甘蓝型油菜WRKY基因家族碱基组成及密码子使用特性分析

WRKY转录因子广泛地参与植物的抗逆防卫反应。通过对甘蓝型油菜WRKY基因家族碱基组成和密码子用法的分析,发现其碱基组成不仅对密码子的偏好性选择有重要影响,而且与基因的表达水平参数(Nc、CAI、CBI等)显著相关。通过对密码子RSCU值的分析,得到了TTA、CTT、AGA等29个偏好密码子,且多以碱基A或T结尾。ENc-plot分析表明,除了碱基组成之外,自然选择等其它因素对密码子偏好性也有影响。

甘蓝型油菜BnMKS1基因的克隆、亚细胞定位及其诱导表达

为了从油菜中克隆BnMKS1基因并且了解其诱导表达情况,以甘蓝型油菜品种中双9号为材料,采用同源克隆法克隆获得甘蓝型油菜MKS1(BnMKS1)的cDNA序列。BnMKS1编码的蛋白质含有217个氨基酸残基,与AtMKS1有82%的相似性。序列分析结果表明BnMKS1含有1个VQ结构域和8个潜在的MAP kinase磷酸化位点。农杆菌介导的烟草瞬时表达分析结果显示,BnMKS1是一个细胞核定位蛋白质。定量RT-PCR分析结果显示,菌核病菌(核盘菌)、甲基茉莉酸以及苯丙噻重氮强烈诱导BnMKS1的表达,而脱落酸对其表达没有影响。说明BnMKS1在油菜对菌核病菌Sclerotinia.sclerotiorum的防卫反应中起作用。这些结果将为进一步深入研究BnMKS1在油菜与核盘菌相互作用中的功能提供有用的信息。

甘蓝型油菜BnMPK3的序列分析及其对环境信号的响应

为了分析油菜MAP激酶3对各种环境胁迫信号的表达响应,以甘蓝型油菜中双9号为试材,采用同源克隆法克隆了甘蓝型油菜MAP激酶3基因(Bn MPK3)的c DNA序列。序列分析表明,Bn MPK3编码一条370个氨基酸残基的蛋白序列,这个序列含有1个高度保守的TEY磷酸化位点和一个CD锚定区域,与At MPK3的序列相似性达到94%。烟草瞬时表达分析显示,Bn MPK3是1个细胞核定位蛋白;荧光定量PCR分析显示,Bn MPK3在茎以及花和叶组织器官中特异性表达,并且对Na Cl溶液、4℃低温、PEG溶液和K2Cr2O7溶液以及甲基茉莉酸(Me JA)和乙烯前体(ACC)等的处理显著上调表达。结果表明,Bn MPK3是高盐、低温、干旱、重金属以及JA和ET等各种环境胁迫因子的响应基因,建议Bn MPK3可能在调控油菜对各种环境胁迫防御的过程中位于JA和ET相关的信号网络中,数据将为进一步研究Bn MPK3在油菜抗逆中的功能及其机制提供理论线索。

二株产壳聚糖酶海洋微生物的筛选和鉴定

采用不同培养基对海水养殖场环境样品进行壳聚糖酶产生菌的分离,结果表明海水培养基对于菌株筛选有显著的促进作用,同时甲壳类外壳是壳聚糖酶产生菌的良好来源。KJT-A和KJT-D是从海水养殖场蟹壳表面分离到的两株壳聚糖酶产生菌株,结合形态学观察、生理生化反应和分子生物学鉴定,初步确定菌株KJT-A和KJT-D分别为假单胞菌属(Pseudo-monas)和青霉属(Penicillium)。同时分析了不同温度、盐度对两株菌株生长的影响。