局部应用瘦素对大鼠烫伤创面愈合的实验研究

目的建立Wister大鼠的深Ⅱ°烫伤创面模型,外用瘦素来观察和研究瘦素在Waster大鼠烫伤创面愈合中的作用和意义,探讨瘦素在创伤修复过程中的作用及其机制。方法选用清洁级Wistar大鼠18只,建立深Ⅱ度烫伤模型,将创面分为实验组（创面涂400 ng/ml的瘦素溶液,用PBS释稀）和对照组（外涂PBS）。观察创面愈合时间;在烫伤后第3,7,11,15,19天5个时相点测量创面的上皮化率;于伤后第7、14和21天用手术刀切取各组的伤口及周边皮肤,做HE及免疫组化染色（PCNA）,以观察创面的愈合时间和组织形态以及角质形成细胞在烫伤创面愈合过程增殖和迁移情况。结果实验组创面愈合时间快于对照组2~3 d左右,实验组愈合天数与对照组相比,差异具有显著性（P〈0.05）。在伤后7、14和21 d创缘组织HE和PCNA染色见实验组创周表皮反应性增生快,表皮层明显厚于对照组,实验组创面上皮化过程短于对照组。实验组PCNA表达与对照组在7 d和14 d时有明显差异（P〈0.05）,在21 d时没有显著差别（P〉0.05）。结论局部外用瘦素能提高深Ⅱ烫伤创面的愈合率,加快创面愈合时间,瘦素能加快深Ⅱ烫伤创面的愈合。

瘦素经JAK2/STAT3信号传导对角质形成细胞增殖的作用

目的:探讨瘦素对角质形成细胞增殖的作用及其创面愈合中的可能作用及机制。方法:原代培养人表皮角质形成细胞并鉴定。分别观察瘦素对角质形成细胞的时间梯度作用、浓度梯度作用、JAK抑制剂AG490对瘦素促增殖作用的影响,培养24h后收集细胞行MTT检测、CK17及CK19免疫细胞化学染色。结果:24、48、72h后,瘦素作用组均较对照组有明显的细胞增殖。在0～400ng/mL浓度范围,瘦素干预组细胞均较对照组MTT检测OD值升高,有明显的细胞增殖;但在800ng/mL浓度,瘦素作用组较对照组细胞数更少。CK17及CK19免疫细胞化学染色,瘦素组较对照组着色更深、着色细胞数更多;而AG490+瘦素组较瘦素组着色更浅、着色细胞数更少。结论:100ng/mL瘦素对角质形成细胞有时间依赖性促增殖作用。0～400ng/mL浓度范围内,瘦素对角质形成细胞有浓度依赖性促增殖作用。AG490能有效抑制瘦素对角质形成细胞的促增殖作用,提示JAK2/STAT3信号途径参与瘦素的跨膜信号传导。

下颌角截骨术大出血的解剖学分析及防治策略

目的探讨下颌角截骨术中及术后大出血的原因。方法对自1996～2006年以来98例下颌角截骨术的临床病例进行总结分析并对国内外相关文献做回顾分析,从解剖角度找出出血原因。结果下颌角截骨术出血可分为:(1)下牙槽血管出血;(2)面动脉出血;(3)咬肌出血;(4)下颌后静脉出血。结论术者熟悉颌面部解剖并且有丰富的手术经验,术前检查全面,器械准备充分,术中耐心细致,切忌动作粗暴、盲目操作,下颌角截术的大出血并发症是可以防治的。

口内入路应用直角钻打孔法截骨和摆动锯截骨矫治下颌角肥大的比较研究

目的:探索一种简单有效而且风险小的下颌角肥大矫治术。方法:对76例下颌角肥大患者随机分为两组,均采用口内入路。A组37例,全部应用传统的摆动锯进行下颌角截骨术;B组39例,全部应用直角钻打孔法截骨,即在下颌角的预设截骨线上打一排全层穿通的小孔,然后用骨凿凿下要切除的下颌骨。结果:B组患者术中及术后出血明显少于A组,B组术中未有1例损伤知名血管,而A组有3例分别损伤了面动脉和下颌后静脉,术后B组较A组患者肿胀轻,恢复快。随访6个月～1年,两组患者下颌角间距明显变小,外形满意,两组患者满意率没有明显差别。结论:直角钻打孔法截骨和摆动锯截骨矫治下颌角肥大都能达到满意效果,但前者比后者更安全、并发症更少、风险更小。

V-Y微创法阴茎延长术56例报告

目的探索一种并发症少并且恢复快的阴茎延长手术。方法对56例先天性阴茎短小发育症患者行微创法阴茎延长术,在局部麻醉下用V-Y切口,矢状位分离,精确离断阴茎悬韧带,不损伤阴茎根部浅筋膜中的静脉和阴茎背浅、深静脉。结果 56例患者手术均成功,术后阴茎延长2~5 cm,平均延长3.2 cm。其中53例伤口一期愈合,3例因术后皮下少量脂肪液化而使伤口延迟愈合;术后阴茎、包皮水肿轻,1周内水肿基本消退,无一例发生皮瓣坏死、感染及血肿。随访3个月~2年,切口瘢痕不明显,阴茎无回缩,患者术后性生活明显改善,对手术效果均表示满意。结论 V-Y微创法阴茎延长术具有创伤小、出血少、操作简单、术后并发症少、恢复快等优点,是较简便理想的阴茎延长术式。

体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞干细胞特性观察

目的：观察体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞的干细胞特性。方法利用无血清培养基培养人恶性黑色素瘤A375细胞系，获得黑色素瘤球体细胞（球体组）和普通贴壁细胞（贴壁组）。采用Transwell小室检测两组细胞迁移能力。采用免疫荧光法检测两组细胞中的CD20、CD133。取BALB／c小鼠16只，分实验组和对照组（各8只），于小鼠肩胛骨处皮下分别注射球体组、贴壁组细胞各1 mL（104个细胞），观察并比较两组细胞致瘤能力。6周后处死小鼠，取瘤。结果 A375细胞接种于无血清培养基后，可见小的类圆形悬浮细胞球形成并逐渐变大，球内细胞连接紧密，折光性好。球体组细胞迁移能力及细胞中CD20、CD133表达强度均高于贴壁组。注射细胞6周后，实验组小鼠均长出较大肿瘤，对照组小鼠均未见肿瘤生长。取实验组小鼠的肿瘤组织行HE染色，病理诊断为恶性黑色素瘤。结论体外培养的人恶性黑色素瘤球体细胞具有干细胞特性，迁移能力和致瘤能力强，高表达免疫标记CD20、CD133，恶性黑色素瘤存在肿瘤干细胞。

基于人脂肪组织获取基因构建pET28a-leptin(瘦素)重组子

背景:新近的一些研究认为,采用体外重组瘦素替代疗法对遗传性肥胖、难愈性创面和内源性瘦素缺乏应是行之有效的方法。目的:取人脂肪组织获取瘦素基因,构建pET28a-leptin重组子。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2004-06/2007-12在江西省医学科学研究所抗肿瘤室完成。材料:取自22岁汉族女性行重睑手术时皮下脂肪组织,冻存于液氮中备用,供者知情同意。方法:取人脂肪组织,反转录-聚合酶链反应得到瘦素基因后,通过DNA重组技术克隆至pMD18T载体与pET28a原核表达载体,EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切及测序鉴定。主要观察指标:①cDNA扩增结果。②重组质粒鉴定。③DNA测序结果。结果:扩增得到520bp目的基因;所构建重组瘦素原核表达载体pET28a-leptin经双酶切电泳见520bp目的条带,DNA测序与相应基因序列同源性达100%。结论:通过DNA重组至pET28a原核表达载体,经EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切及测序鉴定成功构建pET28a-leptin重组子。

鼻外侧超薄皮瓣修复下睑软组织缺损的临床应用

目的探讨下睑软组织缺损修复的新方法,评价鼻外侧超薄皮瓣的临床应用价值。方法对22例患者应用鼻外侧超薄皮瓣转移修复同侧下睑组织缺损。其中下睑外翻10例,下睑瘢痕畸形8例,下睑黑毛痣4例。结果22例转移皮瓣全部存活,转移皮瓣面积1.0 cm×3.0 cm^2.2 cm×6.0 cm,最大长宽比例为4.5∶1。术后随访6个月~2年,转移皮肤质地、颜色与下睑皮肤相仿,外观与对侧基本对称,供区瘢痕隐蔽,形态恢复满意。结论鼻外侧超薄皮瓣是下睑软组织缺损修复重建的理想方法之一。

CT三维重建和计算机测量技术在下颌骨畸形整复中的临床应用

目的:测量与下颌骨截骨线相关的的影像学指标,为手术提供解剖学依据。方法:对11例下颌骨畸形整复患者进行CT扫描得到颌面数据,利用计算机辅助设计相关软件重建三维模型,可以清晰地显示下颌骨畸形类型,进行整复前精确的诊断;并在三维模型上测量第一磨牙、第二磨牙至下颌骨下缘的垂直距离,第二磨牙至下颌角点的距离,根据差值标记截骨线,可以实现对下颌骨畸形的精确化修复。结果:利用CT三维重建技术得到的头颅三维模型进行术前设计可以提高手术的准确性,缩短手术时间,术后患者颌面外形均有不同程度改善,达到术前设计的预期效果。结论:CT三维重建与计算机测量技术对下颌骨畸形有重要的临床应用价值。

氟碳保存角膜的实验研究

目的 探讨氟碳在角膜中期保存中的应用价值。方法 将 6 0只新西兰兔角膜随机分为 3组 :( 1)空白对照组 ;( 2 )通氧组 ;( 3)实验组。每组角膜各 4 0片。空白对照组以Dexsol中期保存液常规保存 ;通氧组在常规保存同时持续通氧保存 ;实验组在通氧组基础上加入等量氟碳液保存。 3组保存 7d ,14d后观察角膜透明度和厚度 ,行组织细胞化学染色 (各组取 15片角膜 ) ,扫描电镜观察 (各组取 2片角膜 )及细菌学检查。结果 角膜透明度和厚度 :空白对照组、通氧组角膜外观灰白略显混浊 ,水肿、增厚 ;实验组角膜仅轻度水肿、增厚 ,外观仍透明。角膜内皮细胞密度及存活率 :实验组与空白对照组、通氧组相比较 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,实验组的内皮细胞形态活性有明显改善。结论 氟碳可有效改善角膜保存液的效果 。

国人瘦素基因原核重组表达载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定瘦素基因原核重组表达载体。方法以RT-PCR法自人脂肪组织制备目的基因,应用DNA重组技术,克隆至pMD18T载体与pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌DH5α,EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切及测序鉴定。结果扩增得到520bp目的基因并构建原核重组表达载体pGEX-4T-1-leptin。双酶切电泳见520bp目的条带,测序结果与GenBank收录序列一致。结论成功构建原核表达载体pGEX-4T-1-leptin,为leptin功能研究及进一步的临床应用提供了条件。

细胞辅助脂肪移植在颜面软组织凹陷畸形中的临床应用进展

迄今为止,颜面部软组织凹陷畸形的填充治疗方法已有相当长的发展史,各种方法各有利弊。其中,作为填充材料之一的自体脂肪颗粒因来源丰富,取材易,无瘢痕、无排斥反应[1]等优点,已成为治疗颜面部软组织凹陷畸形中最热门的研究领域之一[2]。但是,自体脂肪颗粒移植后,脂肪细胞的存活率与增殖率低,这仍然是困扰国内外整形美容外科专家学者的两个主要问题[3]。

构建重组人pET-32a-瘦素高效的表达载体

背景:瘦素的功能是作为脂肪细胞体脂量的信号来认识的,作为体内的能量平衡信号反馈到下丘脑,与其中各部位神经元的受体结合后参与调节进食、饮水、能量代谢。目的:构建原核重组表达载体pET-32a-瘦素并检测其在大肠杆菌BL21中的高效表达。方法:取人脂肪组织,RT-PCR法制备瘦素目的基因,采用DNA重组技术将其克隆至pMD18T与pET-32a原核表达载体,双酶切及测序鉴定,转化大肠杆菌BL21株诱导其表达,SDS-PAGE电泳分离鉴定,表达产物变性复性后,间接酶联免疫吸附法检测抗原反应原性。结果与结论:实验成功扩增出520bp的瘦素目的基因并构建了原核重组表达载体pET-32a-瘦素;测序结果与GenBank收录序列相一致;目的蛋白pET-32a-瘦素呈极高效表达,占总蛋白的50%以上;变性复性后抗原反应原性较复性前明显提高(P<0.01)。结果证实,实验成功构建原核重组高效表达的载体pET-32a-瘦素,并提高其抗原反应原性。

恶性黑色素瘤的基因治疗新进展

恶性黑色素瘤是来源于黑色素细胞的高度恶性肿瘤，多发生于皮肤，为人类第五大常见肿瘤。恶性黑色素瘤发展迅速、转移早而广泛、预后差、病死率高，临床上采用的手术治疗、化学治疗、放射治疗，虽能取得一定疗效，但很难彻底治愈。近年来，各种癌基因及抑癌基因相继发现，分子生物学各种手段也日益发展与完善，使得基因治疗成为时下治疗肿瘤的热点。恶性黑色素瘤的基因治疗也逐渐从单纯的基础研究过渡到临床应用。本文对恶性黑色素瘤的基因治疗作一综述。

面下部轮廓整形术的术式选择

目的:探讨面下部轮廓整形术的手术方法。方法:对95例要求手术重塑面下部轮廓患者进行分类。根据分类,采用口内入路,以双侧下颌角整形术为主,结合面部吸脂术、颊脂垫部分摘除术、部分咬肌去除术、颏成形术等对患者下面部轮廓进行综合整形。结果:所有患者面下部轮廓均得到明显改善,术后随访6个月～1年,效果满意。其中术中大出血2例,术后血肿2例,一侧颏神经损伤2例,口角拉伤3例。结论:以双侧下颌角整形术为主,结合其他手术方式重塑面下部轮廓,临床效果满意。

维生素D致肥胖大鼠模型的实验研究 (英文)

目的:提供一种简易、经济、快速、便捷地诱发肥胖模型的方法。 方法:将雄性SD大鼠30只随机分为实验组和对照组,每组15只。实验组一次性腹腔注射维生素D300 U/g,对照组同时注射等量生理盐水。存活30 d后测Lee’s指数、脂肪系数、600倍光镜每视野脂肪细胞个数及血清瘦素水平。 结果:实验组Lee’s指数及脂肪系数(分别为313.7±6.9,0.26±0.05)明显高于对照组(分别为302.6±4.2,0.13±0.03)(t=5.352,9.455,P<0.05);实验组每视野脂肪细胞个数、血清瘦素水平[实验组:(31.2±17.6)μg/L,对照组:(7.5±6.3)μg/L]明显低于对照组(t=5.481,4.912,P<0.05)。 结论:一次性腹腔大剂量注射维生素D能方便快捷地诱发肥胖。

CT三维重建技术在颌面整形中的应用

整形外科是一门精细的学科,尤其面部有关美容及功能的颌面手术更是整形外科的难点和重点。除术前精确的诊断及合理的治疗方案外,还需借助于其他的辅助手段以确保手术获得最佳的效果。1983年,Hemmy首先将CT三维重建技术应用于颌面畸形诊断中，随后近20年来随着科学计算机的发展，CT三维重建技术在整形外科的术前手术方案设计、手术操作过程模拟及术后效果模拟等方面发挥着重要的角色。

带蒂髂腹部真皮下血管网皮瓣修复手前臂软组织缺损

目的:探讨带蒂髂腹部真皮下血管网皮瓣修复手前臂软组织缺损的应用价值。方法:2008年8月至2011年1月,对16例手前臂软组织缺损的患者应用带蒂髂腹部真皮下血管网皮瓣进行修复,皮瓣面积9.0cm×5.0cm～15.0cm×20.0cm。供瓣区直接缝合。术后7～18天断蒂。结果:16例皮瓣全部成活,1例皮瓣远端起水疱,表皮坏死脱落,经换药自行愈合。10例获得3～10个月随访,皮瓣外形美观,无继发挛缩,受区外形和患肢功能恢复较满意。结论:带蒂髂腹部真皮下血管网皮瓣血供可靠,应用形式灵活多样,是修复手前臂软组织缺损的一种较理想选择。

隆乳假体置入不同层次的优缺点

人类关于女性乳房的意识尽管受到种族、地域、文化传统和价值观的影响,但作为美的象征,总是以丰满、匀称的乳房为美。丰满匀称的半球形乳房是女性美的一大特征,感观上让女性更性美,人际交往中让女性更加自信、更容易得到关爱。

小腿筋膜皮瓣及小腿内侧逆行轴形皮瓣在下肢创伤修复时的选择及评估

目的:探讨两种小腿皮瓣(小腿筋膜皮瓣及小腿内侧逆行轴形皮瓣)在下肢创伤后皮肤软组织缺损修复时的选择及评估。方法:①在小腿设计局部随意筋膜皮瓣,皮瓣大小范围4cm×6cm～7cm×15cm,转移修复同侧或对侧小腿皮肤软组织缺损并骨外露;②以胫后动脉内踝上发出的皮动脉穿支为轴,在小腿内侧设计逆行轴形皮瓣,皮瓣大小范围4cm×12cm～6cm×15cm,转移修复同侧或对侧足底、踝部、小腿皮肤软组织缺损并肌腱或骨外露。结果:临床共选用11个皮瓣,其中6例为筋膜皮瓣,5例为小腿内侧逆行轴形皮瓣,修复同侧或对侧下肢皮肤软组织缺损并肌腱或骨外露。11例皮瓣术后均成活良好,创面修复效果良好,随访6～12个月,伤肢外形及功能恢复满意。结论:小腿筋膜皮瓣,设计灵活,切取便利,不损伤主要血管,血供丰富,尤其在局部主要血管受损时是修复下肢严重创伤的有效方法之一。小腿内侧逆行轴形皮瓣可切取皮瓣距离长,面积大,血供恒定可靠,成活率高,是修复足底、踝部、小腿严重创伤的最佳选择。此两种皮瓣的应用应针对小腿创面的部位、面积及其创伤特点进行合适的选择,可达到满意的修复效果。