慢病毒载体介导的靶向沉默xrcc3基因对鼻咽癌细胞放疗增敏作用的影响

目的探讨X射线修复交叉互补蛋白3(XRCC3)对鼻咽癌细胞放疗敏感性的影响。方法利用平板克隆实验检测不同放疗剂量下鼻咽癌细胞CNE2的存活分数,并计算放疗增敏比(SER);流式细胞仪通过Annexin V/PI双染检测细胞凋亡,并用Western blot检测凋亡蛋白的表达水平;在免疫荧光染色下观察放疗前后DNA的损伤。结果沉默xrcc3基因能够降低CNE2细胞放疗后的存活分数,SER=1.232 3;提高射线引起的细胞凋亡,并增加细胞凋亡蛋白断裂带的产生;增加射线诱导的DNA双链损伤修复聚焦点的形成。结论 XRCC3可以通过降低鼻咽癌细胞放疗后DNA的损伤及细胞凋亡,从而增加鼻咽鳞癌细胞对放疗的抵抗,xrcc3可能作为一个提高鼻咽癌放疗敏感性的靶向基因。

蟾毒灵对食管癌细胞株Kyse150放疗敏感性影响的研究

目的:研究蟾毒灵对食管癌Kyse150细胞株放疗敏感性的影响。方法:使用CCK-8方法测定Kyse150细胞株中蟾毒灵的IC50值。通过克隆形成实验结果拟合L-Q曲线,求得细胞存活分数(SF2)和放疗增敏比(SER)。并利用Annexin VFITC/PI双染法和Western blot测定蟾毒灵对放射诱导食管癌细胞株Kyse150凋亡的影响。最后通过克隆形成实验检测不同剂量蟾毒灵对放疗敏感性影响的变化。结果:CCK-8检测结果显示蟾毒灵在Kyse150细胞株中的IC50值为129.1 nmol/L(95%CI:105.2-158.6)。通过克隆形成实验拟合的L-Q曲线显示蟾毒灵可显著降低放疗后细胞的克隆形成率,且蟾毒灵对Kyse150放疗增敏比(SER)=1.463。Annexin V-FITC/PI双染法和Western blot结果显示蟾毒灵可提高射线诱导的细胞凋亡,并显示蟾毒灵对食管癌细胞株Kyse150放疗增敏作用呈剂量依赖性。结论:蟾毒灵在食管癌Kyse150细胞株中具有放疗增敏作用,且该作用为剂量依赖性。