大豆过敏原与低过敏原种质创新

食物过敏是一个全世界关注的公共卫生问题。如何降低大豆过敏原含量,保证大豆食品安全,已成为日益关注的问题。大豆种子过敏原包括种子储藏蛋白、结构蛋白和防御相关蛋白,其中7S球蛋白组分中的Gly m Bd 28K,Gly m Bd 30K及β-伴球蛋白的Gly m Bd 60K是3种主要的过敏原。目前通过对过敏原的理化性质、过敏原性和基因结构的认识,运用传统育种及基因工程技术等方法,在减少大豆的过敏原性方面已取得一定的进展。文章对大豆过敏原的类型及特性、3种主要过敏原的理化性质、基因结构以及低过敏原种质创新等方面的研究报道进行了综述。

氧化锌中毒患者中性粒细胞VCS参数分布特征及意义

目的观察氧化锌中毒患者中性粒细胞VCS参数,探讨其对氧化锌中毒鉴别诊断的临床意义。方法用LH-750血液分析仪检测120例氧化锌中毒患者、50例细菌感染患者及60例健康对照者的外周血中性粒细胞VCS参数,包括中性粒细胞平均体积(MNV)、中性粒细胞体积分布宽度(NDW)、中性粒细胞平均传导率(MNC)和中性粒细胞平均散射值(MNS)等。治疗前后分别检测氧化锌中毒患者的VCS参数。结果氧化锌中毒组MNV高于细菌感染组和健康人对照组,中毒组MNC低于细菌感染组和健康人对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01);MNC cut-off值<144.70时,鉴别诊断的敏感性为90.83%,特异性为98.33%,高于WBC计数和其他VCS参数;氧化锌中毒患者中WBC≥10.0×109/L组和WBC<10.0×109/L组MNC分别为140.05±4.26和138.87±5.87,二者差异无统计学意义(P>0.05);MNC在治疗3 d后回升。结论中性粒细胞参数MNC在氧化锌中毒时变化与形态学改变相符,在治疗后回升,可作为氧化锌中毒的诊断与治疗监测指标。

尿素循环限速酶CPS1在胃黏膜肠上皮化生及癌变过程中的表达特征

目的探讨尿素循环限速酶氨甲酰磷酸合成酶1(CPS1)在胃黏膜肠上皮化生及癌变过程中的表达特征。方法采用免疫组织化学法检测10例胃浅表黏膜慢性炎、10例小肠黏膜慢性炎、10例结肠黏膜慢性炎、32例慢性萎缩性胃炎伴肠化生、30例低度异型增生、32例高度异型增生中CPS1、CDX2的表达及172例肠型胃癌组织芯片中CPS1的表达。结果CPS1和CDX2在胃黏膜中均无阳性表达。CDX2在小肠、结肠黏膜中均呈阳性表达,而CPS1仅在小肠黏膜中表达。CPS1强阳性表达率在肠化生占100%(32/32),低度异型增生占70.0%(21/30),高度异型增生占12.5%(4/32),肠型胃癌占8.1%(14/172)。CPS1的表达率在癌变各个阶段间差异有统计学意义(P<0.05)。CDX2在肠化生、低度异型增生、高度异型增生中强阳性表达率为87.5%(28/32)、100%(30/30)和78.1%(25/32)。CDX2在低度异型增生、高度异型增生间差异有统计学意义(P=0.0118)。在胃腺癌中,CPS1表达下调与浸润深度和TNM分期显著相关。结论本研究支持CPS1和CDX2均是鉴别胃黏膜肠上皮化生病变的特异性标志物;与CDX2相比,CPS1在高度异型增生及腺癌阶段表达下调,提示CPS1表达下调可能是肠化生恶性转变的标志物;CPS1表达下调与临床分期呈正相关,提示CPS1可能是肠型胃癌的抑癌基因。

MSP-DHPLC技术检测MGMT基因甲基化的应用评价

目的应用变性高效液相色谱(DHPLC)结合甲基化特异性PCR(MSP),建立一种临床可行的MGMT基因启动子甲基化检测方法,并探讨其灵敏度和特异性。方法选取MGMT甲基化标准品、30例脑胶质瘤组织和5例正常脑组织作为研究对象,分别应用MSP和MSP-DHPLC方法进行MGMT基因启动子区甲基化检测,比较两种方法的检测灵敏度和肿瘤组织甲基化检测率。结果标准品MGMT甲基化检测,MSP-DHPLC检测灵敏度为1%;MSP检测灵敏度为10%。30例胶质瘤组织用常规MSP和MSP-DHPLC检测,发生甲基化的样本例数分别为15(50%)和24(80%),其中9例样本MSP检测为非甲基化,而MSP-DHPLC检测为甲基化。5例正常脑组织采用两种方法检测均为非甲基化。结论 MSP-DHPLC方法检测MGMT基因甲基化灵敏度高于常规MSP。

肠息肉“多如牛毛”,警惕这种遗传病

王先生还不到40岁,不吸烟、不喝酒、不熬夜,热爱运动,生活规律,理应健健康康,却得了肠癌。医生说他患有家族性腺瘤性息肉病,这种病很容易发生癌变,且是种遗传病,他的孩子、父母及兄弟姐妹都有可能患这种病。在后续的检查中,王先生的妈妈与舅舅也“中招”,幸好息肉尚未癌变。

Cortactin表达与结肠直肠癌肿瘤出芽的相关研究

目的:分析皮层蛋白Cortactin在肿瘤组织的表达水平和肿瘤出芽程度与结肠直肠癌特征的相关关系。方法:检测97例结肠直肠癌病人癌组织Cortactin的表达水平和肿瘤出芽程度,分析其与病人临床特征的相关性。结果:Cortactin表达水平与结肠直肠癌病人T分期(P=0.017)和N分期(P<0.001)显著相关。结肠直肠癌Cortactin表达水平较高的病人年龄较小(P=0.043)。肿瘤出芽程度与病人T分期(P=0.031)、血浆CEA水平(P=0.038)以及结肠直肠癌高危因素(P=0.008)显著相关。Cortactin表达与结肠直肠癌肿瘤出芽程度显著相关(P=0.011)。结论:Cortactin表达水平与结肠直肠癌出芽显著相关,提示Cortactin可能促进结肠直肠癌细胞出芽、恶性进展和预后不良。

教你一招轻松看懂病理报告——肺癌篇

随着影像技术的发展,肺部小结节(就像皮肤上的小疙瘩)在体检中越来越常见。为了明确这个疙瘩是良性还是恶性,有没有癌变的风险,常常需要取一块组织下来(通过细针穿刺,现在有影像学或超声的引导,很安全),到病理科做个化验。病理诊断是肿瘤良恶性判断的“金标准”,但常常好不容易拿到一份报告,看到上面都是陌生的专业术语和符号,一头雾水。

PD-L1在晚期肺腺癌中的表达及对EGFR靶向治疗的影响

目的分析程序性死亡配体1(PD-L1)在晚期肺腺癌活检标本中的表达, 及其对驱动基因(EGFR)阳性肺癌患者靶向治疗的影响。方法本研究为病例对照研究, 采用非随机抽样的方法收集上海交通大学医学院附属瑞金医院(北部院区)2021年1月至12月诊断为ⅢB/Ⅳ期肺腺癌患者共80例。PD-L1抗体检测选用22C3及配套检测平台, PD-L1肿瘤细胞阳性比例分数(TPS)≥1%为阳性, ≥50%为强阳性;肺癌驱动基因检测选用突变扩增系统-聚合酶联反应法9基因联检, 包括EGFR、KRAS、ALK、ROS、MET、RET、BRAF、HER2及PIK3CA。随访在本院接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗的30例EGFR基因敏感突变患者直至疾病进展, 随访时间不小于6个月。结果在晚期肺腺癌活检标本中PD-L1表达阳性病例(TPS≥1%)占比32.50%(26/80), PD-L1强阳性病例(TPS≥50%)占比15%(12/80)。肺癌驱动基因突变的总阳性率75%(60/80), 其中EGFR基因突变占比57.50%(46/80), KRAS基因突变占比8.75%(7/80), ALK、ROS及MET基因突变占比6.25%(5/80)。PD-L1在驱动基因突变者中阳性检出率26.67%(16/60), 在驱动基因野生型者中阳性检出率50.0%(10/20), 差异有统计学意义(χ^(2)=3.72, P=0.027)。PD-L1在肺癌常见驱动基因EGFR、KRAS、融合基因(包括ALK、ROS和MET)阳性病例中检出率分别为26.09%(12/46)、28.57%(2/7)和60.00%(3/5)。30例EGFR敏感突变患者接受了一线EGFR-TKI治疗, PD-L1表达阳性组的中位无进展生存期(PFS)较表达阴性组PFS缩短(2个月比11个月, P=0.018)。结论 PD-L1在肺癌驱动基因野生型中检出率更高。在不同驱动基因突变型中, 以融合基因阳性病例中检出率较高, 但有待更大样本验证。伴PD-L1表达的EGFR突变患者接受EGFR-TKI治疗有更高的原发耐药风险。

PTEN及其突变体可诱导慢病毒表达系统的构建

目的:构建可诱导表达野生型或突变型第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的慢病毒表达体系,为进一步研究PTEN与肿瘤间的关系提供理想的实验工具。方法:提取甲状腺癌、肺癌及其癌旁组织的RNA,经反转录后扩增PTEN片段,将其连接入慢病毒载体,与病毒包装质粒共转染人胚肾T细胞(293T)细胞,获得病毒。将其感染MDA-MB-231细胞,用嘌呤霉素筛选,获得稳定表达的细胞株。采用蛋白印迹法检测稳定转染的细胞株中PTEN基因的表达情况,用软琼脂克隆形成实验检测细胞株的克隆形成能力。结果:在甲状腺癌和肺癌中发现PTEN突变体;蛋白印迹检测结果证实野生型和突变型PTEN的慢病毒表达体系构建成功。突变型PTEN的克隆形成能力强于野生型PTEN。结论:发现了PTEN突变体,并成功构建了野生型和突变型PTEN基因的可诱导慢病毒表达体系,突变型PTEN不但有抑癌作用,还有致癌作用。

FAK突变体的亚细胞定位及生物学特性

目的探讨外显子33缺失型黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)突变体(FAK-Del33)的亚细胞定位及生物学特性。方法采用基础实验研究设计。将野生型FAK以及突变型FAK-Del33分别构建到pEGFP表达载体,并转染乳腺癌细胞株,以研究分析其细胞表达和定位情况。另构建过表达FAK或FAK-Del33的MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株,研究评价其细胞表达和体外克隆形成能力。结果构建FAK-GFP融合蛋白表达载体转染MDA-MB-468后的细胞定位显示,野生型FAK在胞浆中弥散分布,而FAK突变体蛋白在胞浆中呈点状不均匀分布,并聚集成簇。经限制性内切酶酶切分析与测序分析,成功构建出过表达FAK的慢病毒载体,以293T细胞包装的重组慢病毒能够高效感染乳腺癌细胞;经抗生素puromycin筛选和荧光定量PCR鉴定,成功筛选到稳定表达FAK的细胞株。在软琼脂克隆形成实验中,FAK野生型的克隆形成数为(335±48)/1000个,FAK突变体为(735±91)/1000个,后者对MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株的增殖能力高于前者(t=9.437,P<0.01)。结论初步研究表明外显子33缺失可改变FAK的亚细胞定位;并能增强肿瘤细胞株的体外克隆形成能力,这种FAK突变体可能参与肿瘤的发生发展。

QKI-5在三阴乳腺癌组织中的表达及其意义

目的 :利用免疫组织化学方法检测RNA结合蛋白quaking 5(QKI-5)在人三阴乳腺癌组织中的表达,探讨QKI-5在乳腺癌转移过程中的作用。方法:采用组织芯片技术,检测30对人三阴乳腺癌组织及其对应癌旁组织中的QKI-5蛋白水平表达情况,并对表达情况与临床病理参数间的关系进行分析。构建能稳定过表达QKI-5的细胞株MDA-MB-231和稳定敲减QKI-5表达的细胞株4T1,并对其迁移功能进行测定。结果 :肿瘤组织中的QKI-5表达率(13.3%)较对应癌旁组织(53.3%)低(χ2=10.8,P<0.05);且肿瘤组织中QKI-5的阴性表达与患者的淋巴结转移及肿瘤直径有关(P=0.025,P<0.05;P=0.015,P<0.05);体外迁移实验结果显示,过表达QKI-5的MDA-MB-231细胞的迁移能力下降(t=3.0,P<0.05),而敲减QKI-5表达的4T1细胞的迁移能力提升(F=22.9,P<0.05)。结论:QKI-5在人三阴乳腺癌组织中低表达,而其低表达可能是促进三阴乳腺癌淋巴结转移的重要原因。