转GsPPCK1基因苜蓿植株的获得及其耐碱性分析

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶(phosphoenolpyruvate carboxylase kinase,PPCK)是一种钙不依赖的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)类蛋白激酶,参与碳氮代谢等多个生物学过程,然而其在碱胁迫反应中的作用尚未见报道。本研究在前期野生大豆碱胁迫基因表达谱数据基础上,采用同源克隆的方法分离野生大豆(Glycine soja)PPCK1基因,该基因编码的氨基酸序列与大豆(Glycine max)PPCK1蛋白(AAQ83695.1)具有99%的相似性,被命名为GsPPCK1。在50mmolL–1NaHCO3胁迫处理3h内,根和叶中GsPPCK1基因上调表达,属碱胁迫早期应答基因。通过农杆菌介导法对肇东苜蓿进行遗传转化,并对RT-PCR阳性的超表达转基因株系进行耐碱性分析,在100mmolL–1NaHCO3处理15d后转基因株系生长状态良好,而非转基因对照株系明显萎蔫、失绿、甚至死亡;转基因株系的丙二醛含量和相对质膜透性显著低于非转基因株系(P<0.05),而叶绿素含量和根系活力显著高于非转基因对照(P<0.05),说明超量表达GsPPCK1基因增强了苜蓿的耐碱能力。以上结果表明,GsPPCK1参于植物耐碱胁迫反应过程,在碱胁迫基因工程研究领域具有良好的理论和实际应用意义。

转GsSAMS基因苜蓿农艺性状调查

以前期试验获得的两个耐盐转GsSAMS基因苜蓿株系A-21和A-23为试验材料,进行产量性状和形态性状的调查与分析,为其产业化提供依据。结果表明,在产量性状上,两个转基因苜蓿株系春秋季的茎分枝数、产草量及干重与对照株系相比,不存在显著差异;在形态性状上,两个转基因苜蓿株系的生长速度、株高、节数及节间长度与对照株系相比,差异亦不显著。说明外源基因GsSAMS在苜蓿体内表达并未显著改变苜蓿的产量性状和形态性状。

转AtDREB2A基因苜蓿的耐碱性分析

对已获得的转基因苜蓿进行了RT-PCR检测,确定AtDREB2A基因已在转基因苜蓿中超量表达。并研究了转AtDREB2A基因苜蓿在碱胁迫(100mmol/L,pH8.5)下表型和生理生化指标的变化。结果表明,转AtDREB2A基因苜蓿的相对质膜透性及丙二醛含量显著低于野生型株系,株高、叶绿素及根系活力明显高于野生型株系,说明AtDREB2A基因的超量表达提高了转基因苜蓿的耐碱能力。

妊娠晚期女性B族链球菌感染状态与阴道微生态及妊娠结局的相关性分析

目的探讨妊娠晚期女性B族链球菌(GBS)感染状态与阴道微生态及妊娠结局的相关性。方法选取2017年1月1日-2019年6月30日在某院分娩的妊娠晚期女性126例,检测统计GBS感染发生情况,比较GBS感染者与未感染者的临床特征、阴道微生态(Nugent)评分、妊娠结局,分析妊娠晚期女性GBS感染发生的影响因素、不同Nugent评分者GBS阳性率及GBS感染与妊娠结局的关联性。结果126例产妇47例发生GBS感染,感染率为37.3%,年龄、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、阴道炎、孕前检查、流产史是妊娠晚期GBS感染的独立影响因素;GBS感染者Nugent评分高于未感染者;Nugent评分>6分者GBS阳性率高于4~6分及≤3分者;GBS感染者剖宫产、胎膜早破、宫内感染、胎儿窘迫、新生儿窒息发生率高于未感染者;妊娠晚期GBS感染与Nugent评分呈正相关,与剖宫产、胎膜早破、宫内感染、胎儿窘迫、新生儿窒息发生率呈正相关。结论妊娠晚期GBS感染的发生受年龄、妊娠期并发症、阴道炎等多种因素影响,与阴道微生态紊乱密切相关,可增加不良妊娠结局发生风险,应及时给予有效治疗,以改善母婴健康。