不同抗生素对创伤弧菌感染小鼠的保护作用及小鼠心肌超微结构动态观察

目的探讨不同抗生素在不同时段对创伤弧菌(Vv)感染小鼠心肌的保护作用及观察小鼠心肌超微结构的动态变化。方法将100只清洁级ICR小鼠分为保护Ⅰ组(所用药物含氧氟沙星、异丙嗪、地塞米松等);保护Ⅱ组(所用药物含氧氟沙星、异丙嗪等);保护Ⅲ组(所用药物含亚胺培南、异丙嗪、地塞米松等);保护Ⅳ组(所用药物含克林霉素、异丙嗪、地塞米松等)和阳性对照Ⅴ组,每组20只。Ⅰ～Ⅴ组每只小鼠接种0.2mlVv菌液(约4.4×106菌群数ml),1h后Ⅰ～Ⅳ组肌肉注射相应药物。接着在3、6、12h取各组小鼠心肌组织进行超微结构观察并比较。结果含有该菌敏感抗生素的Ⅰ～Ⅲ组在接种Vv后8h及24h小鼠存活数均显著高于Ⅴ组和Ⅳ组(P<0.01);Ⅰ～Ⅲ组心肌的超微结构损伤较之Ⅴ组和Ⅳ组有较显著的改善,而Ⅳ组小鼠的心肌损伤与Ⅴ组接近。结论敏感抗生素氧氟沙星或亚胺培南与异丙嗪以及地塞米松等联合应用能提高Vv感染后小鼠的生存率,并改善其心肌的损害。

肾移植术后人卡氏肺囊虫肺炎细胞超微结构研究

目的:深入了解卡氏肺囊虫的超微结构及其所致肺炎的超微病理特点。方法:取29例肺活检组织进行电镜观察。结果:29例活检组织中发现卡氏肺囊虫感染25例,支气管和肺泡的腔内可见各期的卡氏肺囊虫,细支气管、终末细支气管上皮细胞的纤毛或微绒毛脱落比较明显,线粒体空泡变性,内质网扩张,可见细胞坏死脱落现象。肺泡上皮细胞内多数线粒体、内质网及部分Ⅱ型上皮细胞板层小体空泡变性,板层小体数量有所减少,并可见上皮细胞坏死脱落现象。支气管间质和肺泡隔内有炎症细胞浸润,以吞噬细胞为主,胶原纤维不同程度增生。可见囊虫呈结节样或团状充满细支气管或肺泡腔。结论:人卡氏肺囊虫不仅可与支气管或肺泡上皮细胞紧密接触或直接侵入细胞体内对细胞进行直接伤害,还可能通过释放某些活性物质或代谢物时细胞进行伤害,尤其是线柱体、内质网、板层小体等膜性系统发生空泡变性,并引起肺间质胶原纤维增生和阻塞性病变。

创伤弧菌感染致多器官损伤的超微结构观察及致病机制

目的 :通过电镜观察创伤弧菌 (Vibriovulnificus ,Vv)所致多器官损伤的超微结构改变情况 ,探讨其发病机制。方法 :临床组 6例 ,取自临床Vv感染的皮肤、肌肉的活检组织 ;实验组 12只昆明小鼠 ,在腹腔、肌肉、皮下 (各 4只 )接种Vv菌液 0 .2ml/只 (约 4.3 4× 10 6 CFU) ;对照组 4只昆明小鼠 ,腹腔注射无菌生理盐水0 .2ml/只。分别取血液、皮肤、肌肉、心肌、肺、肝、肾等组织进行电镜观察。结果 :电镜下见皮肤、肌肉、心肌、肺、肝、肾等组织的部分实质细胞内和间质中可见Vv生长 ;血液内见大量Vv菌体 ;部分血管内皮细胞损伤及基膜断裂溶解 ,线粒体、内质网等细胞器损伤明显。结论 :Vv引发的原发性败血症以及多器官实质细胞及间质超微结构损伤 ,致使多器官功能障碍甚或衰竭 。

解脲脲原体感染胎盘组织超微病理观察

目的 :探讨解脲脲原体 (以下简称 Uu)感染胎盘的发病机制。方法 :取胎膜早破和早产胎盘组织标本各 10例 ,Uu培养均阳性 (试验组 ) ;同时取 10例正常妊娠胎盘组织 (对照组 )进行电镜观察。结果 :试验组胎盘组织中有 16例发现有不同程度的 Uu感染现象 ,并引起绒毛滋养层细胞和绒毛间质发生不同程度的病理改变。结论 :Uu感染是导致部分胎膜早破和早产的主要原因。 Uu不仅吸附在滋养层细胞膜表面诱发相应的超微病理改变 ,而且还进入滋养层细胞体内 。

电镜样品制作中的人为假象分析

目的 :对电镜样品制作中出现的人为假象进行分析 ,并提出预防和解决办法。方法 :将我室在1990年 1月～ 2 0 0 0年 12月间样品制作记录进行整理 ,分别从取材、固定脱水、浸泡、聚合等各个步骤中找出所致人为假象的原因所在 ,并提出相应的处理办法。结果 :2 318例中产生人为假象的 ,取材及前固定占 2 5 % ,常规制作过程占 14% ,超薄切片占 6 %。结论 :以取材及前固定不规范造成的人为假象最为严重 ,其次是常规制作过程 ,超薄切片占少数。

葛根素对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

目的:探讨葛根素对糖尿病大鼠心肌损伤的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分成6组:正常对照组,糖尿病模型组,葛根素高(160mg·kg-1)、中(120mg·kg-1)、低(80mg·kg-1)剂量治疗组,氨基胍(100mg·kg-1)治疗组;各组大鼠每天腹腔注射相应药物1次,正常对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积丙二醇。治疗12周后,透射电镜下观察心肌的形态学改变,用生化方法测定血糖浓度、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性及丙二醛(MDA)含量,采用RT-PCR检测心肌组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、葡萄糖转运体4(GLUT-4)、醛糖还原酶(AR)的mRNA表达水平。结果:糖尿病组大鼠心肌组织电镜下主要见到心肌细胞肌原纤维减少,纤维间脂滴沉积,线粒体排列紊乱,嵴部分断裂或消失,结构不清;SOD、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性和PPAR-γ、GLUT-4 mRNA表达明显低于正常对照组(均P<0.01),而血糖浓度、MDA含量和AR mRNA表达明显高于正常对照组(均P<0.01)。经葛根素治疗后,上述改变逆转,与糖尿病模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),电镜下心肌组织形态学病变明显减轻,肌纤维排列较整齐,仅见少量脂滴沉积,大部分线粒体嵴清晰致密。结论:葛根素对糖尿病大鼠心肌具有一定的保护作用,其机制可能与上调PPAR-γ、GLUT-4 mRNA的表达,促进心肌细胞对葡萄糖的摄取,减轻氧化应激损伤有关。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠睾丸损伤的作用

目的 :研究银杏叶提取物 (GBE)对糖尿病所致的睾丸损伤的作用及其机制。方法 :用光镜及透射电镜观察链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病 1个月大鼠睾丸的形态学改变 ,并测定睾丸组织丙二醛 (MDA)、NO产物NO2 -/NO3 -的含量及超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮合酶 (NOS)的活性。结果 :①糖尿病大鼠睾丸组织光镜下主要表现为睾丸曲细精管萎缩、变形及生精上皮脱落 ,透射电镜下主要见到支持细胞浆内内质网扩张、脂滴空泡形成 ,溶酶体明显减少 ,银杏叶组大鼠睾丸组织光镜、透射电镜下上述病变明显改善。②睾丸组织的MDA、NO2 -/NO3 -含量及tNOS和iNOS活性银杏叶组低于糖尿病组 ,SOD活性银杏叶组高于糖尿病组。结论 :GBE对糖尿病所致的睾丸损伤有明显的保护作用 ,其作用机制与提高SOD活力减少MDA产生 。

糖尿病大鼠睾丸病理变化及脂质过氧化和一氧化氮的改变

目的 :研究糖尿病睾丸的病理变化及其发生机制。方法 :用光镜及透射电镜观察四氧嘧啶诱导的糖尿病 1个月大鼠睾丸的形态学改变 ,并测定睾丸组织超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)、一氧化氮合酶 (NOS)的活性及一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)含量。结果 :光镜下主要表现为睾丸曲细精管萎缩及生精阻滞 ;透射电镜下主要见到支持细胞线粒体与内质网扩张、胞浆内内含物形成 ;睾丸组织的SOD、GSH -PX活性实验组低于对照组 ,NOS活性及NO、MDA含量实验组高于对照组。结论 :糖尿病大鼠睾丸病变主要为支持细胞受损及生精障碍 。

银杏叶提取物对实验性2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(EGB)对实验性2型糖尿病大鼠肝脏损伤的影响及机制。方法:雄性SD大鼠39只,随机分为4组:正常对照组、高脂组、糖尿病对照组和EGB治疗组。采用高脂饮食加链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型,EGB治疗组给予EGB 8 mg.kg-1.d-1治疗8周。用光镜和透射电镜观察EGB对2型糖尿病大鼠肝组织的形态学改变,并检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSH-PX)和总一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性及MDA、NO含量。结果:糖尿病组光镜下主要表现为肝细胞脂肪变性明显,出现大量脂肪空泡,胞浆内糖原颗粒减少或消失。电镜下主要表现为肝细胞核固缩,胞浆内含大量脂滴,细胞器明显减少,贮脂细胞明显增生,胶原纤维增生。肝组织内GSH-PX、SOD、CAT活性明显低于正常对照组,MDA、NO含量及总NOS、iNOS活性显著高于正常对照组;EGB治疗组肝脏组织病理改变较轻,GSH—PX、SOD、CAT活性明显高于糖尿病组,MDA、NO含量及总NOS、iNOS活性显著低于糖尿病组。结论:EGB对2型糖尿病大鼠的肝脏具有保护作用、抗脂质过氧化作用和抑制NO的过多产生可能在其中起重要作用。

糖尿病大鼠脑组织学及脂质过氧化和一氧化氮水平的变化

目的 :研究糖尿病大鼠脑组织学及脂质过氧化和一氧化氮的变化。方法 :用光镜及透射电镜观察四氧嘧啶诱导的糖尿病 1个月大鼠脑组织学改变 ,并测定脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)、一氧化氮合酶 (NOS)的活性及丙二醛 (MDA)、一氧化氮 (NO)的含量。结果 :光镜下可见脑水肿、脑软化、白质脱髓鞘 ,透射电镜下见到神经元及神经胶质细胞内线粒体肿胀、嵴变短、神经纤维脱髓鞘 ,血脑屏障受损 ;SOD、GSH -PX活性下降 ,NOS活性、MDA、NO含量增加。结论 :糖尿病可引起明显的脑组织形态学改变 。

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠睾酮水平、LHR和StAR mRNA表达的影响

目的:探讨银杏叶提取物(EGB)在2型糖尿病大鼠睾酮合成中的作用及其对黄体生成素受体(LHR)、类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠30只,随机均分成3组:正常对照组、2型糖尿病组、EGB治疗组。后2组给以高脂饮食加小剂量(30mg/kg)链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型,EGB治疗组予EGB50mg·kg-1.d-1灌胃12周,正常对照组及2型糖尿病组灌服等容积生理盐水。测定各组大鼠血葡萄糖、血胰岛素、血LDL-c含量;称各组大鼠睾丸重量,并用光镜和透射电镜观察大鼠睾丸组织的形态学改变;ELISA法检测血清黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平;RT-PCR检测睾丸组织中LHR、StAR mRNA表达水平。结果:与正常组相比,糖尿病组大鼠血清T、LH含量及睾丸组织的StAR mRNA含量明显降低,血糖、血胰岛素、LDL-c及LHR mRNA含量显著升高,睾丸重量明显减轻;光镜下主要表现为睾丸曲细精管内生精细胞数量减少及生精阻滞,透射电镜下主要见到间质细胞(Leydigcell)及支持细胞内线粒体、内质网等细胞器空泡样变及扩张。EGB治疗组睾丸组织病理改变较轻,血清T、LH含量及睾丸组织StAR mRNA含量明显高于糖尿病组,血糖、血胰岛素、LDL-c及睾丸组织LHRmRNA含量低于糖尿病组。结论:EGB可提高2型糖尿病大鼠T的合成,其机制可能与改善糖脂代谢紊乱,调节LHR、StAR mRNA表达有关。

2型糖尿病大鼠脑内11β-HSD1和GR的表达与认知功能的关系及棉酚的干预作用

目的:研究棉酚对2型糖尿病大鼠认知功能的影响,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠30只,随机均分成3组:正常组、2型糖尿病组、棉酚治疗组。后2组给予高脂饮食加小剂量(30mg/kg)链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病模型,棉酚治疗组(第1-4周按15mg·kg-1.d-1剂量棉酚灌胃,第5-12周按每周15mg·kg-1剂量棉酚灌胃)。用Morris水迷宫测试大鼠行为学;生化检测血糖及ELISA法检测血皮质酮、放免法检测血胰岛素水平;Western blotting方法检测大脑皮层及海马组织11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)、糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平;电镜、光镜下观察大脑皮层及海马组织的形态学改变。结果:与正常组比较,糖尿病组大脑皮层及海马神经元可见较明显的核固缩、高尔基体扩张、线粒体水肿,血糖、血皮质酮、血胰岛素水平显著升高(P<0.01),GR蛋白表达明显降低(P<0.05),11β-HSD1蛋白表达呈升高趋势,行为测试潜伏期显著延长(P<0.01),搜索策略明显变差(P<0.01);经棉酚干预后,大脑皮层及海马组织病理改变较轻,血糖、血皮质酮、血胰岛素水平显著降低(P<0.01),GR蛋白表达明显升高(P<0.05),11β-HSD1蛋白表达明显降低(P<0.05),行为测试潜伏期显著缩短(P<0.01),搜索策略显著好转(P<0.01)。结论:棉酚能改善2型糖尿病大鼠的认知功能,可能与降低2型糖尿病大鼠脑内11β-HSD1蛋白、升高GR蛋白水平有关。

川芎嗪抗肾缺血再灌注损伤脂质过氧化作用的机制研究

目的:观测兔肾缺血再灌注损伤时脂质过氧化的变化、探讨中药川芎嗪的干预作用及机制。方法:日本大耳白兔30只,随机均分为对照组、再灌注组和川芎嗪组。复制在体兔肾缺血再灌注损伤动物模型,在缺血前、缺血1h、再灌注5h分别经颈总动脉抽血检测黄嘌吟氧化酶(XO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;实验结束时取肾组织检测XO、SOD活性及MDA含量,观察超微结构变化,作对比分析。结果:川芎嗪组血浆XO活性和MDA含量显著低于再灌注组(均P<0.01);SOD活性高于再灌注组(P<0.05)。川芎嗪组与再灌注组相比,肾组织的XO活性、MDA含量明显降低,SOD活性明显升高,差异非常显著(均P<0.01)。再灌注组肾小球毛细血管内皮细胞,脏层上皮细胞超微结构严重损害,川芎嗪组大部分肾组织上述部位存在不同程度损伤性改变,但比再灌注组明显减轻。结论:川芎嗪可通过减少氧自由基的生成,增强氧自由基的清除,抑制脂质过氧化反应,有效减轻肾缺血再灌注损伤。

异丙酚对兔肺缺血-再灌注损伤时蛋白激酶C基因表达的影响

目的 :探讨异丙酚对肺缺血 -再灌注损伤 (PIRI)时蛋白激酶C基因表达的影响。方法 :采用在体兔单肺原位缺血 -再灌注模型。实验兔 2 7只 ,随机均分为假手术对照组 (sham)、肺缺血 -再灌注组 (I-R)和肺缺血 -再灌注加异丙酚治疗组 (PPF)。再灌注 6 0min时取肺组织 ,观察蛋白激酶C(PKC)mRNA定位表达、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛 (MDA)浓度、一氧化氮 (NO)含量、肺组织湿干重比 (W/D)、肺损伤组织学定量评价指标 (IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果 :肺再灌注 6 0min ,PPF组PKCmRNA在肺小动脉内膜、外膜及薄壁小血管 (主要是肺小静脉 )强阳性表达 ,其吸光度值与sham组及I-R组比较有显著差异 (P <0 0 5和P <0 0 1) ;SOD活性明显高于I-R组 (均P <0 0 1) ;MDA浓度、W/D和IQA值显著低于I-R组 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ;肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论 :异丙酚可上调肺组织PKC -α、δ、θmRNA的表达 ,而提高体内NO水平、降低氧自由基水平、减轻脂质过氧化反应 ,对PIRI发挥积极的防护作用。

穿通支原体在宫颈癌患者血液和肿瘤组织中的分离检出

目的探讨穿通支原体(Mycoplasma penetrans,Mpe)分离检出与宫颈癌发生的相关性。方法将55例宫颈浸润癌、37例宫颈上皮内瘤变(CIN)及24例对照的宫颈组织、血液标本接种在改良的SP-4、Uu、Mh等液体培养基进行支原体分离培养,可疑阳性菌株用PCR予以证实。MpePCR阳性患者的组织和血液标本超薄切片,电镜下观察Mpe颗粒的存在以及细胞超微结构改变。结果55例宫颈浸润癌患者中共分离到Mpe25例,分离率为45.5%(25/55),37例宫颈CIN患者中共分离到Mpe9例,分离率为24.3%(9/37),24例对照组中有1例从血液和组织同时分离到Mpe(4.2%,1/24),各组Mpe分离率比较均有统计学意义。电镜下发现,Mpe阳性的宫颈鳞状细胞癌患者的血液、组织中均有典型葫芦状、三层膜结构的穿通支原体存在。结论宫颈浸润癌、宫颈CIN患者的组织、血液中Mpe分离阳性率高,提示Mpe感染与宫颈癌的发生有一定关联。

银杏叶提取物对实验性糖尿病大鼠脑组织的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(extractofGinkgobi-loba,EGB)对糖尿病大鼠脑的保护作用及其机制。方法:选用雄性SD大鼠,随机分为糖尿病组、银杏叶组和正常对照组。应用链脲佐菌素(STZ)诱导制备大鼠糖尿病模型。银杏叶组腹腔注射银杏叶提取物注射液,其余两组给予同容积的生理盐水,用药5周后,测定脑组织内皮素(ET)、丙二醛(MDA)、NO产物NO2-/NO3-的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性,以及血清中的血糖、胰岛素、ET水平,并作光镜及透射电镜观察。结果:糖尿病脑组织光镜下可见脑水肿、脑软化、神经细胞变性、白质脱髓鞘,透射电镜下可见神经元及神经胶质细胞内线粒体肿胀、嵴变短、神经纤维脱髓鞘、血脑屏障受损。EGB治疗后光镜、电镜下的病变明显减轻。与糖尿病组相比,银杏叶组大鼠血糖、血浆ET水平下降、胰岛素水平升高,脑组织内SOD活性明显升高,NOS活性、ET、MDA、NO2-/NO3-的含量明显下降。结论:EGB可能通过抗脂质过氧化及降低NO、ET水平,对糖尿病大鼠脑组织产生保护作用。

肺缺血-再灌注损伤超微结构及川芎嗪对其影响

目的观察肺缺血-再灌注损伤超微结构的改变及川芎嗪对其影响。方法采用在体兔单侧肺左肺门持续性阻断血流1h,再灌注1、3、5h缺血-再灌注损伤的动物模型。90只白兔随机分为3组:缺血-再灌注组(IR组):缺血1h,分别再灌注1、3、5h。川芎嗪组(TMP组):再灌注缺血前1h静脉滴注川芎嗪60mg/kg,其余同IR组;对照组(C组):对兔进行假手术,不发生缺血。常规电镜制片、染色。观察肺组织超微结构的变化。结果电镜下见C组:肺微小动脉内皮结构、毛细血管内皮细胞及肺泡上皮细胞结构正常;IR组:肺微小动脉内皮细胞损伤明显,线粒体水肿、空泡变性。肺毛细血管腔内多形核粒细胞(PMN)堵塞,肺泡Ⅱ型上皮微绒毛脱失,细胞内板层小体疏松肿大;TMP组:肺微小动脉内皮结构基本正常,个别线粒体轻度水肿,无空泡变性,毛细血管腔内PMN少,堵塞相对较轻,肺泡Ⅱ型上皮微绒毛少许脱落。结论川芎嗪可不同程度地减轻肺缺血-再灌注肺组织电镜下的病理损伤,对肺缺血-再灌注具有保护作用。

发酵支原体、梨支原体大鼠致死性感染实验研究

目的制备发酵支原体(Mycoplasma fermentans,Mf)梨支原体(Mycoplasma pirum,Mpi)致死性感染大鼠模型。方法清洁级SD大鼠54只,分免疫抑制组(47只)与非免疫抑制组(7只)。免疫抑制组预先经环磷酰胺隔天注射(50mg/kg.d)三次制备,分别腹腔注射0.6mL三种支原体标准菌株Mf、Mpi穿通支原体(Mpe),以及本实验室分离株(W12)和无菌生理盐水;非免疫抑制组取正常大鼠腹腔注射同剂量Mf。计算各组死亡率,死亡大鼠无菌解剖,分别取大鼠血液、心、肝、肺,肾和脑组织进行再培养,进而取再培养阳性脏器进行超微结构观察。结果实验组大鼠致死率与对照组比较均有显著性差异(P<0.01);大鼠血液、心、肝、肺,肾和脑组织中支原体检出率与对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。电镜下大鼠的心、肝、肺、肾及脑组织内见支原体,且细胞间质高度水肿,线粒体肿胀、空泡样改变,器官实质变性坏死,大量炎性细胞浸润,并以免疫抑制肺和脑最为显著。结论Mf、Mpi、Mpe、W12支原体感染的免疫抑制组大鼠死亡率明显高于非免疫抑制组,且免疫抑制组肺和脑损伤最为显著。

慢性低O_2高CO_2性肺动脉高压大鼠脑超微结构改变与MDA、SOD变化及培哚普利的治疗作用

目的 :探讨慢性低O2 高CO2 时神经元线粒体及髓鞘的改变与氧自由基的变化关系及培哚普利的治疗作用。方法 :采用慢性低O2 高CO2 肺动脉高压模型 ,应用培哚普利治疗 ,电镜观察大鼠脑超微结构并测定MDA和SOD。结果 :观察到脑血管内皮细胞锯齿状突起 ,管腔狭窄 ,神经元线粒体空泡变及髓鞘分层断裂 ,测得实验大鼠MDA升高 ,SOD降低 ,用药组大鼠脑血管和神经元结构损害明显减轻。结论 :提示慢性低O2 高CO2 时神经元线粒体及髓鞘改变与MDA升高有关 ,培哚普利对慢性低O2 高CO2 时脑损害有保护作用。