基于磁蛋白标签的黄曲霉毒素氧化酶的分离及应用

建立了以家鸽磁蛋白(clMagR)分离标签为基础的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)分离纯化策略及黄曲霉毒素B1(AFB1)清除体系。将具有AFB1降解活性的AFO与clMagR基因共编码,采用pET 28a(+)载体构建了pET 28a(+)AFO clMagR重组质粒,转入E.coli BL21(DE3)宿主异源表达融合蛋白,并优化表达条件。随后,利用磁性纳米颗粒与磁蛋白的物理吸附,进行AFO的快速分离纯化及其对黄曲霉毒素B1的去毒率测定。结果表明:clMagR标签可增加AFO的可溶蛋白表达量;同时,融合clMagR的AFO具有良好的磁感应性,可通过与磁珠的吸附而被高效分离,纯化后的AFO对于AFB1的去毒率为75.94%,可循环使用13次。本研究为AFO的分离纯化及AFB1的生物去毒化研究提供了新策略,也为其他蛋白的分离纯化及应用提供了良好借鉴。