大肠腺瘤和大肠癌组织c－fos、TGF－α的表达及其意义

本文应用免疫组化法研究了大肠癌和大肠腺癌组织中ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦ－α表达的意义。３２例大肠癌ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦ－α阳性病例率为５０％和５９．４％，４０例腺瘤则分别为２７．５％和５５％；高分化腺癌ｃ－ｆｏｓ阳性病例率明显低于低分化腺癌、粘液腺癌和未分化癌；ＡＴＰ（０～＋）级腺瘤ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦ－α阳性病例率明显低于ＡＴＰ（～）级腺瘤；淋巴结转移大肠癌ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦ－α阳性病例率高于淋巴结未转移的大肠癌，但无统计学意义。提示ｃ－ｆｏｓ、ＴＧＦ－α可能与大肠癌发生发展、生物学行为及预后有密切关系。

基础医学本科教学质量工程的建设与成效

实施基础医学本科教学质量工程的建设,在师资培养、课程建设、实验教学、教学内容、方法、管理等方面进行了探讨,取得了显著成效。

大肠癌和大肠腺瘤组织中的P16、Rb基因蛋白的表达及其意义

该文应用免疫组化法研究大肠癌和大胸腺癌组织中P16、Rb基因蛋白的表达及意义。32例大肠癌P16、Rb阳性病例率分别为34．3％和40．6％，40例腺瘤则分别为72．5％和37．5％。P16阳性病例率在大肠癌各病理组织类型中无明显差异，但Rb阳性病例率高分化腺癌较明显低于其他类型大肠癌（P＞0.05）；ATP（0～＋）级腺瘤P16阳性病例率明显高于ATP（＋＋～＋＋＋）级腺癌（P＜0.01）;ATP（O～＋）级腺瘤Rb阳性病例率较明显低于ATP（＋＋～＋＋＋）级脉瘤（P＞0.05）.揭示P16、Rb蛋白可能与大肠癌发生发展、生物学行为等有较密切关系。

VEGF和miR-205及靶蛋白Ezrin和LaminA/C在卵巢癌中的表达及意义

目的:分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),miR-205,Ezrin,Lamin A/C在卵巢癌组织中的表达及意义。方法:采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测卵巢癌患者和正常女性血清中VEGF的含量;免疫组织化学检测上皮性卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中血管内皮细胞生长因子受体-1(vascular endothelial cell growth factor receptor-1,VEGFR-1),VEGFR-2,Ezrin,Lamin A/C蛋白的表达情况和CD31所标记的微血管密度(microvessel density,MVD);采用荧光定量PCR方法检测卵巢上皮性癌组织、卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中miR-205,Ezrin和Lamin A/C的相对表达量。结果:VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中的表达水平为(116.10±11.94),高于正常女性(40.04±4.97,P<0.05);VEGFR-1和VEGFR-2在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为75.9%和91.4%,高于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05),VEGFR-1和VEGFR-2在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);MVD在上皮性卵巢癌组织中的计数为(7.56±0.51),高于正常卵巢组织(1.22±0.56,P<0.05),MVD在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);miR-205在上皮性卵巢癌组织中的相对表达量为(0.106±0.035),高于正常卵巢组织中的相对表达量(0.0007±0.0005,P<0.05),miR-205在卵巢良性肿瘤组织中的相对表达量为(0.0002±0.0003),高于正常卵巢癌组织中的相对表达量,但差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学结果显示:Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率分别为51.7%和60.3%,低于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05),Ezrin和Lamin A/C在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示:Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中的相对表达量低于正常卵巢组织中的相对表达量(P<0.05);Ezrin和Lamin A/C在卵巢良性组织中的相对表达量高于在上皮性卵巢癌组织,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中表达上调;miR-205在上皮性卵巢癌组织中表达上调;差异蛋白Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中表达下调,提示VEGF和miR-205及靶蛋白Ezrin和Lamin A/C与卵巢癌的侵袭、转移相关。

胃癌组织中PTEN,VEGF,MMP-9的表达及相关性研究

目的 探讨胃癌中PTEN,VEGF,MMP-9的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 应用免疫组织化学SP法检测 7 1例胃癌组织及 3 7 例远癌胃黏膜中PTEN,VEGF,MMP-9 的表达。结果 胃癌组织中PTEN蛋白表达 ( 7 1. 8% )显著低于远癌胃黏膜的表达 ( 1 0 0% ) (P < 0. 0 1 ) , 且与肿瘤的组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移呈负相关 (均P< 0. 0 5 ),而与年龄、性别等无关 (均P> 0. 0 5 ) 。VEGF在胃癌中的表达 ( 6 2. 0% ) 显著高于远癌胃黏膜的表达 ( 2 9. 7% ) (P < 0. 0 1 ) ,且与淋巴结转移呈正相关 (P< 0. 0 1 ) ,而与年龄、性别、组织分化程度及肿块浸润深度无关 (均P> 0. 0 5 )。MMP-9在胃癌中的表达 ( 6 9% ) 显著高于远癌胃黏膜的表达 ( 4 0. 5% ) (P < 0. 0 1 ),且与淋巴结转移呈正相关 (P< 0. 0 5 ) , 而与年龄、性别、组织分化程度及癌组织浸润深度无关 (均P> 0. 0 5 )。PTEN在胃癌中的表达与VEGF和MMP-9呈负相关 (P < 0. 0 5 )。结论 胃癌中PTEN蛋白表达降低,其表达与肿瘤的组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关,且与VEGF,MMP-9表达呈负相关。联合检测PTEN,VEGF,MMP-9有助于提高胃癌侵袭转移能力的评估,对胃癌的预后判断具有重要的临床意义。

肺鳞状细胞癌中Notch1～4和DLL4的表达及与微血管密度的相关性

目的探讨Notch1～4及DLL4在肺鳞状细胞癌肿瘤细胞和间质中表达的临床病理意义及与微血管密度的相关性。方法免疫组化SP法检测64例肺鳞癌和癌旁非肿瘤肺组织中Notch1～4及DLL4的表达,免疫组化SP法检测CD31计数肺鳞癌的微血管密度。结果 (1)肺鳞癌肿瘤细胞内Notch1～4及DLL4的表达明显高于癌旁支气管黏膜上皮(P<0.05),其中Notch1、3和DLL4的表达与肿瘤的大小呈正相关(r=0.334、0.421、0.475,P<0.05),Notch1与Notch2的表达与肿瘤淋巴结转移呈正相关(r=0.356、0.417,P<0.05);(2)肺鳞癌间质及癌旁肺间质中Notch1～3的表达无明显差异(P>0.05),而Notch4与DLL4在肺鳞癌间质中的表达明显高于癌旁肺间质(P<0.05),且与肿瘤大小(r=0.300、0.440,P<0.05)及临床分期(r=0.365、0.336,P<0.05)呈正相关;(3)肿瘤细胞中DLL4及间质内DLL4、Notch4的表达与肺鳞癌的微血管密度呈负相关(r=-0.285、-0.323、-0.258,P<0.05)。结论肺鳞癌肿瘤细胞和间质中Notch与DLL4的表达可能促进肿瘤发展,并对肿瘤血管的生成具有重要的调控作用。

克罗恩病和肠结核活检及手术标本的病理学特征分析148例

目的:探讨克罗恩病(Crohn's disease,CD)和肠结核(intestinal tuberculosis,ITB)活检及手术标本的病理学特征在二者鉴别诊断中的价值.方法:选取在湘雅二医院、湘雅医院、湘西自治州人民医院确诊的CD和ITB患者各55例,其中活检标本各55例;手术病理标本CD29例,手术ITB9例.统计每例标本的病理学特征并进行比较.结果:CD患者活检标本与ITB患者活检标本比较,黏膜下层增宽、裂隙状溃疡及肉芽肿差异均有统计学意义(37.5%vs14.0%,10.9%vs0%,10.9%vs43.6%,均P<0.05);手术标本比较,黏膜下层增宽、裂隙状溃疡、固有肌层增厚、鹅卵石征及肉芽肿差异均有统计学意义(51.7%vs11.1%,34.5%vs0%,62.1%vs11.1%,37.9%vs0%,20.7%vs77.8%,均P<0.05).结论:活检标本的病理学特征鉴别CD和ITB价值有限,手术标本病理学特征对他们有鉴别价值,但仍需结合临床、内镜及影像学检查综合诊断.

病理学双语教学的几点体会

为培养具有较高水平英语交流能力的医学人才,我们尝试在七年制、五年制各专业医学生的病理教学中开展了双语教学。通过课前精心准备、采用多种教学方法和手段,课后强化训练等,获得了较好的效果。本文总结了几点经验和体会。

TGIF,MMP9和蛋VEGF白在胃癌中的表达及临床病理联系

目的:探讨TG IF,MMP9和VEGF蛋白在胃癌中的表达及其临床病理联系。方法:运用连续切片HE染色法观察SGC-7901细胞、PcDNA3.1转染细胞和TG IF转染细胞荷瘤裸鼠瘤组织有无血管浸润和远处转移,同时以免疫组织化学法分析转移相关分子MMP2,MMP9和VEGF在裸鼠瘤组织中的表达变化,并分析TG IF,MMP9和VEGF蛋白在76例胃癌组织中的表达水平及其临床病理联系。结果:3种细胞的荷瘤裸鼠均无远处转移,SGC-7901细胞和PcDNA3.1转染细胞接种组裸鼠瘤组织有癌栓形成,但TG IF组无癌栓形成;对照组MMP9和VEGF均呈强阳性表达,表达水平明显高于TG IF组,但MMP2在3组间的表达无明显差别。胃癌组织中TG IF蛋白表达阳性,阳性率为46.1%(35/76),明显低于断端胃黏膜(78.1%)(P<0.05),且它的低表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。MMP9表达阳性率为59.2%,明显高于断端胃黏膜(31.3%)(P<0.05),且其高表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。VEGF蛋白的阳性表达率为56.6%,明显高于断端胃黏膜(31.3%)(P<0.05),且其表达与淋巴结转移和胃癌的浸润深度密切相关(P<0.05)。TG IF与VEGF和MMP9蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。结论:TG IF可能通过下调VEGF和MMP9蛋白的表达抑制胃癌的转移。

中国14省不同地区常见嗜尸性苍蝇mtDNA中COⅠ基因序列检测

目的:通过检测嗜尸性苍蝇线粒体DNA(mtDNA)上细胞色素氧化酶亚单位Ⅰ(COⅠ)中278 bp基因序列,鉴定嗜尸性苍蝇种类,为法医鉴别嗜尸性苍蝇种类提供可靠依据。方法:随机采集内蒙古包头、赤峰、天津、南宁、福州、山东临沂、石家庄、银川、兰州、北京怀柔、河南新乡及南阳、山西大同、安徽芜湖、浙江衢州、湖南长沙及株洲、永州等14个省不同地区室外多点放置兔、狗、猪尸体上的嗜尸性苍蝇38只。利用改进的小型昆虫DNA匀浆方法提取上述苍蝇mtDNA,进行PCR扩增;7%聚丙烯酰胺非变性凝胶连续缓冲体系垂直电泳和银染显色技术进行扩增结果检测;PCR胶回收试剂盒纯化;ABI3730测序仪测序;MEGA4软件包进行序列分析和构建UPGMA系统发育树。结果:有效鉴定出上述38只嗜尸性苍蝇,3科(蝇科、丽蝇科、麻蝇科),10属(家蝇属、齿股蝇属、阿丽蝇属、带绿蝇属、裸金蝇属、原伏蝇属、金蝇属、绿蝇属、黑麻蝇属、别麻蝇属),12种(家蝇、开普齿股蝇、叉叶绿蝇、亮绿蝇、巨尾阿丽蝇、瘦叶带绿蝇、白头裸金蝇、新陆原伏蝇、大头金蝇、丝光绿蝇、黑尾黑麻蝇、棕尾别麻蝇)。结论:mtDNA上COⅠ中278 bp基因序列分析能有效地对嗜尸性苍蝇进行种类鉴定。该检测方法快速、简便和精确,可以作为法医鉴别嗜尸性苍蝇种类的依据。

银杏内酯软胶囊毒理学研究

目的 :观察动物ig银杏内酯软胶囊的急性毒性和长期毒性 ,确定无毒反应的剂量 ,以评估银杏内酯软胶囊长期用药的安全性。方法 :以最大浓度 ,最大体积的银杏内酯软胶囊ig昆明种小鼠一次 ,测定最大耐受量。以高、中、低 3个剂量对大鼠进行连续灌胃给药 2 6周 ,于用药 13、2 6周分别各处死 1/ 3动物观察大鼠的生长发育 ,摄食量 ,血液细胞学及生化学指征、脏器系数及组织病理学检查 ,停药观察 4周后再处死剩余 1/ 3动物作相应检查。结果表明 :小鼠 1d内 1次ig银杏内酯软胶囊最大耐受量≥ 2 997mg/kg ,各给药组与对照组检查指标结果统计分析均无明显差异 (P≥ 0 .0 5 )。结论 :ig银杏内酯软胶囊对小鼠 ,大鼠均无明显的毒性反应。

丙型肝炎病毒NS3蛋白促进人源肝细胞的增殖及其相关机制研究

丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白与肝癌细胞(HCC)的发生密切相关,但其机制尚不清楚.既往体外研究极少采用HCV的自然宿主细胞——人肝细胞作为研究体系,故所获研究结果有待进一步探讨和证实.构建了表达HCVNS3蛋白的真核质粒,通过稳定转染人源永生化肝细胞系QSG7701,建立了稳定表达HCVNS3蛋白的人源永生化肝细胞系QSG7701/NS3,以此为实验平台,检测了细胞增殖的变化,丝裂原蛋白激酶(MAPK)通路激酶磷酸化水平的改变及转录因子AP-1、NF-κB和STAT3的活性变化.结果表明:HCVNS3蛋白可促进人源永生化肝细胞QSG7701的增殖,HCVNS3蛋白激活ERKs/AP-1可能是其促进细胞增殖的重要机制,并通过上调转录因子NF-κB和STAT3的活性,诱导宿主细胞急性炎症损伤.

核转录因子Sp1在二氧化硅活化的Ⅱ型肺泡细胞中的表达及作用

目的 研究二氧化硅（SiO2）刺激的Ⅱ型肺泡细胞（A549）中核转录因子Sp1表达和定位的动态变化，探讨其在矽肺发生发展中的作用。方法 复制SD大鼠矽肺模型，免疫组化检测体内SiO2刺激的Ⅱ型肺泡细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位及其动态变化；逆转录-聚合酶链反应检测体外SiO2刺激的A549细胞中核转录因子Sp1 mRNA的动态变化；免疫细胞化学、Western印迹检测体外SiO2刺激的A549细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位及其动态变化。结果 大鼠矽肺模型中，SiO2刺激组与空白对照组相比，Ⅱ型肺泡细胞中核转录因子Sp1蛋白表达上调，于第7-14天达高峰；体外SiO2作用A549细胞30—960min，Sp1 mRNA表达呈现先升后降，峰值位于60min；Sp1总蛋白和核蛋白表达亦呈现先升后降的趋势，总蛋白表达峰值位于120min，核蛋白峰值位于240min；Sp1蛋白于60min开始发生明显的核移位，240min时核移位最明显。结论 SiO2能通过增强Ⅱ型肺泡细胞（A549）中Sp1的表达和核移位，从而在矽肺的发生发展过程中起重要的作用。

医学形态学开放性教学模式的改革和实践

开放性教学是国际医学教育发展的趋势。医学形态学结合自身学科的特点,逐步建立起一系列开放性教学管理制度,包括开放显微形态数码互动实验室、病理学多功能开放性学习中心、人体形态学科技馆和临床病理资料室。带领学生参观临床病理诊断,参加尸体解剖,举办临床病理讨论会(CPC),开展PBL教学与网络教学。通过一系列开放性教学活动,极大地调动了学生学习的积极性,丰富了教学方法和手段,改革了传统的教学模式,提高了教学质量,构建起一个国内领先、资源丰富的形态学开放性教学平台。

鞘内注射SB203580对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角环氧化酶-2表达的影响

目的:探讨鞘内注射p38丝裂原蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对大鼠慢性压迫性损伤(CCI)术后脊髓背角环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达的影响。方法:鞘内置管成功的SD雄性大鼠24只,随机分为4组:Sham组、NS组、DMSO组和SB组,其中Sham组做假手术,后3组大鼠右侧坐骨神经建立CCI模型。模型成功后,术后第6天开始分别鞘内注射生理盐水、2%二甲亚砜、SB203580,每天2次,连续5d。术前1d、术后第1,3,5,7,9,11天测定机械性痛阈。术后第11天测定机械性痛阈后处死大鼠,取脊髓腰膨大进行免疫组织化学分析测定COX-2蛋白表达。结果:与术前相比,Sham组术后机械性痛阈无明显改变(P>0.05),NS组和DMSO组在术后第1至11天机械性痛阈降低(P<0.05),SB组在术后第1至5天机械性痛阈降低(P<0.05),与NS组和DMSO组比较,SB组在术后第7至11天,机械性痛阈增加(P<0.05);免疫组织化学分析,NS组和DMSO组脊髓背角COX-2蛋白阳性细胞数和阳性评分均高于Sham组(P<0.05),SB组COX-2蛋白阳性细胞数和阳性评分低于NS组和DMSO组(P<0.05)。结论:鞘内注射SB203580可使神经病理性疼痛大鼠产生明显镇痛效应;可减少神经病理性疼痛大鼠脊髓背角COX-2蛋白的表达,p38MAPK参与COX-2蛋白表达的调节。

MMP_2、MMP_9、TIMP_1、TIMP_2在非小细胞肺癌中的表达及临床病理学意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP2、MMP9及其抑制剂TIMP1、TIMP2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学S-P法,分别检测43例NSCLC组织、15例正常支气管粘膜上皮组织中MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的蛋白表达。结果MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2在43例NSCLC中的阳性表达率(分别为79.1%、74.4%、55.8%及60.5%)明显高于正常支气管粘膜上皮组织(分别为26.7%、26.7%、20.0%及26.7%)(P<0.01或P<0.05);MMP2、MMP9的表达随着病理分级和临床分期增加而有增高趋势;而TIMP1、TIMP2的阳性表达则呈下降趋势。MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的阳性表达率与患者淋巴结转移和3年生存期密切相关(P<0.05),但与患者的临床参数均无明显关系(P>0.05)。结论MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的过度表达与NSCLC的发展、淋巴结转移及预后有密切关系,可作为临床评估NSCLC的进展及预测其转移潜能和预后的重要指标之一。

肠日本血吸虫病与肠癌组织c-erbB-2及DPC4表达水平的研究

目的探讨慢性日本血吸虫病与大肠癌之间的关系。方法用免疫组化两步法及SP法分别检测1 5例正常结肠黏膜,1 5例单纯血吸虫病结肠黏膜,2 0例血吸虫病并大肠癌,2 0例无血吸虫病大肠癌的c-erbB-2及DPC 4的表达。结果c-erbB-2在4组中均有一定程度的表达,但在血吸虫病肠黏膜中的表达最高(P<0.0 5)。DPC 4亦在4组中有一定程度的表达,但在正常肠黏膜的表达水平最高(P<0.0 5)。结论慢性日本血吸虫病与大肠癌之间存在一定的关系;慢性日本血吸虫病引起黏膜上皮恶变时,c-erbB-2,DPC 4表达水平的改变可能是一早期分子事件。

胃肠道间质瘤的病理与免疫组化特征:附20例报告

应用常规病理学检查和免疫组织化学对 2 0例胃肠道间质瘤 (GIST)的组织结构和相关抗原表达进行研究,并结合临床资料,对其临床表现和生物学行为进行分析。全组GIST均为成人。发生于胃 1 2例,小肠 6例,结肠 1例,直肠 1例。其中良性 7例,交界性 3例,恶性 1 0例。常见的症状为消化道出血和腹部肿块。GIST肿瘤组织学形态复杂多变,特点是梭形细胞和上皮样细胞两者按不同比例混合性或单一性地组成肿瘤的实体。免疫组织化学分析:波形蛋白阳性率为 1 0 0% ,CD1 1 79 5. 0% ,CD3 4 9 0. 0% ,SMA 2 0. 0% ,S 1 0 0 2 5. 0%。除侵犯临近组织和发生转移外,肿瘤性坏死、病理性核分裂、核分裂象大于 5个 /5 0HPF等为提示恶性GIST的指标,肿瘤大小、细胞密集程度及细胞的多形性亦可作为良恶性判断的参考指标。

Twist对胃癌细胞系MKN28迁移和侵袭能力的影响

目的:研究Twist基因对人胃癌细胞株MKN28迁移和侵袭能力的影响。方法:利用脂质体介导转染技术和遗传霉素筛选得到稳定高表达的Twist蛋白的细胞克隆Twist+-MKN28;采用Western免疫印迹检测细胞中Twist,上皮细胞钙黏蛋白(ecadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达;用基质胶侵袭小室检测细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:阳性质粒组Twist+-MKN28细胞的Twist蛋白表达强于空白质粒组PcDNA3.1-MKN28和未转染组MKN28;Twist+-MKN28组细胞中ecadherin蛋白减少,而vimentin蛋白表达上调;Twist+-MKN28组细胞迁移、侵袭能力明显增强。结论:Twist基因可能通过上皮-间质转型促进胃癌细胞的迁移和侵袭。