CD34的分子生物学研究进展

Civin等和Tindle等先后在1984年和1985年用人髓系细胞系KG—1a和KG—1制备了单克隆抗体(单抗)My10和BI.3C5。这两种单抗能与大多数骨髓来源的干、祖细胞,急性髓系和淋巴系白血病不成熟细胞以及血管内皮细胞上所表达的一种105—120kD膜蛋白特异结合。这种膜蛋白的表达与细胞分化阶段有关,而与系别(lineage)无关,1986年第三届国际人类白细胞分化抗原协作组会议将其命名为CD34。通过CD34对造血细胞进行分选及对CD34^+细胞的性能研究,已获可喜成果。然而CD34在有关细胞增殖、分化过程中起何作用。

一种新的造血干细胞增殖刺激因子——FLT3/FLK2配基

酪氨酸激酶受体的配基,大多可在造血系统中发挥作用,如集落刺激因子-1(CSF—1)和c—fms的配基调节单核吞噬细胞的增殖与分化;c-kit的配基和干细胞因子(SCF)对早期造血干、祖细胞增殖有刺激作用。最近,利用FLT3/FLK2胞外区做探针,筛选P7B—0.3A4细胞株构建的cDNA文库,获得FLT3/FLK2配基,经序列分析表明为一种全新的因子,但与CSF—1、SCF有一定同源性。

人胎肝中一种35kD成分的造血调控研究

３－５月胎龄人肝脏造血异常活跃。其中造血干细胞约有３０－４０％处于细胞周期Ｓ期，远高于成年骨髓中约１０％的比例。胎肝中存在活性很高血的造血干细胞增殖刺激因子可能是这一活跃功能的分子基础。基于这种事实，本文用小鼠ＣＦＵ－Ｓ“自杀”率对这种活性进行了检测。经过多步分离纯化，获得一分子量约３５ｋＤ的单一活性组分，定名为ＦＬＳ－４。ＦＬＳ－４作用于脐带血ＣＤ３４细胞，使其＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率提高近１倍。

FLT3／FLK2：酪氨酸激酶受体家族新成员

属于Ⅲ类酪氨酸激酶受体家族成员的ＦＬＴ３／ＦＬＫ２已分别在人和小鼠得到克隆和表达。该受体在造血早期干祖细胞上表达较丰富，在其他组织也见有表达。小鼠ＦＬＴ３／ＦＬＫ２ｃＤＮＡ长３４５３ｂｐ，编码９９０ａａ的多肽。人与小鼠ＦＬＴ３／ＦＬＫ２的蛋白质序列有８６％同源。

人胎肝造血干细胞增殖刺激物的分离及鉴定

经过超滤、ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００和Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２ＨＲ多步分离纯化，从人胎肝细胞原代培养上清中分离到一分子量为３５ｋＤ的单一活性组分，具有造血干细胞增殖刺激活性，定义为ＦＬＳ－４。ＦＬＳ－４可能是一种新型造血干细胞增殖刺激因子，与具有这类活性的ＩＬ－３、ＩＬ－６、ＧＭ－ＣＳＦ、ＦＬＴ３配基和ＳＣＦ等在理化特性或生物学性质上均有所差异，在胎肝造血活跃时期，是启动早期造血干细胞从Ｇ＿０期进入Ｓ期的主要候选活性物质。

Ubiquitin及其功能的研究进展

Ubiquitin是广泛存在于真核细胞的热稳定多肽,由76个氨基酸残基组成。Ubiquitin在进化上显示出高度保守性。从酵母、植物到哺乳动物,仅有3个氨基酸残基不同。它在介导细胞内蛋白质降解、转录的调节以及应激反应中发挥重要作用。文中主要对近年来在ubiquitin结构、基因及其功能方面的研究进展进行综述。

大鼠严重体表烫伤后骨骼肌蛋白酶作用研究

为探讨严重烧伤早期负氮平衡发生机制,利用包括一侧后肢的37％大鼠体表面积全皮层烫伤模型,观察受伤肢体与未伤肢体比目鱼肌蛋白分解率的变化及相应肌肉几种蛋白水解酶可溶性部分活性改变。同时观察了胰岛素和β-羟基丁酸钠(β-HOBNa)对这些蛋白酶的效应。 烧伤后第3天结果表明,烫伤肢体比目鱼肌蛋白分解率及蛋白酶可溶性部份活性显著升高;胰岛素有降低组织蛋白酶活性的作用;β-HOBNa无此效应。 上述结果提示:严重体表烧伤早期受伤部位肌肉蛋白分解加快乃局部组织蛋白酶活性上升所为。胰岛素的节氮作用可能与抑制了这类蛋白酶的活性有关。

GM-CSF对受辐射KG-1细胞的增值及细胞周期的影响

以临床上常用的细胞因子GM-CSF刺激受辐射的人髓性白血病细胞株KG－1，观察细胞的增殖情况及周期变化。结果显示；GM－CSF刺激受辐射KG－1细胞的增殖；并且能促进细胞跳出GO／G1阻滞，对S期似有促进作用及增加G2／M期。对未受照射的KG－1细胞，GM－CSF刺激效应不如受照射细胞。

信号转导和转录激活子5信号转导途径对受辐射KG-1细胞周期的调控作用

探讨信号转导和转录激活子 ５（ＳＴＡＴＳ）信号转导途径在受辐射 ＫＧ－１细胞中对细胞 周期的调控作用。通过转染ＳＴＡＴ ５基因的显性负突变体（ＤＮ－ＳＴＡＴ ５）阻断ＪＡＫ／ＳＴＡＴ的信 号传递后， 瞬间转染 ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因及 ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１基因，观察 ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白及 ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１蛋白对 受辐射细胞周期阻滞的影响作用。转染 ＤＮ－ＳＴＳＡＴ５基因的受辐射 ＫＧ－１细胞即使用粒－巨噬 细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ） 刺激亦不能跳出 Ｇ１期阻滞； 瞬间转染 ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因及 ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１基因分别能促进受辐射细胞跳出 Ｇ１期和 Ｇ２期阻滞。 ＧＭ－ＣＳＦ所激活的 ＪＡＫ／ＳＴＡＴ 信 号转导途径通过促进周期蛋白 ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及 ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１的表达而对受辐射细胞周期进行调控。

ras-raf信号转导途径对受辐射细胞G_1期阻滞的调控作用

目的 探讨ras raf信号转导途径在受辐射KG 1细胞中对周期的调控作用方式。方法 通过转染DN ras阻断GM CSF的信号传递后 ,瞬间转染cyclinD1,观察cyclinD1对受辐射细胞周期阻滞的影响作用。结果 转染DN ras的受辐射KG 1细胞即使用GM CSF刺激亦不能跳出G1期阻滞 ;瞬间转染cyclinD1能促进受辐射细胞跳出周期阻滞。 结论 ras raf信号转导途径通过促进周期蛋白cyclinD1的表达而对受辐射细胞周期进行调控。