昆明山海棠根部水提液诱导HL-60细胞凋亡及对c-Myc基因表达的调控(英文)

目的 研究昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum(Celastraceae) (THH)根部水提液对早幼粒白血病HL- 6 0细胞凋亡的诱导作用及机制。方法 通过特征性的形态学观察 ,Annexin- V标记 ,以及流式细胞仪检测中次G1 峰的形成确定 THH的诱导细胞凋亡作用 ;应用 Western Blotting研究 THH对 c- Myc蛋白表达的影响。结果THH根部水提液可诱导早幼粒白血病 HL - 6 0细胞凋亡。在浓度高于 18μg/ m L时 ,THH对 HL - 6 0细胞的诱导凋亡作用呈现浓度与时间的相关性。在 THH处理 2～ 4 h后 ,癌基因蛋白 c- Myc表达降低 99%以上。结论 THH抑制了 c- Myc蛋白的翻译或后翻译过程 ,从而降低了 c- Myc在细胞周期运转中的作用 。

DNA芯片技术用于贝母的基因分型和种类鉴别(英文)

目的 通过对贝母几个种遗传多态性的研究来开发在分子水平上用于鉴别贝母基因型及不同种类的DNA芯片技术。方法 用PCR扩增法和DNA直接测序法确定核苷酸多态性 ,用DNA芯片进行基因检测。结果 首先提取来自多种贝母根茎的基因组DNA ,对 2 6SrDNA基因D2与D3区的多态性片段进行扩增和测序 ,然后将不同种属多态性片段的特异性寡核苷探针点置于经多聚赖氨酸处理包被的芯片。用来自不同种贝母的荧光素标记的PCR产物与DNA芯片进行杂交 ,可在芯片特定位置检测到不同种贝母的荧光信号。结论 本研究显示DNA芯片技术可为植物种属的验证与质量控制提供一种快速。

HPLC/MS/MS技术在中药白花前胡成分鉴定中的应用

目的 :建立一种白花前胡有效的质量控制方法。方法 :白花前胡药材甲醇超声提取 ,采用HPLC/MS/MS联用方法分析。色谱柱为AlltamiC 18(4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ;流动相为甲醇 水 (75∶2 5 ) ;紫外检测波长为 32 0nm ;离子源 :ESI。结果 :鉴定了白花前胡中的 8个香豆素类化合物 ,其中一个化合物首次从白花前胡中发现。结论

先天和后天感染鸭乙肝病毒的广州麻鸭外周血中病毒血症的动态比较及应用

为寻求较理想的动物乙型肝炎模型，在研制成功广州麻鸭乙型肝炎模型基础上，比较先天和后天感染鸭乙肝病毒的广州麻鸭外周血中病毒血症的差异。方法是采用斑点杂交方法（ｄｏｔｂｌｏｔ）检测了广州麻鸭先天和后天感染鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）后外周血中ＤＨＢＶ－ＤＮＡ的动态。结果：先天感染的广州麻鸭外周血中病毒血症水平较高，出生后（即感染后）２６ｄ时ＤＨＢＶ－ＤＮＡ下降到一较低的水平，７２ｄ时仍维持较低水平。出生后１ｄ感染ＤＨＢＶ的广州麻鸭，感染后９ｄ时血中开始出现低水平的ＤＨＢＶ－ＤＮＡ，１１ｄ时达到高峰，之后逐渐下降，２６ｄ时下降到一较低的水平，到７２ｄ时仍维持低ＤＨＢＶ－ＤＮＡ水平。并采用后天感染ＤＨＢＶ的广州麻鸭作为鸭乙肝模型筛选抗乙肝中草药，以无环鸟苷为阳性对照药，蒸馏水为阴性对照药，发现每次阳性对照组和阴性对照组均成立，证明该模型重复性良好。并发现台湾单纯叶下珠、虫草和树舌均有降低ＤＨＢＶ－ＤＮＡ的作用。

三种叶下珠属植物在体外细胞培养中抗HBV作用的初步研究

对３种叶下珠属植物的水提物在２２１５细胞培养中抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用进行了初步观察。结果显示：３种药物在６．２５ｇ／Ｌ加药后第５天，苦味叶下珠对２２１５细胞ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ分泌的抑制率分别为５７．７９％和５５．００％，黄珠子草为６４．６２％和６１．５１％，新发现的珠子草延益亚种为４４．３２％和２．９８％。提示苦味叶下珠和黄珠子草在体外细胞培养第５天中对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的分泌均有较好的抑制作用。

基因芯片分析显示昆明山海棠有机萃取液经NF- κB及线粒体信号传导途径诱导HL- 60细胞凋亡(英文)

目的 研究中草药昆明山海棠 Tripterygium hypoglaucum( THH)有机萃取液诱导人早幼粒白血病 HL-6 0细胞凋亡过程的信号传导通道及分子机制。方法 应用流式细胞仪研究了 THH有机萃取液诱导 HL - 6 0细胞的凋亡过程 ,并应用包含 3 0 0 0人类基因与 EST的基因芯片进行基因表达差异分析。结果 基因芯片杂交结果显示有 16个基因表达发生大于 2倍的显著变化 ,这些基因同细胞生长 ,细胞周期调控 ,细胞分化 ,以及压力反应有关。部分基因在细胞凋亡过程中起关键作用 ,如 Caspase3和 Caspase8。结论 THH有机萃取液诱导 HL- 6 0细胞凋亡 ,该过程与 NF- κB和线粒体信号传导途径有关。

薇甘菊化学成分研究

采用硅胶柱色谱分离并结合Sephadex LH-20分离纯化方法,研究薇甘菊(Mikania micrantha H．B．K)地上部分的化学成分,通过理化鉴定和NMR等波谱法进行分析鉴定其化学结构．结果表明,在石油醚部位分离得到2个倍半萜类化合物,结构鉴定为deoxymikanolide(I)和dihydromikanolide(Ⅱ);正丁醇部位分离得到3个黄酮类化合物、1个甾醇类化合物和1个有机酸,结构分别鉴定为mikanin(Ⅲ),eu- palitin(Ⅳ),豆甾醇-β-D-葡萄糖苷(V),3,4’,5,7-tetrahydroxy-6-methoxyflavone 3-O-β-D-glucopyranoside (Ⅵ)和绿原酸(VII)．豆甾醇-β-D-葡萄糖苷和绿原酸为首次从该植物分离得到．

叶下珠复方体内抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究

分别给鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）实验感染的广州麻鸭和樱桃谷鸭灌服叶下珠复方，前者两个剂量组分别为１０ｇ／ｋｇ和５ｇ／ｋｇ，后者为１０ｇ／ｋｇ，１天２次，连续给药１４ｄ，并设病毒模型组和无环鸟苷治疗组作为对照。结果显示，该复方在两种鸭乙肝模型中给药后７天及停药后５天血清ＤＨＢＶ－ＤＮＡ水平自身比较均有降低，提示叶下珠复方对鸭乙肝病毒的复制有一定的抑制作用。

叶下珠治疗乙型病毒性肝炎研究的简况及其发展策略

从品种资源、实验研究、临床应用多个方面介绍苦味叶下珠及普通叶下珠的研究概况，提出叶下珠发展的几点设想。

紫杉醇诱导人乳腺癌M CF-7细胞周期阻断及凋亡的基因表达谱分析(英文)

目的研究紫杉醇诱导人MCF-7细胞周期阻断及凋亡的分子机制。方法用流式细胞仪分析紫杉醇对MCF-7细胞周期变化的影响,用自制的含9 984个已知基因和EST的高密度基因芯片检测MCF-7细胞在不同浓度紫杉醇作用下的基因表达变化。结果MCF-7细胞在100 nmol.L-1紫杉醇作用24 h,流式细胞仪结果显示77.8%细胞阻断在G2/M期和1.3%细胞发生凋亡;基因表达谱分析发现:在12.5 nmol.L-1(IC50)及100 nmol.L-1紫杉醇作用下,分别有27及77个基因差异表达。结论紫杉醇可诱导MCF-7细胞周期阻断在G2/M期并引起部分细胞凋亡,该作用与药物浓度有关。基因表达谱分析显示部分差异表达基因参与细胞微管及骨架结构、细胞周期调控、以及DNA损伤修复和凋亡过程。

广州地区3个鸭种1日龄雏鸭垂直感染鸭乙肝病毒调查

鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）与人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）同属嗜肝ＤＮＡ病毒科，ＤＨＢＶ感染的鸭，可造成为较好的ＨＢＶ动物模型和作为嗜肝病毒科分子病毒学研究的材料。为查明不同鸭种的垂直感染情况，本文采用斑点杂交方法对广州地区３个主要鸭种１日龄雏鸭携带鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）进行了调查，广州麻鸭１日龄ＤＨＢＶＤＮＡ阳性率为１４／５０（２８％），樱桃谷鸭１日龄为２／１０（２０％），野水鸭１日龄为８／１０（８０％）。提示野水鸭垂直感染率最高，对追踪ＤＨＢＶ基因同源性和基因变异提供了良好的材料。

榄形风车子叶中萜类化合物的研究

使君子科植物是分布于热带和亚热带的灌木和乔木，美洲和澳洲也有少量分布。风车子属Combretum L．是全科中最大的两属之一。我国有13种，分布在我国的广东、广西、海南和云南地区。风车子属植物的根、茎、叶、花和种子均可作为药用部位。已知该属植物中有25个种在非洲和印度被用于治疗麻风病和癌症等，在亚洲的不同地区被当做民间药广泛用于治疗肝炎、痢疾、呼吸道感染甚至癌症。据有关文献报道，风车子属植物具有保肝、抗炎、杀菌、抗癌和抗艾滋病等作用。

杂交瘤细胞培养的优化

根据杂交瘤细胞培养中单克隆抗体生产的动力学原理，采用灌注培养方式、添加醋酸钾和丰富营养物培养的途径，对反应器放大培养过程进行了优化。每天灌注１／２反应器工作体积，与分批培养相比，细胞密度由４５×１０５／ｍｌ提高到１１×１０５／ｍｌ，单抗浓度由１９ｍｇ／Ｌ提高到２８ｍｇ／Ｌ；添加１ｇ／Ｌ醋酸钾，细胞密度基本保持不变，但单抗浓度增加到３８μｇ／ｍｌ；用丰富营养物培养后，细胞密度和单抗浓度分别进一步提高到４２×１０５／ｍｌ和９４ｍｇ／Ｌ。抗Ｂ型红细胞单抗的血凝滴度，由分批培养的１：３２，最终提高到１：２５６。

全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞分化的机制(英文)

目的 研究全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病HL 6 0细胞分化机制。方法 用流式细胞仪分析维甲酸对HL 6 0细胞周期变化的影响 ,用自制的含 9984个已知基因和EST的高密度基因芯片检测HL 6 0细胞在维甲酸诱导作用下不同时期的基因表达变化。结果 HL 6 0细胞在 1μmol·L- 1 维甲酸持续作用 2 ,4和 6d时 ,流式细胞仪结果显示 4 8%～ 73%细胞阻断在G0 G1 期 ;基因表达谱分析发现 ,黏附分子、组织重建蛋白、转运蛋白、核蛋白体蛋白和涉及氧化酶激活途径的基因表达明显升高。结论 基因表达谱的研究结果表明 ,维甲酸作用HL 6 0细胞与氧化酶激活途径及组织重建蛋白的表达相关联 ,并揭示了一些已知和未知功能的基因在HL 6 0细胞分化与细胞凋亡过程中的作用。

苦味叶下珠中多酚类成分的HPLC/MS/MS研究

目的:建立苦味叶下珠中多酚类成分HPLC/MS/MS的测试方法。方法:利用RP-HPLC线性梯度洗脱筛选最佳测试条件,并应用LC/MS/MS技术指认图谱中的主要色谱峰。结果:获得了较为理想的苦味叶下珠多酚类成分HPLC/MS图谱,其中9个色谱峰被指认。结论:用文中的最佳分离条件可较全面地反映苦味叶下珠中的多酚类成分,为苦味叶下珠药材的质量控制提供有效手段。

叶下珠复方治疗慢性乙型肝炎的临床观察

采用叶下珠复方治疗慢性乙型肝炎３０例，并与干扰素α１ｂ治疗２５例对照观察，结果２组治疗总有效率分别为８３３％和８００％，差异无显著性意义（Ｐ＞００５）。叶下珠复方组ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阴转率与干扰素组比较，差异无显著性意义（Ｐ＞００５）。但肝功能ＡＬＴ、Ａ／Ｇ、ＳＢ的复常率均优于干扰素组（Ｐ＜００５）。

狭瓣鹰爪花的生物碱成分研究

目的:研究海南狭瓣鹰爪花茎的生物碱成分。方法:生药用70%乙醇提取,提取物酸水溶解,酸水液氨水碱化后氯仿萃取,氯仿部位用硅胶柱色谱等色谱方法分离纯化,NMR等波谱法进行结构鉴定。结果:分离得到了8个生物碱类化合物,结构鉴定为spinosine(1),3-hydroxynornuciferine(2),juzirine(3),artabotrine(4),liridine(5),assim-ilobine(6),isococlaurine(7),-Ndemethylarmepavine(8)。结论:上述化合物均为首次从该植物中分得,化合物1,3,7,8为首次从该属植物分得。

珠子草新亚种的发现和鉴定

我们在海南省三亚市发现珠子草一个新的亚种，由于其顶端丛生且能“延长”肝细胞生长并“有益”于防止纤维母细胞增生的作用，故定名为珠子草延益亚种。