威斯康星卡片分类测验在早中期帕金森病认知评估中的应用研究

目的:将早中期帕金森病患者使用威斯康星卡片分类测验(WCST)与传统认知评估量表进行对比,分析使用WCST进行认知评估时认知功能损害特征及适用性情况。方法:回顾性分析2022年4月10日~11月15日在本院就诊的早中期原发性帕金森病患者53例,分别进行了WCST、简易智力状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔认知功能评定量表(MoCA)、帕金森病认知功能评定量表(PD-CRS)评估,对WCST与各量表测试结果的异常率进行对比,并将WCST与各量表执行功能亚项得分进行相关性分析。结果:共纳入患者53名,Hoehn-Yahr(H-Y)分级≤3级,MMSE平均得分27.9,小于26分的患者共7名,异常率为13.21%;MoCA平均得分25.6,小于26分的患者共22名,异常率为41.51%;PD-CRS平均分85.2,小于80.5分的患者共19名,异常率为35.85%。WCST测试中得分异常的患者共34名,异常率为64.15%,WCST与传统认知量表相比筛查出认知障碍患者例数差异具有统计学差异(P<0.01)。相关分析显示WCST得分与MoCA执行功能得分及PD-CRS执行功能得分有不同强度的相关性,相关系数介于-0.312~0.515。MMSE总分、MoCA总分及PD-CRS总分正常的患者中分别有26例、17例、17例患者在WCST测试中结果异常,且WCST对于运动障碍、言语障碍及视力下降患者也适用。结论:WCST在帕金森病患者认知评估中较MMSE、MoCA及PD-CRS量表更容易检查出认知障碍患者人群、适用范围更广。

帕金森病患者健康相关生活质量影响因素分析

目的通过对帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者运动及非运动症状的全面评估,分析影响PD患者生活质量(quality of Life,QoL)的因素。方法对161例PD患者进行一项横断面研究。通过帕金森病患者生活质量问卷(PDQ-39)评估患者的QoL。通过Hoehn-Yahr分级、国际运动障碍学会帕金森病统一评价量表(Movement Disorder Society-Unified Parkinson's Disease Rating Scale,MDS-UPDRS)等一系列量表对患者的运动症状和非运动症状进行全面的评估。通过Spearman相关分析分析PDQ-39总分与运动及非运动症状的相关性。通过多重线性回归分析影响PD患者QoL的因素。结果PDQ-39总分与嗓音障碍指数量表评分具有较强的相关性(r=0.616),与UPDRS-Ⅰ、UPDRS-Ⅱ、帕金森病疲劳程度量表、改良情感淡漠量表、老年抑郁量表、步态及摔倒问卷、进食问卷调查工具评分具有中等程度的相关性(r=0.3~0.5)。通过线性回归模型分析显示抑郁状态、步态、吞咽、嗓音障碍及性别与PD患者的QoL受损相关,影响程度从大到小分别为抑郁状态、步态、吞咽、嗓音障碍和性别。结论帕金森病患者的抑郁状态、步态、吞咽、嗓音障碍及性别是影响QoL的重要因素。吞咽和嗓音障碍与抑郁状态、步态等目前广受关注的因素一样,同样是影响PD患者QoL不可忽视的因素。

近红外脑功能成像技术在帕金森病中的应用与研究现状

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是中老年人常见的神经退行性疾病,一个显著特征是纹状体多巴胺缺乏导致的PD患者运动自动化能力下降,其主要临床症状为静止性震颤、运动迟缓、肌张力增高、姿势平衡障碍及步态异常等。此外,PD患者还常伴有非运动症状,主要表现为感觉障碍、认知障碍、情绪改变、睡眠障碍以及二便异常等。

帕金森病步态异常非药物康复循证研究:基于ClinicalTrials.gov数据库分析

目的了解非药物疗法治疗帕金森病步态异常的相关临床试验进展。方法检索临床试验注册平台ClinicalTrials.gov建库至2022年10月25日注册的有关非药物疗法治疗帕金森病步态异常的临床试验。两名研究人员独立对试验进行筛选,收集相关信息并对数据根据PICOS原则进行分析,包括注册时间、注册数量、样本量、干预措施、主要结局指标、研究设计等。结果最终纳入临床试验218项。近年来该领域临床试验注册数呈上升趋势。大部分临床试验的样本量<100例(93.6%),主要为21~30例。主要干预措施为神经调控技术,虚拟现实技术、机器人辅助训练技术也逐渐被采用。主要结局指标为评定量表、评定问卷和运动测试。试验设计以随机平行对照试验为主(111项,50.9%)。结论非药物疗法治疗帕金森病步态异常的临床试验注册数逐年增加,随着科学技术的发展,虚拟现实技术、机器人辅助训练技术等新的治疗方法可能成为研究主流。

《无创神经调控技术辅助阿尔茨海默病治疗专家共识》编写组

痴呆(dementia)是一种发病率高的以获得性认知功能损害为核心的综合征。遗忘型轻度认知障碍(aMCI)是阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的早期阶段。近年来关于AD的大型药物临床试验屡屡宣告失败,而非药物治疗备受重视。无创神经调控是一类非侵入性脑刺激技术(NIBS),包括重复经颅磁刺激(rTMS)、经颅直流电刺激(tDCS)等,目前rTMS、tDCS在改善AD认知功能方面已取得一定进展,而且安全性高、靶向性好,故被认为是AD治疗的新契机。然而,目前尚缺乏对rTMS、tDCS相关研究的系统性总结与评价。本共识总结现有无创神经调控技术辅助AD治疗的研究证据,依据技术类别对AD痴呆期及aMCI适宜治疗方法作临床推荐,并对rTMS与tDCS的进一步优化进行展望。

野生型和突变型PS1-EGFP真核共表达载体的构建与鉴定

为了构建人野生型和突变型PS1(早老素-1, presenilin-1)-EGPF共表达蛋白的真核表达重组质粒pcDNA3.1 /PS1-EG-FP,本研究应用下述方法:对野生型pcDNA3.1 /PS1(WT)质粒,采用一步法定点突变技术构建pcDNA3.1 /PS1(C407G)突变质粒;合成两对引物,利用PCR技术从pEGFP-C1质粒合成EGFP cDNA片断,在EGFP转录起始密码子ATG之前导入一BamHⅠ酶切位点,利用与pcDNA3.1 /PS1质粒共存的另一EcoRⅠ酶切位点,将合成的EGFP片断通过BamHⅠ和EcoRⅠ两个位点分别克隆入野生型及突变型pcDNA3.1 /PS1质粒的多克隆位点中,从而构建了野生型和突变型PS1与增强绿色荧光蛋白共表达载体。经限制性内切酶双酶切鉴定及DNA测序证实此蛋白共表达载体构建成功。利用此重组质粒瞬时转染SH-SY5Y细胞,72 h后荧光显微镜(激发波长488 nm)观察细胞内有绿色荧光蛋白表达。本研究成功构建了人野生型和突变型PS1-EGFP的真核表达载体,为下一步建立细胞模型,研究突变型PS1的生物学功能以及PS1在AD发病机制中的作用奠定了基础。

早老素-1V97L基因突变对家族性Alzheimer病SH-SY5Y细胞Aβ_(42)产生的影响

目的探讨早老素-1(presenilin-1,PS-1)Val97Leu位点突变对家族性Alzheimer病SH-SY5Y细胞Aβ42产生的影响。方法采用一步法定点突变技术,由含有野生型(wildtype,wt)PS-1的pcDNA3.1/Zeo(+)质粒合成携带有突变位点Val97Leu的突变型(mutationtype,mt)PS-1质粒并转染至神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞中,筛选出稳定表达的细胞系。用ELISA法和放射免疫法来检测培养基及胞浆中Aβ42和总Aβ含量;同时检测APP及BACE表达水平的变化。结果48小时,转染突变PS-1基因的细胞,细胞内和细胞外Aβ42的含量较24小时有显著提高,且相对未转染、wt和mock转染的细胞也有显著提高,而各组间总Aβ的含量变化无明显差异。APP及BACE的表达水平各组间也无明显差异。结论此中国人阿尔茨海默病家系中发现的PS-1基因Val97Leu突变为一新的突变位点,可选择性引起细胞内外Aβ42的增高,因此认为是一病理性突变。

靶向人NHE-1RNAi腺病毒表达载体的构建及细胞内酸化模型的建立

目的构建靶向人钠氢交换蛋白-1(NHE-1)RNA干扰(RNAi)腺病毒表达载体,感染SH-SY5Y细胞,建立细胞内酸化模型,为进一步研究细胞内pH值变化与散发性阿尔茨海默病间的关系奠定基础。方法利用基因重组技术构建4个含NHE-1前体微小RNA(miRNA)的重组干扰质粒pcDNA^(TM)6.2-GW/miR和阴性对照质粒pcDNA6^(TM)6.2-GW/neg-miR,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NHE-1 mRNA表达变化,筛选最佳干扰靶序列;BP和LR重组系统获得腺病毒干扰质粒pAd-miR-NHE-1,经包装、纯化后检测腺病毒滴度;感染复数(MOI)值梯度试验确定靶向人NHE-1 RNAi腺病毒感染SH-SY5Y细胞最佳MOI值,以最佳条件感染SH-SY5Y细胞,荧光探针法检测不同处理组细胞内pH值。结果聚合酶链反应(PCR)提示最佳靶向人NHE-1 RNAi病毒表达载体构建成功,且能有效抑制NHE-1 mRNA表达;靶向人NHE-1 RNAi腺病毒感染SH-SY5Y细胞最佳MOI值为160。当最佳MOI值为160时,NHE-1 miRNA腺病毒感染24、48和72 h后SH-SY5Y细胞内pH值分别为5.97±0.03、5.98±0.02和5.98±0.02;空载体对照组为6.05±0.04、6.04±0.07和6.03±0.05;空白对照组为6.03±0.06、6.05±0.04和6.03±0.04。不同测量时间点,SH-SY5Y细胞内pH值均显著低于空载体对照组和空白对照组,差异具有统计学意义(24 h:p=0.002,0.015;48 h:p=0.030,0.012;72 h:p=0.018,0.010);但感染RNAi腺病毒后不同测量时间点(24、48和72 h)SH-SY5Y细胞内pH值差异无统计学意义(p=0.762)。结论最佳靶向人NHE-1 RNAi腺病毒表达载体及细胞内酸化模型的成功建立,可为探索细胞内酸碱平衡与β-淀粉样蛋白产生之间的关系提供一种有效工具。

早老素1基因突变与阿尔茨海默病病理变化的关系

目的:通过分析早老素1基因突变对淀粉样β蛋白前体代谢的影响,以及对tau蛋白异常修饰及神经元凋亡的作用,探讨早老素1基因突变与阿尔茨海默病病理变化的关系。资料来源:应用计算机检索Medline1995-01/2005-09与早老素1,基因突变和阿尔茨海默病相关文章,检索词“presenilin1,mutation,Alzheimer”,并限定文章语言种类为“English”。同时计算机检索CNKI1995-01/2005-09期间的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“早老素-1,基因突变,阿尔茨海默病”。资料选择:就检索到的406篇文献进行筛选,选择以早老素1基因突变为主要研究内容的文献20多篇,无论研究对象为患者还是动物或细胞全部纳入,其中研究内容相似的,以近3年且发表在较权威杂志者优先。资料提炼:将筛选到的22篇重点文献按早老素1生物学功能、和病理作用分类:其中4篇与早老素1的生物学功能相关,10篇与早老素1和淀粉样β蛋白前体代谢的关系有关,4篇与早老素1和tau蛋白异常修饰的关系有关,4篇与早老素1和神经元凋亡的关系有关。资料综合:22篇文献综合结果说明早老素1有可能作为γ分泌酶本身或其活性中心来影响淀粉样β蛋白前体代谢,从而使淀粉样β蛋白42的产生增加;早老素1也可通过参与一些重要的信号转导途径调节蛋白激酶和磷酸酶的活性,增加tau蛋白异常磷酸化水平,并且影响神经元对凋亡的敏感性。结论:早老素1基因突变是家族性阿尔茨海默病的主要致病原因,它可通过多种机制导致阿尔茨海默病的病理变化。

PBL教学法在神经病学教学查房中的应用

在神经病学教学查房中,引入以问题为基础的学习方法(PBL),即以患者的问题为基础,以实习生为中心的教学模式,调动了学生的学习主动性,促进了思维方式的改变。在运用PBL教学法的过程中,教师根据教案和备课要求收集典型病例,提出并设计问题,引导学生正确地进行临床思维;也可以模拟医疗场景,通过情景话剧的方法锻炼实习生的临床思维;最后通过总结病例,提问及相互提问进一步激发学生探索知识的兴趣。该方法有助于提高医学实习生分析问题、解决问题的能力,传授神经科医师的临床思维方式。

细胞内pH降低对β分泌酶和γ-分泌酶的影响研究

目的研究细胞内pH值下降的情况下,β分泌酶和早老素-1的表达及活性的变化。方法培养人源性神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞,用RNA干扰技术和无血清培养分别制造细胞内酸化模型;实验分成4组,即正常细胞组、NHE-1基因敲低组、阴性对照组、无血清培养组。运用荧光分光光度计测定各组细胞内pH值,并通过Real-Time PCR和Western Blotting分别检测β分泌酶和早老素-1 mRNA及蛋白的相对表达量,通过ELISA检测β分泌酶和早老素-1的活性。结果 NHE-1基因敲低组及无血清培养组较正常细胞内pH值降低(P<0.05),阴性对照组细胞内pH值无明显变化;与正常、阴性对照组相比,NHE-1基因敲低组β分泌酶mRNA表达为5.65±0.33,蛋白表达为0.37±0.030;早老素-1 mRNA表达1.75±0.04,蛋白表达分别为0.70±0.01,无血清培养组β分泌酶mRNA表达为2.40±0.55,蛋白表达为0.32±0.031;早老素-1 mRNA表达1.39±0.03,蛋白表达分别为0.68±0.08,其表达及活性均明显增强(P<0.05);阴性对照组细胞与正常细胞比较,β分泌酶和早老素-1 mRNA和蛋白表达及活性均无明显变化(P>0.05)。结论细胞内pH降低能够增强β分泌酶的表达和活性;因早老素-1被认为是γ-分泌酶的主要成分和活性中心,因此推测细胞内pH降低也能够增强γ-分泌酶的表达和活性,从而影响APP的剪切,增加Aβ生成。

标准化患者教学在神经眼科教学中的应用

目的:通过积极探索标准化患者(standardized patient,SP)教学法在神经眼科教学中的应用与研究,着力提升神经眼科医师临床诊疗思维层次和能力素质。方法:以2014/2016年参加神经眼科临床专业学习培训的研究生或进修生为主要研究对象,随机抽样选取40名人员,按性别比例设置分配两组,分别采用传统教学法和SP教学法组织施教。课程结束后,采取科目考试、问卷调查、综合评定等方式,对评测教学内容、质量和效果的量化数据进行采集与汇总,并应用SPSS 20.0系统进行综合分析,得出科学结论,形成研究报告。结果:问卷调查显示,两个组分别对课堂教学内容的趣味性、知识理解掌握的透彻性、理论联系实际的有效性、临床诊断治疗的指导性,以及教师施教能力的满意度进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05);对病例分析试题考试成绩进行比较,差异也有统计学意义(P<0.001)。结论:使用标准化患者教学法有助于培养神经眼科医师临床诊疗思维能力。

合成甲基叔戊基醚的化学平衡研究

合成甲基叔戊基醚的化学平衡研究是在测量平衡常数的基础上进行的，由平衡常数推算出反应的ΔＨ°和ΔＳ°。反应以甲基叔戊基醚分解的方式进行，以酸性树脂为催化剂，压力控制在１．０ＭＰａ，在４０—９０℃范围内，由试验测得３个反应的标准焓变和熵变分别为：ΔＨ°１＝－３４．９±１．４ｋＪ／ｍｏｌ，ΔＨ°２＝－２８．１±１．１ｋＪ／ｍｏｌ，ΔＨ°３＝－６．９５±１．１ｋＪ／ｍｏｌ；ΔＳ°１＝－７５．５９±３．９Ｊ／（ｍｏｌ·Ｋ），ΔＳ°２＝－７４．８±３．４Ｊ／（ｍｏｌ·Ｋ），ΔＳ°３＝－１．１６±３．１Ｊ／（ｍｏｌ·Ｋ）

帕金森病患者康复治疗药物利用研究

目的对帕金森病患者康复治疗药物的临床使用及利用分析进行评价,为药师开展康复药学监护服务提供参考。方法选择2018年1月至2019年12月在首都医科大学附属北京康复医院接受药物康复及康复技术治疗的帕金森病患者2860例,调取医院系统中抗帕金森病药物处方,对用药品种、用药频度、用药金额、限定日费用等药物利用指标进行评价,对联合用药情况进行分析。结果抗帕金森病药物用药频度排序前5位的依次是多巴丝肼片、盐酸司来吉兰片、盐酸金刚烷胺片、卡左双多巴缓释片、盐酸普拉克索片。治疗药物总金额占比在5%以上的药品为盐酸普拉克索(包括普片和缓释片)、多巴丝肼片、恩他卡朋片、甲磺酸雷沙吉兰片以及盐酸司来吉兰片。限定日费用排序前5位依次是盐酸普拉克索缓释片、盐酸普拉克索片、甲磺酸雷沙吉兰片、恩他卡朋片和吡贝地尔缓释片。2860例患者药物治疗方案为单一用药499例(17.45%)、二联用药831例(29.06%)、三联用药599例(20.94%)、四联及以上用药931例(32.55%)。结论首都医科大学附属北京康复医院帕金森病患者康复治疗药物利用指标科学,联合治疗用药方案基本合理。建议药师根据实际情况为帕金森病患者提供康复药学监护服务。

局部亚低温对大鼠脑缺血再灌注基质金属蛋白酶9及细胞外基质蛋白表达的影响

目的研究局部亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤时基质金属蛋白酶9(metalloproteinase 9,MMP9)、细胞外基质蛋白———层黏连蛋白(laminin,LN)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的影响,为局部亚低温应用于脑缺血的临床治疗提供理论依据。方法改良线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,脑缺血时间为2 h,缺血即刻于大鼠头部放置冰块,脑温维持在32.5℃～33.5℃,并持续至再灌后1 h。采用12分评分法与2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法进行神经功能评分和脑梗死体积测定;免疫荧光方法测定检测缺血半暗带MMP9、LN及FN的表达。结果与正常体温再灌注组比较,局部亚低温再灌注组脑梗死体积百分比和神经功能评分均减小(P<0.01);脑组织MMP9表达降低(P<0.05),LN及FN表达升高(P<0.05)。结论在大鼠脑缺血再灌注损伤中,局部亚低温能够明显减小脑梗死体积,改善神经功能。局部亚低温可能通过减少MMP9的表达,增加LN及FN的表达发挥神经保护作用。