检测微囊藻毒素合成酶基因mcyH的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法的建立

利用RT-PCR方法从铜绿微囊藻PCC7806 mcy基因中扩增出目的基因片段,用TA克隆方法将基因片段插入pGEMT-T Easy中来制备质粒标准品.通过不同连续稀释倍数的质粒标准品成功构建了16srRNA和mcyH两基因的标准曲线,该法构建的两基因标准曲线r2分别为0.9916和0.9938,且质粒标准品具有较好的重复性,满足实时荧光定量RT-PCR的要求.

脑区硫胺素缺乏对AD模型小鼠脑神经元线粒体功能的影响

目的：检测阿尔茨海默病（AD）模型小鼠脑区硫胺素缺乏后,电压依赖性阴离子通道蛋白1（VDAC1）和细胞色素C（cytochrome C）蛋白表达的变化。方法：选用2~3月龄阿尔茨海默病模型小鼠（APP/PS1双转基因小鼠）和野生型（WT）小鼠,根据小鼠脑图谱用立体定位注射法在小鼠右海马齿状回,右前皮质脑区注射维生素B1拮抗剂,导致硫胺素缺乏（TD）。在TD处理后10 d进行动物行为学检测,TD处理后30 d应用免疫荧光、Western Blot及RT-PCR法检测VDAC1和细胞色素C在小鼠注射脑区蛋白的表达和分布并分析线粒体总DNA（mt DNA）的变化。结果：TD处理后APP/PS1小鼠和WT小鼠的主,被动规避行为与对照组相比有显著下降（P〈0.05）,两组小鼠注射脑区的VDAC1和细胞色素C呈现高表达（P〈0.05）,脑组织mt DNA总量增加（P〈0.05）。结论：硫胺素缺乏可以导致AD模型小鼠和野生型小鼠脑内线粒体功能发生改变。

规律运动影响AD模型小鼠脑内单羧酸转运蛋白表达并改善认知功能

目的:通过对不同月龄段的AD模型小鼠进行长时间的规律有氧运动训练,来进一步阐述单羧酸转运蛋白(MCTs)在中枢的表达改变与AD模型小鼠认知功能的关系。方法:选择2、6、10月龄的AD模型小鼠(APP/PS1双转基因小鼠)和WT小鼠(C57BL/6J),给予8周的游泳训练至4、8、12月龄作为实验组。同时选择未进行游泳训练的4、8、12月龄AD模型小鼠和WT小鼠做为对照组。采用Morris水迷宫进行行为学检测(隐蔽平台实验和空间探索实验),采用Western Blot检测脑组织匀浆中MCT1、MCT2、MCT4蛋白表达水平,采用免疫组织化学染色方法观察其大脑皮层和海马区MCT1、MCT2、MCT4的表达情况。结果:(1)Morris水迷宫结果显示:在隐蔽平台实验中,经过8周游泳训练后的小鼠在前两天内较对照组相比平均逃避潜伏期和逃避路程明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在空间探索实验中,实验组小鼠60 s内在目标象限停留的时间明显高于对照组小鼠(P<0.05)。(2)Western Blot检测8月龄实验组和对照组小鼠脑组织匀浆MCTs的表达量,结果显示:游泳训练后实验组AD模型小鼠和WT小鼠MCTs表达量较未训练小鼠相比显著增加(P<0.05)。(3)脑组织免疫组织化学染色结果显示:实验组中MCT1、MCT4在大脑皮层及海马区的表达较对照组升高(P<0.05);而MCT2表达水平在两组中没有显著性差异(P>0.05)。结论:长期的规律有氧运动增加了AD模型小鼠脑内不同亚型单羧酸转运蛋白的表达量,改善了中枢神经系统能量代谢状态,提高了认知功能。

三种肿瘤标志物对常见肿瘤诊断和预后的应用

目的:观察血清癌胚抗原(CEA)、血清铁蛋白(SF)和乳酸脱氢酶(LDH)联检对恶性瘤诊断和预后的作用。方法:106例恶性肿瘤患者血清 CEA、SF 用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,血清 LDH 同工酶用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析。结果:食管癌、肺癌和乳腺癌的阳性率分别达82%,91%和93%。结论:此三种指标联检可明显提高癌肿的诊断率和评价疗效。

大鼠背侧海马注射谷氨酸钠对脑干相关镇痛核团SOMmRNA表达的影响

目的 :探讨刺激大鼠背侧海马对脑干某些神经核团生长抑素SOMmRNA表达的影响 ,分析海马在痛调制中的作用机制。方法 :健康成年Wister大鼠 40只 ,随机分为 4组。A组 :正常对照组 ,B组 :疼痛组 ,以大鼠右侧后肢足底皮下注射 4g/L多聚甲醛 2 0 0 μl,作为疼痛模型。C组 :化学刺激组 :向痛模型动物海马内注射 0 .5 μlL 谷氨酸钠。D组 :生理盐水 :向疼痛模型动物海马内注射 0 .5 μl生理盐水。均于 12h后处死 ,常规灌注冰冻切片 ,采用地高辛标记反义RNA探针原位杂交 ,及计算机图像分析术 ,检测中脑导水管周围灰质 (PAG) ,中缝大核 (NRM )和外侧网状核 (LRN)SOMmRNA阳性神经元细胞个数及光密度等均值。结果 :疼痛刺激后PAG、NRM、LRN内SOMmRNA表达较正常明显增高 (P <0 .0 5 ) ,化学刺激组 ,PAG、LRN内SOMmRNA表达较疼痛组进一步增强 ,而NRM内SOMmRNA表达较疼痛组无明显变化。结论 :海马兴奋 ,引起PAG、LRN内SOMmRNA表达增加 ,因此 。

大鼠耳蜗核团向前庭终末器官的神经投射研究

目的利用顺行荧光示踪剂研究Wistar大鼠耳蜗核团向前庭终末器官的神经投射。方法 Wistar大鼠20只随机分为实验组和对照组2组,每组10只动物。顺行示踪剂组Wistar大鼠10只,10只动物在脑干耳蜗核团注射绿色顺行荧光示踪剂PHA-L,10只动物在脑干耳蜗核团注射生理盐水作为对照。5d后处死动物,获取耳蜗和前庭外周器官,EDTA脱钙后行迷路连续冰冻切片,在荧光显微镜下观察荧光细胞在前庭终末器官的分布。结果在Wistar大鼠脑干耳蜗核团注射绿色顺行荧光示踪剂PHA-L后在注射同侧听神经和前庭终末器官发现绿色示踪剂。结论 Wistar大鼠耳蜗核团存在向前庭终末器官的神经投射。

大鼠脑干前庭核团向大脑前庭皮层的投射研究

目的观察Wistar大鼠脑干前庭核团是否存在直接向大脑皮质的纤维投射。方法健康Wistar大鼠20只,随机分为实验组(10只)和对照组(10只)。实验组脑干前庭内、外侧核团注射绿色荧光标记的顺行示踪剂刀豆凝集素,对照组脑干前庭内、外侧核团注射生理盐水。5d后处死大鼠,行大脑连续冰冻切片,荧光显微镜下观察荧光细胞在大脑皮质的分布及形态。结果绿色荧光标记的神经元主要位于大脑皮质的前肢感觉区、后肢感觉区和本体感觉区。结论 Wistar大鼠脑干前庭核团存在直接向大脑皮质的纤维投射,部分和本体感觉区相重叠。

小鼠脊髓损伤后Aβ蛋白的表达与细胞凋亡

目的：观察小鼠急性脊髓损伤后不同时间点Aβ蛋白的变化与损伤周围区神经细胞的凋亡情况,进一步了解脊髓损伤后相关的病理生理变化。方法：130只昆明（KM）小鼠随机分为模型组60只、假手术组60只、对照组10只。模型组和假手术组均在脊髓胸8-12节段打开椎板,暴露脊髓。模型组采用改良Allen法打击脊髓后缝合伤口;假手术组打开椎板暴露脊髓后直接缝合。模型组和假手术组分别于2 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d六个时间点进行模型制作,脊髓损伤部位取材。对照组直接取相同脊髓节段,免疫荧光组织化学和Western Blot方法观察Aβ蛋白与细胞凋亡的变化。结果：脊髓损伤后模型组各个时间点的Aβ蛋白的含量和阳性细胞的数量较假手术组各时间点和对照组明显增加（P〈0.05）,模型组各个时间点的Aβ蛋白的含量和阳性细胞的数量随术后时间的增长而增加,3-7 d达到高峰,呈现一定的规律性。假手术组各个时间点的结果均无明显变化;细胞凋亡的百分比在脊髓损伤后随时间改变逐渐增加,模型组较对照组增加明显（P〈0.05）。结论：脊髓损伤后Aβ蛋白的表达随时间的变化呈规律性改变;细胞的凋亡具有相似的趋势。

银条中钯含量的不确定度评估

电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)可对银条中钯含量进行分析,该方法简便、快速。文章中,钯在银条中的含量通过该方法进行测定,并且钯含量的测量被建立了数学模型。通过分析、计算模型中各参数的不确定度,给出合成不确定度及扩展不确定度,银条中钯含量可以表示为50.8 mg/kg±2.0 mg/kg(k=2)。

我国钢铁行业资本结构与公司业绩关系的实证研究

钢铁行业属于重工业,对国家的经济发展产生重要影响。本文运用多元回归方法分析了2006—2008年我国钢铁行业中29家上市公司的资本结构及其经营业绩之间的关系。实证结果表明,钢铁行业中上市公司的成长能力、盈利能力和偿债能力越强,其资本结构中的负债比重越小;公司营运能力越强,其资本结构中的负债比重越大。此实证结果提供了一定的理论借鉴,有助于钢铁行业上市公司更好地调整资本结构的比重,提高业绩水平。

清洁压裂液技术在张海13-22L井中的研究应用

张海13-22L井为滩海张东地区的一口开发井,压裂难度大,对压裂液的性能要求比较严格,分析认清洁压裂液性能最好,主要特点是摩阻低、携砂好、对油气层的伤害小。因此决定张东地区沙二储层采用清洁压裂液技术,从张海13-22L井压裂情况可以证明这种清洁压裂液效果好,能够解除地层的严重污染,有效的改善了地层渗透能力,压裂后日注水量提高了100倍以上,为该地区的下步开发提供重要依据。

探究建筑工程中的大体积混凝土结构施工技术

近年来,随着我国城乡一体化进程的加快,建设项目数量逐渐增多,但城市区域有限。为了保证人们的生活质量,解决人均占用面积小的问题,建筑行业正在向更广泛的方向发展。对于土木工程来说,其质量安全是人们关注的内容,而实体混凝土结构的施工技术是直接影响人们生活质量的工程建设基础。因此,笔者结合自身多年工作经验,本文主要阐述了大体积混凝土施工的概念,分析了建筑工程中实体混凝土质量问题产生的原因,并提出了实体混凝土施工技术要点,所得文献与同行业人员共享,望对行业的前进起到一定的促进作用。

简论关于建筑工程施工技术及其现场施工管理

建筑工程对中国各行各业的发展和人民的日常生活和工作都有着举足轻重的作用。随着科学技术的不断发展,建筑工程水平进一步提高,对施工人员和现场管理人员提出了更高的要求。施工人员必须熟练掌握各种施工技术,现场管理人员必须加强对工程作业的监控和管理。笔者结合自身多年工作经验,本文分析了建筑工程场地的施工技术和施工控制,所得文献与同行业人员共享,望对行业的前进起到一定的促进作用。

应用KIMRAY自力式调节阀实现地面测试求产中的天然气回收

简述了自力式调节阀的工作原理。以文古3井为例,详述了自力式调节阀的应用情况。实例证明,在地面流程中,应用自力式调节阀的压力自动控制原理,可解决油气井测试、地面计量试采过程中天然气回收的问题。

园林景观中红叶石楠的开发应用分析

考虑到城市园林绿地景观相对单调,缺少常绿和彩叶树种,为此可以在园林景观中开发应用红叶石楠,红叶石楠是常绿小乔木品种,有其自身的生长特性、观赏形状,在园林景观中应用有较高的观赏性,更好地吸引人们的注意力,丰富园林景观的效果。

红枫栽培技术及园林实践分析

在新时期环境下,国家十分重视生态绿化工程建设,红枫作为一种具有显著特点的植株类型,凭借着其鲜明的色彩,较高的观赏价值,在园林建设中得到了广泛运用。针对红枫栽培技术及园林实践进行分析,希望为红枫栽培和园林运用提供参考。

大鼠传出性前庭神经元的定量研究

目的利用逆行荧光示踪剂研究前庭传出性神经元在脑干的分布、大小、数量和形态。方法 Wistar大鼠20只随机分为二组,实验组10只动物,在外周前庭注射红色逆行荧光示踪剂;对照组10只动物在外周前庭注射生理盐水。5d后处死动物,行脑干连续冰冻切片,在荧光显微镜及激光共聚焦显微镜下观察荧光细胞的分布、大小、数量及形态。结果 Wistar大鼠前庭传出神经元主要分布于双侧面神经膝的背外侧、内侧和桥脑网状结构核区,还有小部分位于面神经膝的腹侧;注射对侧脑干的细胞数目多于同侧。结论前庭传出性神经元在Wistar大鼠脑干呈散在分布。