Pax6基因表达对过氧化氢诱导骨髓间充质干细胞衰老的影响

背景:多种眼科疾病的发生发展与过度氧化应激密切相关,抑制氧化应激反应可能会产生预防和治疗效果。目的:探究Pax6基因表达对过氧化氢诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)衰老的影响。方法:复苏BM-MSCs、Pax6/BM-MSCs、shPax6/BM-MSCs,经过氧化氢处理24 h后进行β-半乳糖苷酶染色,流式细胞术检测增殖指标Ki67的表达和细胞凋亡情况,RT-PCR检测衰老相关分子Wnt7a、p21、p53的表达。结果与结论:①经过氧化氢处理后,3组细胞显示衰老表型,β-半乳糖苷酶染色阳性;与BM-MSCs组相比,Pax6/BM-MSCs组内阳性细胞表达较少,shPax6/BM-MSCs组内阳性细胞表达较多,差异有显著性意义(P<0.05);②流式细胞术结果显示:与BM-MSCs组相比,Pax6/BM-MSCs组细胞内Ki67阳性表达增加,细胞凋亡水平降低,shPax6/BM-MSCs组细胞内Ki67阳性表达降低,细胞凋亡水平升高,差异有显著性意义(P<0.05);③RT-PCR检测结果显示:与BM-MSCs组相比,Pax6/BM-MSCs组的Wnt7a、p53、p21表达量降低,shPax6/BM-MSCs组的Wnt7a、p53、p21表达量增加,差异有显著性意义(P<0.05);④结果表明:Pax6过表达能够对抗过氧化氢诱导的BM-MSCs衰老进程,可能与Wnt信号通路有关。