基于尿控技术的改良经尿道前列腺钬激光剜除术治疗大体积前列腺增生临床观察

良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)是引起中老年男性下尿路症状的常见原因,经尿道前列腺电切术(transurethral resection of the prostate,TURP)是泌尿外科治疗BPH的“金标准”^([1])。TURP对于前列腺体积较小的BPH患者疗效确切,但用于治疗前列腺体积>80 mL的BPH患者时,术中出血量明显增加,术后下尿路症状改善不明显,且术后持续膀胱冲洗时间以及导尿管留置时间延长^([2-3])。美国泌尿外科协会指南指出,钬激光或铥激光前列腺剜除术是目前大体积前列腺增生和小体积前列腺增生患者均适用的微创治疗方法^([4])。

人睾丸特异表达基因TDRG1单克隆抗体的制备及鉴定

目的:构建原核质粒表达TDRG1重组蛋白,制备其单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性。方法:用逆转录聚合酶链反应法从成人睾丸组织中扩增TDRG1编码序列,将其克隆到pET21原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达TDRG1重组蛋白。以纯化后的重组蛋白免疫BALB/C小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体(mAb)。ELISA法检测杂交瘤细胞分泌mAb的效价和类型,Western印迹和免疫组织化学染色鉴定mAb的特异性。结果:成功构建了pET21/TDRG1原核表达质粒并获得纯度较高的重组蛋白。筛选出2株能稳定分泌抗TDRG1的单克隆抗体杂交瘤细胞系,其效价比高达1∶1.6×106,免疫球蛋白类型均为IgG1类。Western印迹和免疫组织化学染色显示该mAb能特异结合成人睾丸组织中的TDRG1蛋白。结论:所获得的重组TDRG1蛋白纯度高,免疫抗原性强,并成功制备了抗TDRG1的单克隆抗体。

以学生为考官的教学法在导尿术培训中的应用

目的探讨以学生为考官的教学方法在导尿术技能培训中的作用和价值。方法选择2019年1月—2019年6月在浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科进行规范化培训或轮转的60名住院医师为研究对象,随机分成以学生为考官组(实验组)和传统教学组(对照组),每组各30名。比较两组学员在导尿术技能培训后的考核成绩以及对两种教学方法的评价。结果以学生为考官组(实验组)的技能考核成绩较传统教学组(对照组)明显提高,实验组对教学方法的评价也要好于对照组,P<0.05。结论以学生为考官的教学方法可以帮助住院医师更好地掌握导尿术操作技能。

应用实时硬度监测结合多普勒超声诊断勃起功能障碍

目的:探讨前列腺素E1(PGE1)阴茎海绵体注射后实时阴茎硬度检查仪(Rigiscan)结合多普勒超声技术诊断勃起功能障碍(ED)的价值。方法:1998年1月至2007年12月间的1392例ED患者,使用PGE1阴茎海绵体注射,Rigiscan连续记录1h,观察阴茎勃起情况。使用阴茎彩色超声诊断仪检测阴茎海绵体阴茎深动脉,测量血流参数。结果:1392例患者中阳性反应者1039例,阴性反应者353例。阳性反应者中,PGE1注射剂量为10μg663例,20μg265例,30μg97例,60μg14例,分别检出血管功能障碍89(13.4%)、39(14.7%)、41(42.3%)及10(71.4%)例。Rigiscan检查阴性者血管性ED267例(75.6%)。不同剂量PGE1激发勃起与血管功能障碍比率比较有统计学意义(P<0.001)。结论:前列腺素E1诱导阴茎勃起安全有效。药物激发勃起时,所需药物剂量越大,血管功能障碍的检测率越高。实时硬度监测结合多普勒超声检查能提高血管性ED的诊断准确率。

组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达

目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。

Cajal间质细胞数量在反复膀胱炎大鼠膀胱中增加

目的研究Cajal间质细胞(ICCs)在大鼠反复膀胱炎相关膀胱过度活动症(OAB)膀胱中的数量变化。方法将大鼠分为对照组和实验组[大肠埃希菌(E.coli)1×10^8~1.2×10^8 CFU/mL,100μL膀胱灌注],通过尿检和尿流动力学测定及HE染色膀胱组织明确OAB建模成功;用免疫荧光法观察膀胱组织c-kit阳性的ICCs,Western blot检测干细胞因子(SCF)及c-kit蛋白表达水平。结果实验组大鼠较对照组ICCs网格状分布紊乱,数量明显增加(P<0.05),干细胞因子(SCF)及c-kit蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论ICCs在反复膀胱炎膀胱中明显升高。

经尿道柱状水囊前列腺扩开术治疗小体积良性前列腺增生专家共识

经尿道柱状水囊前列腺扩开术治疗小体积良性前列腺增生(BPH)是我国拥有该技术自主知识产权,操作简便、安全有效的创新性手术方法。中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会前列腺学组、天津市中西医结合学会泌尿外科专业委员会组织小体积BPH扩开术中西医专家编写组,就柱状水囊前列腺扩开术的治疗原理、适应证、禁忌证、术前评估内容与方法、手术步骤与技术要点、并发症与防治、术后护理与健康教育、术后随访内容与方法等问题,历时2年,经反复修改论证,终形成经尿道柱状水囊前列腺扩开术治疗小体积良性前列腺增生专家共识。

CBL与传统教学法在泌尿外科教学中的应用比较

目的比较以病例为基础(Case-Based Learning,CBL)的教学方法与传统教学法在泌尿外科教学中的应用效果。方法选择2018年7—12月在我科实习的112名浙江大学医学院5年制本科生为研究对象,随机分成两组,每组各56名学生。其中,观察组采用CBL教学法进行临床带教,而对照组则按照传统教学模式进行。最后比较两组学生在出科考核中的理论及操作考试成绩,并对各自接受的教学方法进行评价。结果观察组学生的理论考试成绩要优于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05),但两组的技能操作考核成绩无明显差异。同时,观察组学生对接受的CBL教学法的评价也要好于对照组的传统教学方法。结论CBL教学法在泌尿外科临床带教中可以取得较好的教学效果。

输尿管软镜下钬激光碎石术治疗马蹄肾肾结石12例

马蹄肾是最常见的肾脏融合畸形,在一般人群中发病率约为0.25%,由于肾脏发育较差、旋转不良且输尿管走形迂曲,易出现不同程度的尿路梗阻及肾积水,并继发结石、感染,其中尿路结石的形成率约为20%[1-3]。近年来,笔者采用输尿管软镜下钬激光治疗马蹄肾肾结石12例,取得满意疗效,现报道如下。

T1b期肾癌保留肾单位手术的适应证选择与疗效分析

目的 探讨T1b期肾癌行NSS的适应证选择、安全性及其临床效果.方法 对47例T1b期肾癌患者实施肾部分切除术.结果 OPN及LPN的热缺血时间分别为（15.3±5.8）min,（22.1±7.2）min.术后并发症：迟发性肾脏出血1例,术后肾动脉瘤1例,下肢深静脉血栓1例,分别予二次手术、选择性肾动脉栓塞术、抗凝等治疗.术后随访时间5个月～10年,5例失访,14例肿瘤转移.结论 T1b期肾癌选择肾部分切除术是安全可行的.需要综合考虑患者意愿、主要脏器功能状况、肿瘤与肾血管的解剖关系、残留肾单位的比例及术者擅长的术式等多种因素.因此,NSS有望成为T1b期肾癌的标准术式之一.

逆行输尿管软镜联合钬激光治疗肾盂旁囊肿合并肾结石的疗效观察

目的 探讨逆行输尿管软镜联合钬激光治疗肾盂旁囊肿合并肾结石的安全性、可行性及临床疗效.方法 回顾性分析2012年12月至2017年5月11例肾盂旁囊肿合并肾结石患者的临床资料.囊肿大小约3.5cm×3.0cm～4.8cm×4.3cm,平均约（4.1±0.3）cm,肾结石直径约1.0～1.8cm,平均约（1.5±0.3）cm.全身麻醉下行经尿道输尿管软镜钬激光肾盂旁囊肿内切开引流术＋肾结石碎石取石术.采用输尿管软镜逆行进入肾盂,使用钬激光在囊肿压迫肾盂最明显的无血管处切开,使其与集合系统完全相通,随后进行钬激光碎石,并留置双J管引流.结果 11例手术均成功完成,手术时间69～118min,平均88min,其中囊肿处理时间21～39min,平均28min,术中、术后无严重并发症发生.术后随访3～12个月,囊肿消失8例,缩小3例,无囊肿及结石复发.结论 逆行输尿管软镜联合钬激光治疗肾盂旁囊肿合并肾结石是安全可行的,并且创伤小、恢复快、无复发,临床疗效确切.

经尿道激光前列腺剜除术热点问题中国专家共识

良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)是导致中老年男性下尿路症状(lower urinary tract symptoms,LUTS)最常见的疾病,严重影响中老年男性的生活质量。经尿道激光前列腺刻除术(transurethral laser enucleation of the prostate,TLEP)因出血少、康复快、复发率低、适用于不能停止抗凝/抗血小板治疗的患者等特点,广泛应用于临床。

针对磷酸二酯酶基因治疗勃起功能障碍的研究进展

阴茎勃起功能障碍（erectile dysfunction，ED）是影响男性健康的一种常见疾病，其患病率大约是20％～45％。近年来，ED的治疗取得了很大的进展，尤其是高选择性磷酸二酯酶5型（phosphodiesterase V，PDE5）抑制剂西地那非的问世，使ED的治疗发生了根本性的改变。然而选择性PDE，抑制剂需长期服药，治疗费用昂贵，加之头痛、面部潮红、消化不良、鼻炎、视觉异常等副作用，从而限制了临床上的应用。近年来，基因治疗ED的研究取得了一些可喜的成果，展示了美好的前景。

预先留置双J管在经皮肾镜取石术中应用的临床分析

目的探讨经皮肾镜取石术中预先留置双J管的临床效果及可行性。方法回顾性分析了2014年6月至2017年2月浙江大学医学院附属第二医院74例接受经皮肾镜碎石取石术（PCNL）手术的肾结石患者的临床资料。74例患者中男54例，女20例，年龄27～78（49．5±12．3）岁。结石直径20～59（29．4±4．3）min。手术方法为先截石位通过经尿道输尿管镜下患侧输尿管预先留置Fr6双J管，随后留置三腔Foley导尿管并夹闭引流腔，袋装3000ml生理盐水（高度60—80cm）连接冲洗腔。改俯卧位后经冲洗腔灌注生理盐水，产生人工肾积水后由B超引导下建立经皮肾穿刺通道Fr20，并行一期钬激光碎石取石术。结果所有患者均成功完成经皮肾穿刺并建立Fr20通道，通道建立时间（8．0±2．0）min，手术时间（79±46）min，血红蛋白下降值（17．0±4．0）g/L，血肌酐上升（3．1±1．1）μmol／L，结石取尽率81．1％，并发症发生率8．1％（1例损伤胸膜并发气胸，1例术后形成动静脉瘘大出血，4例术后高热）。结论经皮。肾镜取石术中预先留置双J管是一种安全、可行的方法，有利于经皮肾通道的穿刺和建立，且可避免顺行留置双J的盲目性。

应用前列腺素E_1注射治疗勃起功能障碍8年经验

目的观察前列腺素E1(PGE1)注射治疗勃起功能障碍(ED)的长期疗效、副作用及预后。方法使用PGE1行阴茎海绵体注射,阴茎硬度检查仪(Rigiscan)连续记录1h,并根据观察结果,调查PGE1注射剂量,确定每例患者合适的注射量,掌握注射方法后回家自行注射。共筛选出ED患者410例,随访患者阴茎勃起情况、药量调整和副作用。结果410例ED患者中,心理性139例,静脉性83例,动脉性36例,神经性78例,混合性74例。对治疗满意的患者有256例(62.44%),其中21例(5.1%)在使用PGE15次后停用,并能达到满意的性生活而治愈。293例(71.46%)患者自述注射时有胀痛感。171例(43.17%)因疼痛(105例)、操作不便(25例)、副作用顾虑(37例)和其他原因(4例)而于6个月后放弃治疗。204例(49.76%)患者使用时间已超过1年,24例(5.85%)患者使用时间已超过5年,7例(1.7%)使用已有8年。未发现阴茎异常勃起和阴茎海绵体纤维化。注射损伤阴茎表面血管致瘀斑者有20例。有27例患者失访。结论PGE1是治疗ED的一种安全有效的药物,可以长期使用。其最常见的副作用是阴茎疼痛。Rigiscan能帮助确定PGE1的注射剂量。

人类睾丸基因TDRG1在不同物种间同源序列的克隆及分析

目的克隆人类睾丸特异基因TDRG1在不同物种间的同源序列,为研究该基因功能寻找动物模型。方法以人TDRG1基因全长序列作为查询序列,利用BLASTN软件检索小鼠、大鼠、黑猩猩和猕猴基因组数据库,查询到的同源序列运用RT-PCR实验验证。免疫组化染色初探TDRG1同源蛋白在不同物种间的表达。结果生物信息学分析表明小鼠和大鼠基因组中未检索到与TDRG1同源的序列,黑猩猩和猕猴基因组中分别有相似性为98%和90%的同源序列存在。RT-PCR验证了猕猴睾丸中的同源序列,免疫组化结果显示抗人TDRG1单克隆抗体能特异结合猕猴睾丸中的同源蛋白。RT-PCR和免疫组化染色也表明小鼠和大鼠睾丸中无同源序列和同源蛋白表达。结论 TDRG1基因在小鼠和大鼠睾丸中无同源基因表达,而在猕猴和黑猩猩睾丸中有同源基因表达,为今后建立动物模型提供了理论依据。

人睾丸基因TDRG1重组真核载体的构建及其表达

目的构建人睾丸基因TDRGl的真核表达质粒,并研究其表达。方法取人新鲜正常睾丸组织,提取总RNA,采用逆转录-聚合酶联链反应(RT-PCR)扩增TDRG1基因编码序列;将该基因克隆到真核表达载体pYD5中,构建真核细胞表达载体pYD5-TDRG1,用限制性内切酶酶切分析,DNA序列分析鉴定重组质粒;将测序正确的重组质粒pYD5-TDRG1在脂质体介导下转染293细胞,间接免疫荧光法和Western Blot法鉴定目的蛋白质的表达。结果 RT-PCR扩增出TDRG1基因编码序列,目的插入片段长约303bp;产物行限制性内切酶酶切后连接到真核表达载体pYD5,重组质粒pYD5-TDRG1经酶切及DNA测序鉴定构建成功;该质粒转染293细胞48h后在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,阳性细胞率96.42%;行Western blot分析检测到约39.8kD的目的蛋白表达。结论成功构建了人类睾丸基因TDRG1的真核表达载体pYD5-TDRG1,TDRG1基因在293细胞内成功表达。

SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库

目的运用SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库。方法提取恒河猴睾丸组织总RNA并分离出mRNA,用clontech公司SMART^(TM)cDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得全长cDNA双链;经SfiI酶切、层析柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB连接后电转化及铺板,建成原始文库。结果经鉴定,原始文库为2.5×10~6个重组子,扩增后文库滴度为4.5×10~9CFU/mL。重组率为100%,平均插入片段为1.6kb。结论已构建文库质量较高,为进一步筛选、克隆睾丸特异表达基因奠定了基础。

腺苷及其受体在男性泌尿生殖系统的研究进展

早在1929年，Drury等就已发现腺苷对心脏的作用，但直到1972年Bumstock才提出嘌呤能假说。目前研究表明，腺苷信号通路参与了体内多方面生理与病理过程。本文就腺苷及其受体在泌尿生殖系统的表达及作用机制作一综述。

Clusterin蛋白在男性不育症睾丸组织中的表达及意义

目的探讨Clusterin蛋白在男性不育症患者睾丸组织中的表达及意义。方法采用免疫组化染色法和Western blot法检测了10例正常睾丸组织,8例梗阻性不育患者睾丸组织,13例非梗阻性不育患者睾丸组织标本中Clusterin蛋白的表达水平。结果免疫组化染色结果表明,3组睾丸组织中C1usterin蛋白都有表达,正常睾丸组织、梗阻性不育患者睾丸组织、非梗阻性不育患者睾丸组织中阳性或强阳性表达率分别为100%(10/10),87.5%(7/8),46%(6/13),非梗阻性不育睾丸组织中Clusterin蛋白表达水平显著低于正常睾丸组织(P<0.05)。Western blot法检测结果也表明,该蛋白在非梗阻性不育睾丸组织中的表达较正常睾丸组织显著降低,而在梗阻性不育睾丸组织中的表达无显著性降低。结论 Clusterin蛋白的表达降低与非梗阻性不育症的发生密切相关。