PCK1对小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的作用及其机制

目的:探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)在小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及迁移中的作用及机制。方法:用30μg/L血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导小鼠VSMCs增殖和迁移,将小鼠VSMCs分为溶剂对照(vehicle)组和PDGF-BB组,采用Western blot和免疫荧光染色检测PCK1表达水平的变化。使用小鼠Pck1 siRNA(siPck1)转染小鼠VSMCs沉默PCK1表达,将VSMCs分为vehicle组、siPck1+vehicle组、PDGF-BB组和siPck1+PDGF-BB组,采用免疫荧光染色检测细胞增殖能力,CCK-8法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,透射电镜观察细胞线粒体动力学变化。发动蛋白相关蛋白1(Drp1)基因过表达慢病毒(lenti-Drp1)转染VSMCs使DRP1过表达,将小鼠VSMCs分为PDGF-BB组、siPck1+PDGF-BB组、lenti-Drp1+PDGF-BB组和lenti-Drp1+siPck1+PDGF-BB组,再次检测上述指标。结果:PDGF-BB使VSMCs中PCK1和DRP1表达增加,细胞活力升高,Ki-67阳性细胞率增加,划痕愈合率升高,线粒体分裂增加;沉默PCK1表达后以上过程均受到抑制。过表达DRP1后,沉默PCK1表达对VSMCs细胞活力、Ki-67阳性细胞率、划痕愈合率和线粒体分裂的抑制作用明显削弱。结论:PCK1通过调控DRP1表达促进小鼠VSMCs线粒体分裂、细胞增殖和迁移。

T-SPOT.TB在具有高危因素的疑似肺结核病例中的辅助诊断价值及影响因素分析

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-cell spot of tuberculosis test,T-SPOT.TB)在具有高危因素的疑似肺结核病例中的辅助诊断价值及影响因素。方法回顾性分析2017年10月至2020年10月我院住院的疑似肺结核病例454例,据是否合并高危因素,分为高危组和非高危组,分析T-SPOT.TB在不同组中的诊断价值,并应用Logistic回归方法分析T-SPOT.TB产生假阴性和假阳性结果的影响因素。结果T-SPOT.TB在高危组及非高危组中的灵敏度分别为76.34%、90.00%,特异度分别为76.35%、82.93%,准确度分别为76.35%、85.92%,组间比较显示灵敏度及准确度差异有统计学意义(P=0.014;P=0.010),而两组之间特异度差异无统计学意义(P=0.183)。Logistic回归分析显示年龄≥65岁(P=0.019)为假阴性的危险因素,性别(男性)(P=0.001)、恶性肿瘤(P<0.001)为假阳性的危险因素。结论T-SPOT.TB在辅助诊断肺结核时具有较高价值,尤其在非高危组辅助诊断价值更高;在临床应用T-SPOT.TB辅助诊断肺结核时要考虑到T-SPOT.TB假阴性和假阳性的危险因素。