^(18)F-氟脱氧葡萄糖PET-CT诊断头颈肿瘤

正电子发射型计算机断层-计算机断层(positron emission tomography-computer tomgraphy,PET-CT)扫描是将PET的功能代谢影像和CT的解剖影像融合在一起,能更准确的显示肿瘤组织,目前广泛应用于恶性肿瘤的诊断中。18F-氟脱氧葡萄糖(18fluorine-fluorinedeoxyglucose,18F-FDG)PET-CT在头颈肿瘤早期明确原发病灶、淋巴结转移、临床分期、制定放疗计划、疗效的监测等方面有一定的临床应用价值。

靶向人Trb3基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定靶向果蝇同源蛋白3(tribbles-related protein 3,Trb3)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并检测其对靶基因的沉默效应。方法根据Genbank数据库中Trb3序列,设计、合成3对互补并特异性编码其shRNA序列的寡核苷酸,克隆到线性化的pSUPER.retro.puro质粒载体中,并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒和pSUPER.retro.puro Vector转染舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株,RT-PCR和Western-Blot检测其对靶基因Trb3的表达影响。结果酶切及测序鉴定重组质粒pSUPER.puro-shTrb3序列正确;转染重组质粒后舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中Trb3 mRNA和蛋白表达水平相对于空载体组明显下降,shRNA可以特异性沉默Trb3基因。结论成功构建了靶向人Trb3基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究Trb3在舌鳞状细胞癌和其他头颈肿瘤中的作用奠定了基础。

IL-32在慢性鼻窦炎组织中的表达及机理研究

目的探讨白介素-32(interleukin-32,IL-32)在慢性鼻窦炎组织中的表达及其致病机理。方法收集40例慢性鼻窦炎患者,同期选取20例行鼻部手术患者的正常组织作为对照者,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组鼻组织中IL-32蛋白;采取即用型EnVisionTMSuper/HRP检测试剂盒检测两组鼻黏膜组织中CD3+和CD68+表达。结果慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中IL-32表达高于对照组(P<0.01),慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中CD3+细胞计数(55.36±23.53)个/mm2显著高于正常对照组(28.27±11.43)个/mm2(P<0.01);慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中CD68+细胞计数(7.65±2.27)个/mm2高于对照组(5.98±2.10)个/mm2(t=2.741,P<0.01)。且慢性鼻窦炎鼻黏膜组织中IL-32与CD3+和CD68+表达呈正相关(P<0.05)。结论 IL-32可能通过招募炎症细胞,参与慢性鼻窦炎的发病。

内质网应激诱导的TRB3在人舌体鳞状细胞癌细胞中抑制AKT磷酸化

目的:研究在人舌体鳞状细胞癌发生内质网应激后,TRB3与AKT磷酸化的关系。方法:在人舌体鳞癌细胞Tca8113及CAL-27中,使用毒胡萝卜素或衣霉素诱导内质网应激,采用腺病毒质粒转染及短发夹RNA干扰技术验证TRB3与AKT磷酸化的关系。结果:Tca8113及CAL-27细胞通过毒胡萝卜素或衣霉素诱导24h后,TRB3mRNA及蛋白表达升高。在Tca8113细胞中,通过腺病毒质粒转染上调TRB3蛋白表达后,磷酸化AKT蛋白表达下降;通过短发夹RNA干扰下调TRB3蛋白表达后,磷酸化AKT蛋白表达升高。结论:在人舌体鳞癌细胞发生内质网应激后,TRB3蛋白表达上调并且抑制AKT磷酸化。

Tribbles相关蛋白3及磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶在舌体鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的研究Tribbles相关蛋白3(tribblesrelated protein 3,TRB3)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phospho-AKT,p-AKT)在人舌体鳞状细胞癌(oraltongue squamous cell carcinoma OTSCC)中的表达及临床意义。方法采用RT-PCR及Western blot方法检测18例OTSCC及对应癌旁黏膜组织中TRB3及p-AKT的表达,免疫组化方法检测128例OTSCC及30例癌旁黏膜石蜡标本中TRB3及p-AKT的表达,分析其表达与OTSCC预后的关系。结果 RT-PCR显示TRB3 mRNA在15例OTSCC组织表达较癌旁黏膜组织中升高(83.3%,15/18);Westernblot显示TRB3蛋白及p-AKT蛋白在13例OTSCC组织中的表达均较癌旁黏膜组织中升高(72.2%,13/18):免疫组化显示128例OTSCC标本中,TRB3蛋白高表达率为49.2%(63/128),p-AKT蛋白高表达率为68.8%(88/128),均较癌旁黏膜表达增高(P均≤0.001),且均与OTSCC的T分级、N分级及复发相关,p-AKT蛋白及TRB3蛋白的表达呈负相关(r=-0.27,P<0.01)。结论 TRB3及p-AKT在OTSCC中高表达并且与肿瘤预后相关。

IgE与sFcεRI在老年分泌性中耳炎患者外周血中的水平变化及其检测意义

目的探究免疫球蛋白E(IgE)与免疫球蛋白E高亲和力抗体可溶同工型(sFcεRI)在老年分泌性中耳炎患者外周血中的变化及其检测意义。方法选择2018年1月-2021年1月郴州市第一人民医院收治的74例老年分泌性中耳炎患者纳入老年组,100例儿童分泌性中耳炎患者纳入儿童组,同期在我院体检健康者60例纳入对照组,比较3组血清IgE与sFcεRI水平,比较不同病情程度的老年患者血清IgE与sFcεRI水平,比较老年患者治疗前后的血清IgE与sFcεRI水平.采用spearman相关分析血清IgE、sFcεRI与老年分泌性中耳炎的发生及其病情程度的相关性,采用Logistic回归分析血清IgE、sFcεRI与老年分泌性中耳炎的关系。结果老年组和儿童组血清IgE水平显著高于对照组(P<0.05),血清sFcεRI水平显著低于对照组(P<0.05),而老年组与儿童组血清IgE和sFcεRI水平差异无统计学意义(P>0.05)。急性组、亚急性组与慢性组老年患者血清IgE水平依次显著上升(P<0.05),血清sFcεRI水平依次显著下降(P<0.05)。血清IgE水平与老年患者分泌性中耳炎的发生及其病情程度均呈正相关(P<0.05);血清sFcεRI与老年患者分泌性中耳炎的发生及其病情程度均呈负相关(P<0.05)。治疗后,老年患者血清IgE水平显著低于治疗前(P<0.05),血清sFcεRI水平显著高于治疗前(P<0.05)。Logistic回归分析显示,血清IgE水平升高及sFcεRI水平下降是老年分泌性中耳炎发生的危险因素(P<0.05)。结论老年分泌性中耳炎患者外周血中IgE呈高表达、sFcεRI呈低表达,其水平变化与老年分泌性中耳炎的发生、病情进展及转归情况关系密切。

盐酸氨溴索鼓室内注射联合吸入用布地奈德混悬液雾化治疗分泌性中耳炎的临床疗效

目的探讨盐酸氨溴索鼓室内注射联合吸入用布地奈德混悬液雾化治疗分泌性中耳炎的临床疗效。方法选取郴州市第一人民医院2019年3月—2020年1月收治的分泌性中耳炎患者90例,按照随机分层法分为对照组和研究组,各45例。对照组给予盐酸氨溴索鼓室内注射,研究组在对照组基础上给予吸入用布地奈德混悬液雾化治疗。两组均持续治疗1个月。比较两组临床疗效,治疗前后耳积液、血清降钙素原(PCT)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平、鼓室压、语频气导听阈,并比较两组不良反应发生率。结果研究组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗前两组耳积液、血清PCT与hs-CRP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后研究组耳积液、血清PCT与hs-CRP水平低于对照组(P<0.05)。治疗前两组鼓室压、语频气导听阈比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后研究组鼓室压、语频气导听阈低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论盐酸氨溴索鼓室内注射联合吸入用布地奈德混悬液雾化治疗分泌性中耳炎的临床疗效确切,能有效减轻炎性反应,改善听力水平,促进病情快速稳定,且安全性较高。

枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移中的作用及分子机制

目的探讨枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用及分子机制。方法①药物浓度递增法构建顺铂耐药鼻咽癌C666/DDP细胞株。②枞酸对C666/DDP细胞增殖、侵袭及迁移的影响研究:CCK-8法、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP)水平检测及裸鼠皮下成瘤实验检测枞酸对C666/DDP细胞体外、体内增殖及凋亡能力的影响;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力。③Western blot及IHC法检测PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达情况。结果①顺铂对C666-1细胞毒性IC50约为25μmol/L。RI=25μmol/L/4μmol/L=6.25,获得耐药性,C666-1-DDP耐药株构建成功。②枞酸可促进C666/DDP细胞凋亡,抑制其增殖,且表现为G2/M期阻滞;Transwell显示枞酸抑制C666/DDP细胞迁移及侵袭能力,提高C666/DDP细胞ROS水平并使MMP降低。③动物实验显示枞酸在体内呈浓度梯度抑制顺铂耐药鼻咽癌的增殖,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结论枞酸可抑制顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭及迁移,其机制与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

鼻咽癌中GLRX3的表达及其对铁代谢和Wnt/β-catenin信号通路调控机制的研究

目的探究GLRX3在鼻咽癌(NPC)中的表达及其对铁代谢的影响和相关通路的调控。方法利用免疫组化检测鼻咽癌组织与癌旁组织中GLRX3的表达水平;采用RT-PCR检测组织中GLRX3 mRNA的表达水平;将人鼻咽癌上皮细胞HONE1设置为4组,分别为未转染的细胞对照组(Control组),转染对照序列shRNA-NC的细胞阴性对照组(shNC组),转染序列shRNA-GLRX3的细胞组(shGLRX3组),铁离子螯合剂处理细胞组(DFO组);RT-PCR与Western blot检测各组细胞中GLRX3、Ferritin、TFR1、Wnt1、β-catenin的mRNA和蛋白表达水平;采用CCK-8法和Transwell法分别检测上述各组细胞的增殖和侵袭能力。结果与癌旁组织相比,鼻咽癌组织中GLRX3 mRNA的表达显著增加(P<0.05)。与Control组和shNC组相比较,shGLRX3组细胞中GLRX3 mRNA及蛋白的表达水平均显著下调(P<0.05),前两组无明显差异(P>0.05)。同时,shGLRX3组铁代谢相关蛋白Ferritin、TFR1的表达较Control组显著降低(P<0.01);shGLRX3组与DFO组细胞的增殖与侵袭能力较Control组细胞均显著降低(P<0.01),前两组无明显差异(P>0.05)。且shGLRX3组细胞和DFO组细胞中Wnt1、β-catenin的mRNA及蛋白的表达也显著降低(P<0.05)。结论降低鼻咽癌中高表达的GLRX3可能通过下调肿瘤细胞的铁代谢相关蛋白,抑制细胞的增殖与侵袭能力,这可能与Wnt/β-catenin信号通路的激活相关。

耳内镜下脱细胞异体真皮与耳屏软骨-软骨膜行Ⅰ型鼓室成形术的疗效比较

目的:比较耳内镜下脱细胞异体真皮与耳屏软骨-软骨膜行Ⅰ型鼓室成形术的疗效。方法:回顾性分析行耳内镜下Ⅰ型鼓室成形术的患者共121例(121耳),按采用的修补材料分为脱细胞异体真皮组(异体真皮组)56例(56耳)和耳屏软骨-软骨膜复合体组(软骨组)65例(65耳)。比较2组手术时间、术后鼓膜愈合率、听力恢复情况。随访12个月。结果:异体真皮组与软骨组手术时间分别为(59.29±6.48)min和(70.78±7.31)min,2组手术时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后1个月鼓膜愈合率分别为92.86%、92.31%,术后6个月分别为91.07%、90.77%,术后12个月分别为91.07%、90.77%,2组术后1、6、12个月鼓膜愈合率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组术后12个月听力恢复情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:耳内镜下采用脱细胞异体真皮及耳屏软骨-软骨膜行Ⅰ型鼓室成形术疗效确切,能提高鼓膜愈合率及改善患者听力效果。前者手术时间短,无需取材创伤小,值得推广应用。

BATF2在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨BATF2基因在人舌鳞状细胞癌（oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC）中的表达及临床意义.方法 采用定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组化方法检测BATF2基因在OTSCC组织（16例）及对应癌旁黏膜组织（16例）的表达,探讨BATF2表达水平与临床病理及预后的关系.结果 定量PCR显示BATF2 mRNA在13例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;蛋白质印迹法检测显示BATF2蛋白在14例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;免疫组化显示在202例OTSCC标本中,BATF2蛋白无表达20例（9.9％）,低表达104例（51.5％）,高表达78例（38.6％）;且BATF2蛋白表达水平与OTSCC组织分化相关（P=0.002）,BATF2蛋白低表达患者预后显著差于BATF2高表达者（P＜ 0.001）.结论 BATF2在OTSCC中低表达与肿瘤分化程度及预后相关,可作为预测OTSCC预后的分子指标及OTSCC潜在的治疗靶点.

Livin基因一肿瘤治疗新靶点

Livin是凋亡抑制蛋白（IAPs）家族的新的重要成员。Livin在多种肿瘤细胞中高表达，参与抑制细胞凋亡，与肿瘤发生发展密切相关。研究发现，通过下调或抑制Livin基因的表达及诱导产生特异性地识别Livin的抗体可抑制、杀死肿瘤细胞，为恶性肿瘤的诊断、细胞和基因靶向治疗等提供新的方法。