机械靶蛋白(mTOR)及磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平的变化。结果:与空白组比较,AGS细胞经乌药挥发油干预24、48 h,细胞活性被明显抑制(P<0.05,P<0.01),呈浓度和时间依赖性;乌药挥发油各浓度组细胞增殖与迁移能力明显降低(P<0.05,P<0.01),且随浓度的上升抑制能力越明显;乌药挥发油将AGS细胞周期阻滞于G_(2)/M期(P<0.05,P<0.01),呈浓度依赖性;乌药挥发油各浓度组出现细胞圆化,体积变小并伴随凋亡小体形成等现象,细胞凋亡率明显增加(P<0.05,P<0.01);随着乌药挥发油浓度的增加,自噬体数量增加致红色荧光逐渐增强,提示自噬水平的提升;乌药挥发油各浓度组Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、cleaved Caspase-3、cleaved PARP、Bax/Bcl-2及AMPK蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);p62与p-mTOR蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:乌药挥发油通过调节AMPK/mTOR信号通路诱导AGS细胞凋亡和自噬介导的生长抑制。

基于牛乳外泌体与脂质体的杂化外泌体制备及其负载青藤碱治疗类风湿性关节炎的药效学研究

研究乳源性外泌体与脂质体进行膜融合得到的杂化外泌体装载青藤碱(sinomenine,SIN)后对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果。通过蔗糖密度梯度离心法从鲜牛乳中提取外泌体,采用乳化蒸发-低温固化法制备脂质体,共孵育法进行膜融合后对杂化外泌体进行表征:透射电镜检测形貌,纳米粒度电位仪检测粒径与电位,蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测膜融合前后外泌体膜表面特征蛋白CD63和TSG101的表达。超声法装载青藤碱后,酶标仪检测其载药量与包封率。胶原抗体诱导法建立CIA大鼠模型,药效实验设对照组、模型组、SIN组、SIN-脂质体组、SIN-乳外泌体组、SIN-杂化外泌体组及阳性药(地塞米松)组。记录给药期间大鼠体质量变化,以足肿胀度、免疫器官指数、关节炎指数、微循环指标变化、滑膜组织病理学检查、血清炎症因子水平变化为指标进行药效学研究。透射电镜结果显示,杂化外泌体与乳外泌体外观均呈茶托状,共孵育后外泌体粒径由(97.92±3.42)nm增长到(132.70±4.07)nm,Zeta电位由(-2.01±0.33)mV变为(-17.90±2.13)mV,WB结果显示CD63与TSG101蛋白在乳外泌体及杂化外泌体中均正常表达。酶标仪测定乳外泌体包封率31.64%±2.48%、载药量2.35%±0.52%,杂化外泌体包封率48.21%±3.12%、载药量3.17%±0.36%。药效学结果显示,与模型组相比,各给药组一般情况及足肿胀度、关节炎指数及免疫器官指数均得到显著改善(P<0.05,P<0.01),微血管综合评分及血管阻力显著下降(P<0.05,P<0.01),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)炎症因子水平显著降低(P<0.01),滑膜组织的病变得到一定程度的改善。同时与SIN组、SIN-脂质体组及SIN-乳外泌体组相比,SIN-杂化外泌体组具备更平稳持久的药效。该研究将乳源性外泌体与脂质体共孵育得到的杂化外泌体成功改善了外泌体载药量小与脂质体生物相容性差等问题,负载青藤碱的杂化外泌体对CIA大鼠有着良好的疗效,可有效解决青风藤等疗效佳但生物半衰期短的问题,为传统中药的新发展及类风湿性关节炎等疾病的治疗提供了新思路。