高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中氟罗沙星浓度及其药代动力学研究(英文)

目的建立测定人血浆中氟罗沙星浓度的高效液相色谱方法，并用于其药代动力学研究。方法氟罗沙星血浆样品经甲醇沉淀蛋白后直接进样。色谱柱为Diamonsil C18柱，流动相为1％三乙胺（磷酸调pH至4．8）／乙腈（80／20，V／V），流速1．0mL·min^-1。采用荧光检测器，激发波长290nm，发射波长458nm。氟罗沙星药代动力学研究采用双周期交叉试验设计。结果氟罗沙星血浆浓度在0．025～8．00μg·L^-1范围内线性关系良好，低、中、高浓度质控样品的日内、日间精密度不超过5．16％，方法精密度99．1％～100．9％，提取回收率86．7％～92．0％。健康志愿者口服400mg氟罗沙星试验及参比制剂后主要药代动力学参数分别为：Cmax5．08±0．78和5．38±1．40μg·mL^-1，tmax 1．72±0．79和1．82±0．78h，t1/2 11．68±1．27和11．38±1．51h^-1，AUC0-∞ 78．44±11．44和76．53±13．24μg·mL^-1·h。结论该方法灵敏度高、定量准确，适用于氟罗沙星人体药代动力学研究。

高效液相色谱荧光检测法测定健康志愿者血浆中氟罗沙星

目的建立测定人血浆中氟罗沙星浓度的高效液相色谱方法，并用于其药代动力学研究。方法采用加替沙星为内标，血浆样品经甲醇沉淀蛋白后直接进样。色谱柱为Diamonsil C18柱，流动相为1％三乙胺-磷酸缓冲液（pH4．8）／乙腈（80／20，V／V），流速1．0mL·min^-1。采用荧光检测器，激发波长290nm，发射波长458nm。结果氟罗沙星血浆浓度0．025～8．00μg·L^-1范围内线性关系良好（W=1／x，r=0．9999），低、中、高浓度质控样品的日内、日间精密度不超过5．16％，方法精密度99．1％～100．9％，提取回收率86．7％～92．0％。氟罗沙星血浆样品实验条件下均稳定。结论该方法灵敏度高，定量准确，适用于氟罗沙星人体药代动力学研究。

单硝酸异山梨酯脉冲控释微丸的制备及体外释药影响因素的研究

制备单硝酸异山梨酯脉冲控释微丸并对影响释药的因素进行考察。采用挤出滚圆法制备载药丸芯,以水溶胀性材料为内包衣溶胀层,乙基纤维素水分散体为外包衣控释层制备脉冲控释微丸,并考察溶胀层材料类型、溶胀层和控释层包衣增重、介质pH值等对药物释放的影响。结果表明,该包衣微丸可脉冲释药,药物释放情况不受pH值的影响,低取代羟丙基纤维素与羟丙基甲基纤维素以一定比例混合作为内包衣层,乙基纤维素水分散体为外包衣层制备的脉冲控释微丸,当内包衣层增重为15%和外包衣层增重为13%时,达到了时滞为5h、时滞后1.5h累积释药80%以上的脉冲释药效果。

胸腺五肽对黑色素瘤细胞诱导的肿瘤浸润树突状细胞激活作用观察

目的观察胸腺五肽(TP5)对黑色素瘤细胞诱导的肿瘤浸润树突状细胞(TIDCs)的激活作用。方法将对数生长期的黑色素瘤细胞株B16在无血清培养基中培养24 h,收集上清即B16细胞条件培养基;从BALB/c小鼠股骨中收集细胞悬液,加入IL-4、重组鼠粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和50%B16细胞条件培养基诱导培养,倒置相差显微镜拍照鉴定TIDCs。分别将0、10、20、40μmol/L的TP5加入TIDCs中,记为0μmol/L组、10μmol/L组、20μmol/L组、40μmol/L组,37℃共同孵育48 h,分离出TIDCs细胞和上清液。取收集到的TIDCs细胞,加入荧光标记的CD11c、CD86及MHCⅡ抗体,用流式细胞仪检测TIDCs表面成熟标记分子CD11c、CD86、MHCⅡ。取TIDCs细胞上清液,按ELISA试剂盒说明书测定IL-2和IL-10。向TIDCs细胞培养皿中加入FITC标记的1μg/m L的TP5溶液200μL,激光共聚焦显微镜下观察TP5与TIDCs的结合情况。结果倒置相差显微镜低倍镜下可见细胞聚集成集落的细胞群,呈半贴壁状态;高倍镜下可见细胞已经呈现典型的树突状形态,有的细胞出现短的出芽状突起,有的细胞已经出现长长的突起,提示TIDCs诱导培养成功。与0μmol/L组相比,40μmol/L组TIDCs中CD11c、CD86、MHCⅡ、IL-12的表达量升高(P均<0. 05),IL-10的表达量降低(P <0. 05);与10μmol/L组和20μmol/L组相比,40μmol/L组TIDCs中CD86、IL-12的表达量升高(P均<0. 05)。激光共聚焦显微镜下可见,TIDCs的细胞核呈椭圆形,FITC标记的TP5分布在细胞核周围,提示TP5结合在TIDCs的细胞膜上及胞浆中。结论 TP5可促进TIDCs表面成熟标志分子CD11c、CD86及MHCⅡ的表达,促进TIDCs分泌IL-12及抑制IL-10的分泌,表明TP5能够激活免疫活性受抑制的TIDCs的抗原递呈功能。

LC-MS/MS法测定血浆中马来酸甲麦角新碱及其人体药代动力学研究

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中甲麦角新碱浓度,对肌注0.2 mg马来酸甲麦角新碱注射液后药动学进行研究。方法:以文拉法辛为内标,血浆以NaOH碱化后经乙酸乙酯液液萃取浓缩后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为CAPCELL CORE C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),流动相为甲醇(0.05%乙酸)-水(5 mmol·L^(-1)乙酸铵,0.05%乙酸)(65∶35);采用质谱检测法,多反应监测(MRM)方式监测m/z 340.2→m/z 208.1(甲麦角新碱)和m/z 278.3→m/z 215.1(内标文拉法辛)。结果:建立的LC-MS/MS法在0.025~10 ng·mL^(-1)范围内甲麦角新碱色谱响应与浓度相关性良好,定量限为0.025 ng·mL^(-1),日内、间精密度RSD均小于7%,准确度在96.7%~112.4%,方法稳定性较好。16名受试者单次肌注0.2 mg马来酸甲麦角新碱注射液后AUC_(0-8)为(12.165±3.345)ng·mL^(-1)·h,AUC_(0-∞)为(12.900±3.800)ng·mL^(-1)·h,C_(max)为(4.707±2.541)ng·mL^(-1),t_(max)为(0.577±0.251)h,t_(1/2)为(1.831±0.457)h,MRT为(2.412±0.246)h,CL为(16.925±5.281)L·h^(-1),V_d为(43.183±14.041)L。结论:该法灵敏准确,简便易行,适用于低剂量甲麦角新碱血药浓度的测定及其药代动力学研究。研究结果显示马来酸甲麦角新碱注射液肌注后吸收较快,0.5 h左右达峰;部分受试者用药后发生恶心、呕吐及头痛等不良事件,但程度均为轻微。

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中硫辛酸

目的：建立LC-MS/MS法测定人血浆中硫辛酸浓度,并对口服0.2 g硫辛酸分散片后的药代动力学进行研究。方法：血浆样品以萘普生为内标,经乙腈沉淀蛋白后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相分离系统,色谱柱为Venuseil XPB C18柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为乙腈-10 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸（80∶20∶0.2）;采用质谱检测系统,ESI离子源,负离子模式,多反应监测（MRM）方式监测m/z 205→m/z 171（硫辛酸）和m/z 229→m/z 170（萘普生,内标）。结果：建立的LCMS/MS法在2.500-5 000 ng·m L^-1质量浓度范围内,硫辛酸色谱响应与质量浓度相关性良好,定量下限为2.500 ng·m L^-1;批内及批间精密度RSD均小于7%,准确度在96.5%-101.6%。12名受试者单次服用0.2 g硫辛酸分散片后AUC0-t为（1 816±885.6）ng·m L^-1·h,AUC0-∞为（1 837±879.6）ng·m L^-1·h,Cmax为（3 432±2 410）ng·m L^-1,tmax为（0.45±0.44）h,t1/2为（0.45±0.18）h,MRT为（0.73±0.31）h,CL为（133.2±66.63）L·h-1,Vd为（85.60±50.98）L。结论：本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中硫辛酸浓度的测定及其药代动力学研究。

LC-MS/MS法测定血浆中米非司酮及低剂量人体药代动力学研究

目的：建立LC-MS/MS法测定人血浆中米非司酮浓度,并对口服10 mg米非司酮片后的药代动力学进行研究。方法：血浆样品以他达那非为内标,经乙腈沉淀蛋白后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为Sun Fire C18柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,流动相为10 mmo L·L-1醋酸铵溶液-乙腈-甲酸（20∶80∶0.2）;采用质谱检测系统,ESI离子源,正离子模式,多反应监测（MRM）方式监测m/z 430→m/z 372（米非司酮）和m/z 390→m/z 268（内标他达那非）。结果：米非司酮质量浓度在1.0-1 000.0 ng·m L-1范围内与色谱响应相关性良好,定量下限为1.0 ng·m L-1。批内及批间精密度RSD均小于9%,准确度在91.0%-107.6%。20名受试者单次服用10 mg米非司酮片后AUC0-96 h为（4 198.2±1 792.8）ng·m L-1·h,AUC0-∞为（4 384.2±1 880.1）ng·m L-1·h,Cmax为（476.4±223.1）ng·m L-1,tmax为（1.04±0.80）h,t1/2为（20.61±6.50）h,MRT为（21.46±4.32）h,CL为（2.7±1.1）L·h-1,Vd为（75.9±28.0）L。结论：本测定方法灵敏准确,简便易行,适用于服用低剂量米非司酮后血药浓度的测定及其药代动力学研究。研究结果显示米非司酮片口服后吸收较快,1 h左右达峰值;受试者用药后无不良事件发生,安全性较高。

LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中氯马斯汀浓度,并进行其药代动力学和生物等效性研究。方法:血浆样品以苯海拉明为内标,经提取溶剂[正己烷-二氯甲烷-异丙醇(30∶20∶1)]萃取后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为Inertsil Hilic C18柱(150 mm×3.0 mm,5μm),流动相为乙腈10 mmo·lL-1醋酸铵溶液)-甲酸(40∶60∶1)。采用质谱检测系统,ESI离子源,正离子模式,多级反应监测(MRM)方式,m/z344→215(氯马斯汀),m/z256→167(内标,苯海拉明)。结果:在0.01～5.0 ng·mL-1范围内,氯马斯汀血药浓度呈良好的线性关系(r=0.9972),精密度RSD%均小于10%,准确度在90.8%～102%。结论:本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中氯马斯汀浓度的测定。

单剂量和多剂量硫辛酸分散片在中国健康受试者体内的药代动力学研究(英文)

评价单剂量和多剂量硫辛酸分散片在12名健康受试者体内的药代动力学特点。单剂量试验采用3×3拉丁方试验设计,受试者分别服用0.2、0.3和0.4 g的硫辛酸分散片,评价硫辛酸药代动力学参数的剂量相关性;多剂量试验中,受试者连服7天硫辛酸分散片(0.3 g/day),评价多次用药后药代动力学特点。结果显示,硫辛酸基本符合两室模型特点,在0.2–0.4 g范围内,硫辛酸AUC具有明显剂量相关性,而Vd/F,CL/F,MRT,t1/2和tmax在各剂量组间无显著性差异。多次用药后,硫辛酸主要药代动力学参数与单次同剂量组无显著性差异,药物在体内无蓄积。

贝利司他合成路线图解

贝利司他（belinostat,1）,化学名为N-羟基-3-（3-苯基氨基磺酰基苯基）丙烯酰胺（CAS登记号为414864-00-9）,别名PXD101,是一种组蛋白脱乙酰化酶抑制剂,由Spectrum生物医药公司开发,于2014年7月4日被美国FDA批准上市,用于治疗T细胞淋巴瘤,其商品名为Beleodaq。

HPLC-MS法测定人血浆中伊托必利浓度

目的建立高效液相-质谱法测定人血浆中伊托必利浓度。方法以盐酸伊托必利-d6为内标,血浆经液液萃取后,用高效液相-质谱进行分离。液相色谱分离系统,选用UMISILTM C18色谱柱(4. 6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(0. 1%甲酸-10 mmol·L^-1乙酸铵)=59∶41。用质谱监测系统,电喷雾离子源(ESI),正离子分析模式,伊托必利m/z 359. 2,内标盐酸伊托必利-d6m/z 365. 2。10例受试者单剂量口服盐酸伊托必利片后采集血浆样品,以HPLC-MS法测定血浆中伊托必利的浓度。结果伊托必利质量浓度在2. 50~500. 0 ng·mL^-1线性关系良好,定量下限2. 50 ng·mL^-1,归一化后基质效应在102%~107%,日间、日内、室温稳定性及长期稳定性精密度RSD均小于15%,方法稳定性良好。药代动力学结果显示,健康志愿者单次口服盐酸伊托必利50 mg后,主要药代动力学参数Cmax为(287. 3±76. 3) ng·mL^-1,Tmax为(1. 2±0. 3) h,AUC0-24 h为(746. 8±157. 8) ng·mL^-1·h,AUC0-∞为(760. 0±152. 3) ng·mL^-1·h,t1/2为(4. 4±1. 4) h。结论本方法灵敏度高,操作方便,耗费时间较短,适用于伊托必利人体内药物浓度检测以及药代动力学研究。

盐酸黄酮哌酯片在健康人体的药代动力学研究

目的研究盐酸黄酮哌酯片在健康人体的药代动力学。方法20名健康受试者单次口服盐酸黄酮哌酯200 mg,用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆中3-甲基黄酮-8-羧酸(3-methylflanone-8-carboxylic acid,MFCA)浓度,用DAS 2.1.1软件计算药代动力学参数。结果血浆中MFCA的主要药代动力学参数如下:Cmax为(8.40±3.33)μg·mL^-1,AUC0-t为(17.59±4.88)μg·mL^-1·h,AUC0-∞为(17.76±4.91)μg·mL^-1·h,Tmax为(1.26±0.45)h,t1/2为(1.86±0.56)h。结论建立的HPLC法灵敏准确,操作简便,适用于MFCA血药浓度检测及盐酸黄酮哌酯药代动力学研究。

热熔制粒在口服固体制剂中的应用

目前,多种不同的热熔制粒方法在颗粒剂、片剂、胶囊剂等口服固体制剂的制备中得以应用。本文综述了热熔制粒法的特点、设备、黏合剂、应用、发展趋势、产业化的关键问题及解决途径,重点介绍了具有不同溶解性、起关键作用的低熔点黏合剂。