通过cDNARDA法分离和识别盐藻(Dunaliella salina)盐胁迫相关基因

采用cDNA代表性差异分析 (RDA)技术 ,对盐藻在盐胁迫时差异表达的基因进行了分离鉴定 .在分离到的 10个基因中 ,有 5个与已知基因同源 (包括叶绿素a b结合蛋白基因、蛋白磷酸酶I催化亚基基因和 3个核糖体蛋白基因 ) ,还有 5个未知功能基因则是首次在盐藻中被分离 .值得注意的是 ,所有这 5个已知基因的功能都与细胞分裂或盐胁迫有关 .结果表明 :取样时盐藻细胞仍处于恢复阶段 ,所分离到的基因对于盐藻耐盐可能具有重要意义 ;蛋白磷酸酶I的下调表达可能是盐藻调节离子平衡的一个重要过程和细胞分裂受阻的原因所在 ;盐藻减缓细胞分裂速度可能是为了减少能量消耗 ,以留出足够的能量来应对盐胁迫 ;其它 5个未知基因可能也与盐藻适应盐胁迫机制有关 .

一种适用于盐生植物的RNA提取方法

介绍了一种红树ＲＮＡ提取方法，此法无需特殊试剂和贵重仪器设备，可有效地排除红树细胞中大量存在的胶质和多糖类物质的干扰，所得ＲＮＡ样品经紫外分光光度计检测和１％琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度和完整性，可满足多数分子生物学实验的需要，尤其适用于提取多糖含量较高的植物细胞的ＲＮＡ．

盐藻线粒体GIY-YIG族归巢内切酶基因受到盐胁迫时增强转录

盐藻 (Dunaliellasalina (Chlorophyta) )极强的耐盐能力使之成为研究植物耐盐分子机制的重要模式生物 .在前期分离到的一个盐藻基因片段在盐胁迫时增强表达的基础上 ,通过RACE获得了该基因 5′端cDNA序列及部分 3′端cDNA序列 .序列分析结果表明 ,该基因是一个编码线粒体GIY YIG族归巢内切酶的Ⅰ型内含子基因 .RNase freeDNase处理及Northern杂交结果表明 ,盐藻线粒体DNA在盐处理组中可能发生了扩增 .这些结果结合前人的研究成果说明 ,该内含子基因的增强表达可能并非盐藻对抗盐胁迫的一种手段 ,而是盐藻对抗盐胁迫的副产品 .被该内含子基因插入的基因是盐藻对抗盐胁迫所需要增强表达的 .

对代表性差异分析方法的改进

对常用的代表性差异分析(RDA)方法进行了改进.利用模式系统进行的实验结果表明:改进后的RDA方法不仅保留了原有的优点,而且大大降低了实验成本,简化了实验操作,只需1周即可完成原本需要3周的实验操作,增强了该技术的实用性.

红树植物秋茄中液泡膜内在蛋白(TIP)全长cDNA的克隆和表达分析(英文)

利用cDNA快速末端扩增 (RACE )技术获得红树植物秋茄液泡膜内在蛋白 (TIP)的全长cDNA (GenBank登录号 :AF5 2 1135 )。该cDNA全长为 1 1kb ,含有一个 75 6个核苷酸的完整开放阅读框 ,编码 2 5 2个氨基酸 ,等电点为5 77,分子量为 2 6 3kD。该氨基酸序列含有 6个跨膜区和两个高度保守的Asparagine proline alanine (NPA)基序。与冬葡萄、花椰菜、拟南芥的TIP相比 ,氨基酸的一致性达到 77%～ 79%。Northern分析表明盐分抑制该基因在红树 3个种中的表达 ,这种下调表达可能降低液泡膜水分渗透 ,有利于盐胁迫下细胞的保水。

分离差异表达基因的方法

了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况 ,可以为研究生命活动过程提供重要信息。以差别筛选 ,扣除杂交等基本方法为出发点 ,研究基因表达差异的方法不断完善 ,先后出现了DDRT PCR ,RDA ,SSH ,cDNA微阵列 (基因芯片 )等技术。这里着重对这些方法的优缺点及改进进行了论述和评介 ,并对技术的发展趋势进行了分析。

浅谈企业会计错弊的防范

本文对企业会计错弊的防范问题进行了简要分析。

浅议如何完善企业内部控制制度

我国社会市场经济的快速发展,给企业带来了空前的发展机会,同时也伴随着一定的风险。这种风险不仅来自于企业外部,也来自于企业自身内部。而且我国经济的发展同世界经济的发展紧密联系。当全球经济普遍向好的情况下,我国经济也快速发展。然而,伴随着席卷全球的金融危机,我国经济也受到影响。这种影响必然波及到我国许多相关行业和企业,这些企业能否经得起市场考验而生存下来,还得靠企业自身的实际能力。企业除了调整投资战略,多渠道筹资,不断加强企业资金管理,严格控制成本费用外,更重要的是企业是否建立健全完善的企业内部控制体系并得以有效实施,全体职工能否齐心协力完成企业经营战略目标,为企业争得继续发展的空间。安然、世通等公司财务舞弊和会计造假的发生,以及国内许多由于内部管理失控倒闭的企业,足以说明内部控制存在缺陷是导致企业经营失败的重要原因。