miRNA在肝脏脂代谢和脂代谢紊乱性疾病中的作用

肝脏是调控机体脂代谢的主要器官之一,生物体内的脂代谢紊乱会导致多种代谢性疾病的发生,比如脂肪肝、肥胖和高脂血症等。MicroRNA(miRNA)是近年来发现的一类内源性非编码单链小分子RNA,能通过碱基互补配对在转录后水平调控各种生物过程中的基因表达。越来越多的研究发现肝脏脂质代谢紊乱往往伴随着miRNA的异常表达,一些miRNA已被证实为脂质代谢的调节因子。深入了解和研究mi RNA在肝脏脂代谢和代谢紊乱性疾病中的作用和机制,对于寻找治疗代谢性疾病的有效靶点以及预防方法具有现实意义。对调节脂代谢和代谢紊乱性疾病的一些关键miRNA的最新研究进展进行综述,主要关注miRNA在调控高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白代谢中的作用。

抑制miR-9通过上调FoxG1改善颞叶癫痫中Wnt/β-catenin通路异常导致的学习记忆障碍

目的探究Wnt/β-catenin通路在小鼠颞叶癫痫疾病中发生和发展的表达变化及抑制miR-9的表达通过上调FoxG1改善该通路异常导致的学习记忆障碍的分子机制。方法取健康C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=3)和实验组(n=15),腹腔注射海人藻酸造癫痫模型,在癫痫持续状态发作(SE)1 h后终止,分别造模于1、7、14、30、60 d,观察癫痫反应并记录分级;实时荧光定量PCR检测海人藻酸诱导颞叶癫痫不同时间点小鼠海马组织中FoxG1、Wnt/β-catenin的表达水平;利用miRNA海绵技术将miR-9 sponge包装进腺相关病毒内(AAV-CamkⅡ-miR-9-sponge-EGFP)并注射到小鼠海马DG区,颞叶癫痫造模后记录分级并检测FoxG1、Wnt/β-catenin的表达情况;将AAV-CamkⅡ-miR-9-sponge-EGFP注射到小鼠海马DG区,颞叶癫痫造模后水迷宫和条件恐惧记忆检测小鼠的记忆情况。结果Wnt/β-catenin在不同时间点颞叶癫痫模型中较对照组表达下调,在14 d达到低峰值;FoxG1在不同时间点颞叶癫痫模型中表达情况与Wnt/β-catenin的表达呈正相关;抑制miR-9通过上调FoxG1改善了癫痫模型中Wnt/β-catenin通路异常从而改善了癫痫小鼠的学习记忆功能障碍。结论抑制miR-9的表达可通过上调FoxG1的表达,改善癫痫模型中Wnt/β-catenin通路异常,改善小鼠的学习记忆功能障碍,有希望成为颞叶癫痫治疗的潜在靶点。

不同高温对HepA细胞的杀伤作用

目的 :研究不同温度对肿瘤细胞的杀伤作用。方法 :将肝癌腹水型瘤株HepA细胞分为 37℃、4 0℃、4 5℃和 5 0℃ 4个温度组 ,每组又分为 15min、30min、1h和 2h 4个时间亚组。经相应的温度和时间处理后 ,以MTT比色法检测细胞活性。结果 :不同温度对HepA细胞的杀伤作用有所不同。在一定的温度下 ,伴随作用时间的延长 ,细胞死亡率也随之增加。结论 :随着温度的增高和作用时间的延长 ,其对HepA细胞的杀伤作用逐渐增强。4 0℃作用较长时间后 。

马桑内酯致痫大鼠海马IL-2免疫反应性的变化

目的 :探求细胞因子中的白细胞介素 2 (Interleukin 2 ,IL 2 )与癫痫发病之间的关系。方法 :将Wistar大鼠分成三组 ,第一组侧脑室注入马桑内酯 (CoriariLactone ,CL) 2 μL ,第二组注入等量的生理盐水 ,第三组不做任何处理。然后运用免疫组织化学方法 ,对大鼠海马IL 2的免疫反应性进行分析 ;同时对实验中大鼠的行为及脑电图 (eletroencepalograph ,EEG)进行观察和记录。结果 :第一组大鼠侧脑室注射CL过程中即诱发癫痫 ,且测到痫性脑电图 ,第二组、第三组无癫痫症状且未记录到痫性脑电图 ;第一组大鼠海马IL 2免疫反应性较第二组及第三组显著增强 (P <0 .0 1) ,表现在其海马CA1、CA2 、CA3 区细胞数目增多 ,突起及其分支增多 ,着色明显加深 ;而第二、三组之间无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论 :IL 2参与癫痫的发病过程 ,二者之间存在着一定的联系。

阿片成瘾中的神经免疫机制

综述小胶质细胞参与阿片类物质成瘾行为的细胞和分子机制,以及神经免疫抑制剂防治阿片成瘾的研究进展。阿片类物质成瘾是严重的医学和社会问题。目前针对阿片成瘾的研究主要集中在神经元,戒毒药物也主要针对阿片受体,然而其效果有限。神经元不是神经通路的唯一组分,神经小胶质细胞占中枢神经系统细胞总数的10%~15%,然而其作用和功能一度被忽视。阿片能激活Toll样受体4(TLR4),活化小胶质细胞,分泌大量炎症因子,从而调节奖赏信号通路,增加神经元兴奋性,参与成瘾行为的形成和表现。研究调节性神经免疫因子以及它们所造成神经炎症反应,将为理解阿片所造成的大脑功能改变和成瘾行为提供新的思路。

热疗后Hela细胞微丝和形态改变关系的研究

目的:用Hela细胞作模型,研究热疗后肿瘤细胞的微丝变化与其形态学上改变的关系。方法:用不同温度(37℃、40℃、43℃和45℃)经不同时间(1h和2h)水浴处理培养的Hela细胞后,倒置显微镜下观察其形态变化,并用考马斯亮蓝R250显示其微丝。结果:37℃和40℃处理后Hela细胞形态和微丝分布均正常;43℃、2h处理后开始有一定程度的形态改变,微丝分布较散乱,变短;45℃处理后有明显形态变化,微丝大多完全解聚成球状,分布极为紊乱。结论:高温引起的Hela细胞微丝的解聚可导致细胞的形态改变,两者之间有着极为密切的联系。

CD11b/DNA双参数流式细胞术检测HL-60细胞分化的细胞周期

目的采用双参数流式细胞术研究全反式维甲酸(alltransretinoidacid,ATRA)诱导人类急性早幼粒白血病细胞HL-60细胞分化的细胞周期。方法HL-60细胞经分化诱导剂ATRA(终浓度为1μmol/L)诱导不同时间点后,利用CD11b/DNA双参数流式细胞术同时检测分化细胞表面抗原CD11b的表达及分化细胞DNA含量。结果HL-60细胞经ATRA诱导后,细胞表面分化抗原CD11b表达明显升高,细胞阻滞于G0/G1期,且CD11b阳性细胞主要位于G0/G1期。结论CD11b/DNA双参数流式细胞术能简便,快速,直观地检测细胞分化的细胞周期。

腹外侧视前区微量注射组胺对大鼠睡眠-觉醒周期的影响

目的 研究组胺作用于腹外侧视前区对大鼠睡眠-觉醒周期的影响。方法 通过脑立体定位、腹外侧视前区微量注射组胺,脑电图仪记录及分析睡眠、觉醒时相。结果 微量注射50μmol/L组胺无明显影响,而100μmol/L组胺显著减少大鼠睡眠,增加觉醒。结论 组胺在腹外侧视前区对大鼠睡眠-觉醒周期发挥重要的调节作用,具有明显的促觉醒作用。

梓醇对高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝的干预作用

目的通过高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型,探讨梓醇对NAFLD的干预作用及可能的作用机制。方法选用SPF级C57BL/6J雄性小鼠60只,随机分为正常对照组(低脂饲料),模型组(高脂饲料),梓醇低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)3个剂量组和阳性对照阿托伐他汀钙组(30 mg/kg)。采用高脂饮食建立小鼠NAFLD模型,同时灌胃给予梓醇或阿托伐他汀钙,各组均连续灌胃18周,每周称量体重1次。实验结束后测定各组小鼠体重、肝重,血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;油红O和HE染色法观察肝组织脂质蓄积和脂肪变性;ELISA法检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的含量;Western-blot法检测肝组织中核因子κB(NF-κB)p65、核因子抑制蛋白α(IκBα)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关x蛋白(Bax)和半胱天冬酶-3蛋白表达水平。结果与模型组相比,梓醇各组处理后小鼠体重(P均=0.001)、肝指数(P=0.083,P=0.001,P=0.001)、ALT(P=0.004,P=0.001,P=0.001)和AST(P=0.008,P=0.001,P=0.001)含量显著降低,中、高剂量组血清TC(P=0.005,P=0.001)、TG(P均=0.001)、LDL-C(P均=0.001)显著降低,高剂量组HDL-C(P=0.009)含量显著升高;病理结果显示NAFLD小鼠肝脂肪变性和损伤程度明显减轻;ELISA结果显示梓醇显著抑制NAFLD小鼠血清炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6的释放(P均=0.001);Western-blot结果显示梓醇干预后,NAFLD小鼠肝组织中NF-κB p65(P=0.014,P=0.001,P=0.001)和半胱天冬酶-3(P均=0.001)蛋白表达水平显著降低,IκBα蛋白表达水平显著增加(P=0.028,P=0.001,P=0.001),高剂量组中Bcl-2/Bax比值显著升高(P=0.003)。结论梓醇可降低高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠体重、肝指数和肝脏脂质的蓄积程度及调节血脂紊乱,并能抑制炎症因子的释放和肝细胞凋亡,从而对高脂饮食诱导的NAFLD发挥预防作用。