仁青芒觉对急性肺损伤小鼠免疫功能的影响

目的观察仁青芒觉对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠免疫功能的影响。方法选取60只野生型小鼠,随机分为六组,每组各10只,分为空白对照组、LPS模型组(5 mg/kg)、地塞米松(dexamethasone,DXM)阳性对照组(5mg/kg)、仁青芒觉治疗组共三组(高剂量400、中剂量200、低剂量100 mg/kg)。治疗12h后,取眼静脉血检测白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)表达水平;检测肺水肿状况、肺组织湿/干重比及小鼠脏器指数;流式细胞术检测CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群变化及NK、B细胞占比。结果仁青芒觉三组(高、中、低)与空白对照组相比,均可降低急性肺损伤程度,降低肺组织湿/干重比(P<0.05),提高小鼠脾脏和胸腺指数(P<0.05);仁青芒觉的高、中组可以降低血清中IL-6、TNF-α的表达、三组均提高CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群比例、高、中组降低CD8+T细胞亚群、NK细胞的占比(P<0.05);中、低组可降低B细胞占比(P<0.05)。结论仁青芒觉400、200mg/kg剂量组可以降低ALI小鼠血清中IL-6、TNF-α和CD8+T水平;200、100mg/kg剂量组降低B细胞数量,且各剂量组都能下调NK细胞数量,通过下调炎症因子和免疫细胞对ALI小鼠具有治疗作用。

红景天乙醇提取物调节Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤浸润T细胞数量并增强抗肿瘤免疫效应

目的探讨藏药红景天(RRL)的抗肿瘤免疫功能。方法将Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为生理盐水组、 500 mg/kg RRL乙醇提取物处理组和10 mg/kg环磷酰胺(CTX)处理组,处理10 d。计算小鼠生存率和肿瘤生长抑制率;流式细胞术检测肿瘤浸润的CD4^+T、 CD8^+ T细胞数量及FOXP3^+调节性T细胞(Treg)占CD4^+CD25^+Treg的比例; ELISA检测荷瘤小鼠血清中白细胞介素2 (IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)水平,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果 RRL乙醇提取物处理的Lewis荷瘤小鼠生存率显著提高,肿瘤生长受到抑制,肿瘤浸润的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞数量增加, FOXP3^+ Treg占CD4^+CD25^+Treg的比例降低。荷瘤小鼠血清IFN-γ和IL-2水平提高,脾脏CTL的杀伤能力增强。结论 RRL乙醇提取物通过调节免疫细胞数量和功能增强抗肿瘤免疫效果。

红景天苷通过TLR4调控DC提高T细胞对肺癌3LL细胞的杀伤力

目的:探讨红景天苷(salidroside,SAL)对树突状细胞(dendritic cell,DC)表型及细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)抗肿瘤能力的影响。方法:选用Lewis肺癌细胞株3LL、野生型C57BL/6和TLR4-/-C57BL/6小鼠,获取小鼠骨髓来源的DC前体细胞,经过培养分化成未成熟DC,收获第6天的DC,经磁珠分选后获得纯度较高的CD11c+DC。将细胞分成PBS组、SAL组和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组,培养48 h后用流式细胞术检测SAL体外对DC表面分子、吞噬功能、TLR4通路和对T细胞杀伤能力的影响。结果:与PBS组比较,SAL组DC的表面分子CD80、CD86、MHCⅡ表达水平显著升高(均P<0.05)、吞噬功能显著下降(P<0.05)、TLR4表达水平显著升高(P<0.01);与野生型组比较,TLR4-/-组DC经SAL或LPS处理后,其表面分子CD80、CD86、MHCⅡ的表达水平显著降低(均P<0.05);与PBS组比较,SAL组刺激活化的CTL对肺癌3LL细胞的杀伤效应显著升高(P<0.05)。结论:SAL可以通过调控TLR4诱导DC成熟,从而提高T细胞的杀伤能力。

红景天苷通过细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通路诱导树突状细胞抗肿瘤作用

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路在红景天苷(SAL)调控树突状细胞(DC)抗肿瘤的作用。方法建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,分别体内给予生理盐水(0.2 mL/d)、SAL[500 mg/(kg·d)]和环磷酰胺(CTX)[10 mg/(kg·d)]治疗。检测Lewis肺癌荷瘤小鼠的生存期和肿瘤质量。同时,体外分离Lewis肺癌荷瘤小鼠骨髓来源的DC诱导培养。经磁珠分选后,分别与PBS、0.05 mg/mL SAL、200 ng/mL脂多糖(LPS)或0.05 mg/mL SAL联合ERK抑制剂U0126共培养48 h,流式细胞术检测磷酸化的ERK(p-ERK)水平。另外,将DC分别与PBS、0.05 mg/mL SAL或200 ng/mL LPS共培养48 h,流式细胞术检测磷酸化的p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化的JNK(p-JNK)表达量。此外,收取磁珠分选后DC与PBS、0.05 mg/mL SAL、200 ng/mL LPS或0.05 mg/mL SAL联合ERK抑制剂U0126共培养后的细胞上清,ELISA检测DC分泌IL-12p70的能力。最后,将Lewis肺癌荷瘤小鼠骨髓来源的致敏DC经SAL刺激后与尼龙毛柱吸附纯化的C57BL/6正常小鼠脾T淋巴细胞共培养作为效应细胞,再按照10∶1、25∶1、50∶1效靶比加入3LL靶细胞,CCK-8法检测体外细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果SAL可以显著抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长并提高其生存期;与PBS处理的DC相比,SAL组DC中ERK磷酸化水平显著升高,使用ERK抑制剂U0126后,磷酸化ERK的表达量显著降低;SAL对p38MAPK通路和JNK通路的磷酸化无明显影响;SAL组DC的IL-12p70分泌水平显著升高,使用ERK阻断剂U0126后DC分泌IL-12p70水平显著上升;SAL增强CTL的杀伤能力。结论SAL抑制Lewis肺癌荷瘤的肿瘤生长,激活ERK信号通路,促进DC分泌IL-12p70并增强CTL杀伤能力。

丝裂原活化蛋白激酶在治疗肿瘤中的研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是进化保守信号调节因子,其涉及细胞的存活、增殖、分化和程序性死亡等多种功能。MAPK家族成员在肿瘤细胞中表达异常既可以促进肿瘤发展,在某些情况下还可以抑制肿瘤发展,因而促进了肿瘤靶向治疗药物的发展。近年针对MAPK家族的抗癌药物从单一阻断发展到联合治疗。本文就MAPK家族在肿瘤发生、发展中的作用以及针对MAPK家族的抗癌药物的研究进展加以综述,以期待在肿瘤治疗方面新的突破。

Foxp3+调节性T细胞在肿瘤微环境中的研究进展

Foxp3+调节性T细胞(Regulator T cells,Treg)在促进肿瘤发生、发展、转移,调节肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)中发挥重要的功能。本文以Foxp3+Treg在TME中表达、活化及功能的影响因素,靶向耗竭Foxp3+Treg细胞和分子重编辑作以综述,有助于肿瘤免疫治疗取得新的突破,为肿瘤免疫治疗提供新思路,开辟新的治疗路径。

红景天苷对Lewis荷瘤小鼠调节性T细胞的抑制作用

为探讨红景天苷(salidroside, SAL)的抗肿瘤免疫功能,将3LL肺癌荷瘤小鼠随机分为PBS组、SAL治疗组(6 mg/kg)和紫杉醇(paclitaxel, PTX)阳性对照组(2 mg/kg),分别治疗21 d后绘制肿瘤体积生长曲线;采用FACS检测肿瘤浸润组织Foxp3^(+)Treg的比例,检测Treg表面分子CD69及核内分子Ki67的表达,检测联合培养条件下SAL对Treg及CD4^(+)CD25^(-)T细胞的影响。结果显示,SAL组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(P<0.05),Treg表面分子CD69和核内分子Ki67的表达显著下调(P<0.05);与PBS组比较,SAL组小鼠Treg和效应T细胞联合培养的效应T细胞的数量显著增加(P<0.05)。该研究提示,SAL对Treg的抑制功能可能产生影响,从而抑制肿瘤生长。

肿瘤来源的调节性树突状细胞的研究进展

调节性树突状细胞(regulatory dendritic cells,DCreg)是树突状细胞(dendritic cells,DCs)亚群之一,具有抑制T细胞增殖、诱导调节性T细胞分化和支持肿瘤免疫耐受的功能。DCs的调节能力取决于它们的未成熟状态和不同的亚群,以及它所处的环境,可由免疫抑制因子、遗传操纵、某些致病刺激、免疫细胞或凋亡细胞的信号、组织或肿瘤微环境引起,因此DCs的致耐受性是一个复杂的环境信号与细胞内在机制的网络控制。对肿瘤环境中刺激DCs分化成DCreg的抑制/极化因子鉴定,有助于设计有效的肿瘤治疗疫苗和恢复DCreg功能,维持肿瘤患者的临床相关抗肿瘤免疫具有重要意义。