基于网络药理学研究银杏蜜环口服溶液对心脑血管保护的作用机制

目的采用网络药理学的思路和方法,研究银杏蜜环口服溶液发挥心脑血管保护作用的有效成分、作用靶点、信号通路等,阐释其作用机制。方法采用TCMSP数据库、SwissADME数据库筛选银杏蜜环口服溶液的有效成分,在Swiss Target Prediction数据库和CTD数据库进行靶点预测和收集;通过GeneCards数据库分别检索冠心病(CHD)、心绞痛(AP)和缺血性脑血管疾病(ICVD)相关靶点,将药物预测靶点和疾病靶点取交集,再将3个疾病交集靶点对比取交集获得脑心同治靶点,利用Cytoscape软件构建“成分-靶点-疾病”网络。运用String数据库,对交集靶点进行蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型构建,找出核心靶点。通过R软件对脑心同治交集靶点进行GO和KEGG富集分析。结果银杏蜜环口服溶液筛选出24个活性成分、71个成分-疾病交集靶点,可能作用的机制与PI3K-Akt信号通路等多个信号通路有关。结论本研究探讨了银杏蜜环口服溶液脑心同治的有效成分和作用机制,体现了中药多成分、多靶点、多途径的作用特点。

川芎嗪通过抑制ERK5/P70S6K/Rac1信号通路发挥抗血小板活化及血栓形成作用

目的探讨川芎嗪抗血小板活化作用及其分子机制。方法运用缺氧诱导血小板损伤模型。采用比浊法检测血小板聚集,检测血小板在纤维蛋白原上的黏附,流式细胞术检测血小板CD62p的表达,CM-H2DCFDA染色检测血小板ROS的释放,Western blotting法检测ERK5、P70S6K、Rac1的磷酸化蛋白表达量,采用体内血栓形成试验检测川芎嗪对血栓的作用。结果川芎嗪可有效抑制血小板聚集,与模型组相比差异明显(P<0.01、P<0.001);与模型组比较,川芎嗪可显著抑制血小板在纤维蛋白原上的黏附,ROS的释放(P<0.05、P<0.001);同时川芎嗪能显著抑制血小板CD62p的表达,ERK5、P70S6K、Rac1的磷酸化,抑制血栓形成(P<0.05)。结论川芎嗪可通过ERK5/P70S6K/Rac1信号通路抑制血小板聚集、黏附、释放,从而抑制血栓形成。

丹酚酸A抑制血小板及中性粒细胞活化作用

目的探究丹酚酸A(Salvianolic acid A,SAA)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)小鼠心脏的血小板募集、活化及中性粒细胞的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为:假手术组、MI模型组、SAA(5、10 mg·kg^(-1))组、替罗非班(tirofiban,0.87 mg·kg^(-1))组,尾静脉注射给药3 d。超声心动、HE染色检测小鼠心功能及梗死面积;采用IHC、FCS、ELISA、Western blot等方法探讨了SAA抑制血小板及中性粒细胞活化作用。结果与MI组相比,SAA可以改善MI小鼠的心功能及心脏病理变化;减少心肌组织中CD42c及外周血中CD62p的表达,同时不影响尾出血时间;降低ADP诱导的血小板活化,上调p-VASP/VASP比值,降低p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值;减少心肌组织中CD45、Ly6G以及CXCL1和CXCL2表达;减少心肌组织中补体成分C3aR的表达,降低C3a诱导的NE、MPO、MMP9、LF的水平。结论SAA具有通过抑制PI3K/AKT、VASP通路发挥抗血小板活化的作用,以及通过抑制C3aR及C3a的表达发挥抗中性粒细胞活化的作用。

疏血通注射液抗血小板活化作用机制研究

目的建立缺氧及氧化应激模型,探讨疏血通注射液抗血小板活化的作用机制。方法制备SD大鼠血小板悬液,建立1%O2诱导缺氧模型和500μmol/L过氧化氢诱导氧化应激模型。将血小板分为空白对照组、模型组、疏血通注射液低浓度组、疏血通注射液中浓度组、疏血通注射液高浓度组。采用比浊法检测血小板聚集;流式细胞术检测血小板CD62p的表达;蛋白免疫印迹法检测细胞外信号调节激酶5(ERK5)和p70核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)的磷酸化蛋白表达;CM-H2DCFDA染色并检测血小板活性氧(ROS)的释放,观测血小板在纤维蛋白原上的黏附情况。结果与模型组相比,疏血通注射液可显著抑制血小板聚集,抑制血小板在纤维蛋白原上的黏附以及ROS的释放。同时疏血通注射液能有效抑制血小板CD62p的表达并抑制ERK5、P70S6K的磷酸化。结论疏血通注射液可能通过ERK5/P70S6K信号通路抑制血小板聚集、黏附、释放,从而抑制血栓形成。

E-巨噬细胞极化在心肌梗死后炎症反应中的研究进展

急性心肌梗死(AMI)是全球主要的死亡和残疾原因之一。心肌梗死(心梗)引起的过度促炎反应是加剧心肌损伤和功能障碍的主要原因,因此抗炎治疗可能作为一种新的方法以缩小心梗范围,防止进一步的心脏重构和进展为心力衰竭^([1])。然而,许多抗炎干预措施在临床试验中效果不佳^([2])。因此,了解控制心脏炎症的新机制对于确定治疗缺血性心脏病的新的靶点至关重要。

血管新生在心血管疾病领域的文献计量学及可视化分析

目的使用CiteSpace软件分析近20年血管新生在心血管领域的研究热点、前沿动态和发展趋势。方法对SCI-Expanded数据库中2000~2019年血管新生在心血管领域的相关文献,通过CiteSpace进行文献可视化,对学科领域分布,作家、国家、机构之间的合作网络,关键词的共现网络以及作者、文献、期刊间的共被引网络进行分析。结果检索到相关文献6684篇,被引频次277549次。在2000~2013年间发文量快速增长,2014~2019年发文量处于稳定。学科领域主要是与周围性血管疾病、血液等学科相关。发文量较多的国家为美国、日本、德国、中国,且中国在2013~2019年发文量突发性增长。高产机构为哈佛大学、斯坦福大学等。发表和引文数最多的期刊为Circulation和Circulation Research。根据关键词和文献共引分析得到研究热点主要是祖细胞/干细胞的治疗心肌梗死等相关疾病,近5年miRNA、外泌体囊泡、炎症、巨噬细胞等与血管新生之间关系的研究突发性增长,成为该领域的研究前沿,启发人们通过研制或发现在这些方面有促进作用的相关药物,影响血管新生,从而改善心血管疾病。结论文章研究结果可为今后从事血管新生在心血管领域的研究人员快速掌握知识基础,了解该领域的热点和预测未来发展趋势提供依据。

桃叶珊瑚苷通过激活ERβ途径抑制心肌细胞凋亡

目的探讨桃叶珊瑚苷(aucubin,AU)抑制心肌细胞凋亡发挥抗心肌缺血损伤从而改善急性心肌梗死后心功能的作用与可能机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法制作小鼠急性心肌缺血(myocardial infarction,MI)模型。采用超声心动、Masson染色检测小鼠心功能及梗死面积。建立肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)/放线菌酮(cycloheximide,CHX)诱导的大鼠H9c2心肌细胞损伤模型。采用IncuCyte活细胞成像、TUNEL、Western blot等方法探讨了AU的抗心肌细胞损伤作用及其作用机制。结果研究结果表明,AU可以改善心肌梗死小鼠的心功能,降低梗死面积,减少由TNF-α/CHX诱导的心肌细胞凋亡,降低caspase-3蛋白质表达,上调Bcl2/Bax比值;同时AU可使ERβ(estrogen receptorβ,ERβ)表达升高,且雌激素受体β抑制剂可阻断AU的抗凋亡作用。结论该研究证实,AU可以通过抑制心肌细胞凋亡发挥抗心肌缺血损伤从而改善急性心肌梗死后心功能的作用,其部分作用机制与ERβ通路的激活有关。

中性粒细胞在心肌梗死中作用的文献计量学和可视化分析

目的了解中性粒细胞在心肌梗死中作用的研究现状,分析该领域的研究趋势。方法检索Web of Science核心合集数据库中2000~2020年中性粒细胞和心肌梗死的相关文献,通过CiteSpace进行整理和可视化分析,制作和分析作者合作网络图谱、机构合作网络图谱、国家合作网络图谱、关键词共现网络图谱和文献共被引图谱等。结果检索相关文献2172篇。近20年的发文量总体呈增长趋势。美国、中国、土耳其发文量较多,且发文机构主要以哈佛大学、慕尼黑大学等大学为主要力量。Circulation和J Am Coll Cardiol为发文较多的期刊。中性粒细胞胞外陷阱、炎症、中性粒细胞/淋巴细胞比值、抬高型心肌梗死等为近年的研究热点。结论文章研究结果可为今后从事心肌梗死和中性粒细胞的研究人员了解该领域的热点和预测未来发展趋势提供依据。

丹酚酸A调控C3aR的表达治疗缺血性疾病作用机制研究

目的:探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,SAA)通过调控过敏毒素C3a受体(anaphylatoxin C3a receptor,C3aR)的表达治疗缺血性疾病的作用机制。方法:构建体外血小板活化模型和中性粒细胞活化模型,采用比浊法检测血小板聚集率;流式细胞术检测血小板P选择素(P-selectin,CD62p)的表达;免疫荧光检测血小板在纤维蛋白原上的黏附;酶联免疫吸附测定法检测弹性蛋白酶(elastase,NE)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)和乳铁蛋白(lactoferrin,LF)的水平。结果:与模型组对比,不同浓度的SAA能抑制二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板聚集、黏附、释放(P<0.05),显著抑制ADP诱导的C3aR的表达(P<0.05);与模型组对比,SAA能抑制中性粒细胞中NE、MPO、MMP9、LF的水平(P<0.05);C3aR抑制剂可抑制缺氧诱导的中性粒细胞脱颗粒(P<0.05)。结论:SAA可能通过调控C3aR的表达抑制血小板活化、聚集、黏附及中性粒细胞脱颗粒治疗临床缺血性疾病。

隐丹参酮通过Dectin-1信号通路调节巨噬细胞极化抗心肌缺血损伤作用及机制研究

探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CTS)是否通过树突状细胞相关C型凝集素1(Dectin^(-1))信号通路调节巨噬细胞极化发挥抗心肌缺血的作用。选用6周龄雄性C57BL/6小鼠制作心肌缺血模型,分为假手术组、模型组、CTS低剂量组(21 mg·kg^(-1)·d^(-1))、CTS高剂量组(84 mg·kg^(-1)·d^(-1))、达格列嗪组(0.14 mg·kg^(-1)·d^(-1))。分别检测各组心功能和血清酶水平、Dectin^(-1)表达以及心肌梗死区巨噬细胞极化和中性粒细胞浸润程度。进一步利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)/干扰素(interferon,IFN)-γ刺激RAW264.7构建M1型巨噬细胞体外模型,观察CTS对巨噬细胞极化状态的影响,并检测Dectin^(-1)信号通路下游关键蛋白的变化。CTS组相比模型组小鼠,心功能和心肌损伤程度均明显改善,心肌梗死区M2/M1型巨噬细胞比例显著升高,中性粒细胞浸润明显减少,同时Dectin^(-1)呈现低表达。体外实验显示,CTS可下调M1型并升高M2型标志基因的表达,并降低Dectin^(-1)的含量及其通路相关蛋白脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、核因子-κB p65(nuclear factor-kappaB p65,NF-κB p65)和细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)1/2的磷酸化,促进信号传导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription,STAT)6的磷酸化。结果表明隐丹参酮通过Dectin^(-1)信号通路调节巨噬细胞极化发挥抗心肌缺血损伤作用。