脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞[Ca^(2+)]_i和Gq蛋白的影响及山莨菪碱的干预

目的 :观察脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVECs) [Ca2 + ]i 和Gq蛋白的影响及山莨菪碱的干预作用。方法 :分离、培养并鉴定Wistar大鼠RPMVECs;应用Fura - 2 /AM法测定RPMVECs[Ca2 + ]i;流式细胞仪技术测定RPMVECsGq蛋白。结果 :①LPS作用于RPMVECs 30min和 90min后 ,[Ca2 + ]i 显著高于对照组 ;Gq蛋白显著低于对照组。②山莨菪碱可抑制LPS的上述作用。结论 :①LPS致RPMVECs[Ca2 + ]i 增加和Gq蛋白下降 ;②山莨菪碱通过抑制LPS诱导RPMVECs[Ca2 + ]i 增加和Gq蛋白下降的作用而保护其内皮屏障功能。

山莨菪碱对内毒素致肺微血管内皮细胞骨架变化的影响

目的观察内毒素（ＬＰＳ）对肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）单层通透性和肌动蛋白骨架的影响，探讨与β受体和Ｇｓα蛋白变化的关系及山莨菪碱的干预作用。方法体外培养大鼠ＰＭＶＥＣ，采用放射性配基结合分析法和流式细胞仪技术。结果ＬＰＳ在体外可诱导ＰＭＶＥＣ单层通透性增高和中央Ｆ－肌动蛋白发生解聚、密度明显减低，同时出现β受体下调及Ｇｓα蛋白水平降低；山莨菪碱对上述变化有明显抑制作用。结论ＬＰＳ可直接导致ＰＭＶＥＣ单层通透性增高，并与Ｆ－肌动蛋白重排相关。山莨菪碱可能通过影响ＰＭＶＥＣ膜β受体和Ｇｓα蛋白两个环节，参与调控ＰＭＶＥＣ的肌动蛋白骨架变化，减轻ＬＰＳ所致的大鼠ＰＭＶＥＣ单层通透性增高。

脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞Gsα和Giα蛋白亚型的影响

目的 :观察脂多糖 (LPS)对大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVECs)G蛋白的影响及甲基强的松龙的干预作用。方法 :用流式细胞技术 (FCM )检测G蛋白亚型的变化。结果 :① 10 μg/mlLPS作用于RPMVECs 30和 90min后 ,Gsα蛋白水平较对照组显著下降。甲基强的松龙干预 30和 90min后 ,对LPS致RPMVECs膜Gsα蛋白水平的变化有显著抑制作用。② 10μg/mlLPS作用于RPMVECs 30和 90min后 ,Giα蛋白水平较对照组显著下降。甲基强的松龙干预 30和 90min后 ,对LPS致RPMVECs膜Giα蛋白水平的变化有显著抑制作用。结论 :①LPS诱导RPMVECsGsα和Giα蛋白水平的变化可能是LPS诱导RPMVECs单层通透性增加的机制之一。②甲基强的松龙参与抑制LPS诱导RPMVECs单层通透性增加的作用。