浆母细胞在成人原发免疫性血小板减少症中的表达特征及临床价值

目的探讨成人原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中浆母细胞的表达特征及在疾病诊断中的价值。方法选取2022年7—12月来复旦大学附属中山医院就诊的20例ITP患者和20例继发其他各种疾病导致血小板减少患者(非ITP血小板减少患者)分别作为ITP组和非ITP血小板减少组,并选取同期24例体检健康者作为健康对照组。应用流式细胞术检测各组外周血B淋巴细胞亚群并比较其差异,采用Logistic回归分析ITP发生的风险因素。结果与健康对照组比较,ITP组浆母细胞(CD19^(+)CD27^(++)CD38^(++))占CD19^(+)细胞比例显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),其余淋巴细胞亚群指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。与健康对照组比较,非ITP血小板减少组初始B细胞(CD19^(+)CD27^(-)CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例显著上升,记忆B细胞(CD19^(+)CD27+CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),浆母细胞比例差异无统计学意义(P>0.05)。与非ITP血小板减少组比较,ITP组浆母细胞(CD19^(+)CD27^(++)CD38^(++))、记忆B细胞(CD19^(+)CD27+CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例均显著上升,初始B细胞(CD19^(+)CD27^(-)CD38^(-))占CD19^(+)细胞比例下降,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,当模型未校准时,OR=3.31,P<0.01;校准性别、年龄后,ITP发生的风险增加2.65倍(OR=3.65,P<0.01);进一步校准性别、年龄和血小板计数后,ITP发生的风险增加3.78倍(OR=4.78,P<0.01)。结论外周血浆母细胞升高是成人ITP发生的独立风险因素。

TNFRSF12A与肝癌的临床相关性及其与肿瘤免疫调控的相关研究

目的探讨肝癌发病机制中TNFRSF12A分子的作用。方法通过综合分析癌症基因图谱(Cancer Genome Atlas Program,TCGA)和单细胞测序数据,研究TNFRSF12A在肝癌中的表达情况及其与预后的相关性。HPA数据库分析TNFRSF12A在亚细胞内的定位,使用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析。TIME 2.0数据库分析TNFRSF12A与肝癌组织内免疫细胞浸润的相关性。结果TNFRSF12A在肝癌组织中高表达并与患者生存预后呈显著正相关(OS:HR=1.61,P=0.0070;RFS:HR=1.45,P=0.0370;PFS:HR=1.30,P=0.0990;DSS:HR=1.67,P=0.0270),同时与患者的年龄(P=0.0467)和BCLC分期(P=0.0456)也存在显著相关性。TNFRSF12A与肿瘤干细胞标志物(CD24、SOX4、ANPEP)共表达,提示其与肿瘤恶性程度高度相关。分子功能分析揭示其主要存在于细胞质中,并在细胞凋亡、侵袭、蛋白结合等过程中发挥作用。此外,TNFRSF12A与Treg细胞和免疫细胞浸润相关,揭示其在肿瘤免疫调节中可能发挥的作用。结论TNFRSF12A在肝肿瘤中表达显著升高,并与患者预后显著相关。肿瘤细胞可通过其与Treg产生的细胞因子发生互作,重塑肿瘤微环境。

碧迪FACS CantoⅡ流式细胞仪性能评价及实验室应用

目的评估碧迪FACS CantoⅡ(BD FACS CantoⅡ)流式细胞仪的性能及实验室应用。方法依据中华人民共和国医药行业新版标准《YY/T0588-2017流式细胞仪》^([1])对BD FACS CantoⅡ流式细胞仪进行性能评价,评价内容包括:荧光检出限、荧光线性、前向角散射光(forward scatter resolution,FSC)检出限、仪器分辨率、FSC分辨率、侧向角散射光(side scattering resolution,SSC)分辨率、倍体分析线性、表面标志物检测的准确度、表面标志物检测的重复性、携带污染率和仪器稳定性。完成性能评价后,分别用BD FACS CantoⅡ流式细胞仪及其配套的BD六色淋巴细胞亚群试剂盒和BD FACS Calibur流式细胞仪及其配套的BD四色淋巴细胞亚群试剂盒分别检测20份全血标本,比较两台仪器在标本前处理、上机检测、分析结果所用时间和结果比较的差异。结果该流式细胞仪对异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)通道荧光检出限为40.18等量可溶性荧光分子数(molecules equiva-lent soluble fluorochrome,MESF),对藻红蛋白(P-phycoerythrin,PE)通道荧光检出限为23.77 MESF,两者的决定系数(R square,r)均为0.999 9;FSC最小可检测0.22μm微球;仪器分辨率FSC,FITC和PE荧光通道的变异系数(coeffivirnt of cariation,CV)分别为2.3%,2.4%和2.4%;FSC/SSC散点图可明显区分外周血中红细胞和血小板,同时能区分白细胞中的淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞;倍体分析线性中G_2/M期(四倍体细胞峰)与G_0/G_1期(二倍体细胞峰)的平均荧光强度比值为1.98;表面标志物检测值的平均值均在质控品说明书给定的靶值参考范围内;表面标志物检测重复性CV分别为CD3:2.75%,CD4:1.86%,CD8:5.14%,CD16/CD56:7.33%和CD19:11.26%;携带污染率最大为0.05%;该仪器开机8 h检测FSC及各荧光通道峰值荧光道数偏差值(B)分别为-0.40%,-0.55%,1.57%,1.88%,1.66%,7.44%,7.23%,6.63%和6.21%;BD FACS CantoⅡ流式细胞仪及其配套试剂盒较BD FACS Calibur流式细胞仪及其配套试剂盒在总体检测速度上有显著提高;两台仪器所得的检测结果差异无统计学意义(P>0.05),且前者检测结果的离散程度小于后者。结论 BD FACS CantoⅡ流式细胞仪各项性能均符合行业标准,仪器各项技术指标达标,可有效保障实验室检测结果的准确性,能为临床诊疗提供可靠支持。

基于流式细胞术的低值血小板检测方法的性能评价

目的对流式平台检测低值血小板的方法进行性能评价。方法在流式平台上用绝对计数管检测不同浓度的低值血小板,并分析其在各个不同浓度下的精密度和正确度。同时用所得结果与人工镜检法进行比较。在巨核细胞体外培养实验操作中进行验证,通过检测巨核细胞培养体系内的血小板浓度,分析其与体系内巨核细胞数量的相关性。结果流式法检测低值血小板的的准确度和精密度均优于人工镜检法,其变异系数(CV)和偏倚在检测同浓度血小板时均小于人工镜检法。在检测巨核细胞体外培养体系中的血小板浓度结果后发现,巨核细胞产生的血小板数量与巨核细胞数量呈正相关。结论基于流式细胞术原理检测低值血小板的方法,其精密度和正确度可满足实际实验需求。

元认知策略在“生本”课堂中的运用探究

'生本'课堂强调以学生为主体,旨在培养学生主动发现问题,探索问题,解决问题的能力。元认知知识能够有效帮助学生在认知活动中自我调节,自我控制与监督。将元认知策略运用在'生本'课堂中,有助于提高学生认知活动的有效性。笔者以字词教学为例,从元认知计划策略,元认知监控策略,元认知评价策略三个方面出发,探究元认知策略在'生本'课堂中的运用。