“益肝康”大鼠药物血清对HSCsc-fos、c-jun基因表达的影响

目的观察"益肝康"药物血清对HSCsc-fos、c-jun基因表达的影响,试图从基因转录水平探讨"益肝康"的抗肝纤维化作用机制。方法制备肝纤维化模型鼠,造模成功后,药物组以每天20ml/kg剂量分2次灌服"益肝康";对照组灌以等量0.9%氯化钠溶液。连续给药6d后经下腔静脉取血并分离血清。采用盲法,用上述10%药物血清培养HSCs24h后,采用RT-PCR技术检测c-fos、c-junmRNA的表达情况。结果①电泳条带的光密度扫描显示,B、D组c-fosmRNA的表达与C组比较有差异有统计学意义(P<0.05);B、D组与A组比较,c-fosmRNA的表达亦明显下降(P<0.05);②光密度扫描显示,B、D组c-junmRNA的表达同C组比较,差异有统计学意义(P<0.05);B、D组与A组比较,c-junmRNA的表达亦明显受到抑制(P<0.05)。结论活化的HSCs表达较高水平的c-fos与c-junmRNA,表明c-fos与c-jun立早基因可能参与了其增殖过程;"益肝康"药物血清均能显著下调c-fos与c-junmRNA的表达,在转录水平对c-fos与c-jun的调节可能是两者发挥其抗肝纤维化作用靶点之一。

肝纤维化患者“益肝康”药物血清对HSCs胞浆游离钙的影响

目的探讨经用慢性乙型肝炎患者制备的"益肝康"药物血清对血管紧张素Ⅱ介导的HSCs胞浆游离钙变化的影响。方法采用体外HSCs株培养技术。患者血清分为A组:服用"益肝康"前;B组:服用"益肝康"后。药物血清的制备:15例观察对象服药前采静脉血5ml,然后给予"益肝康"150ml,2次/d,疗程7d时作为观察终点。服用"益肝康"前后,均于晨起外周静脉取血。采用盲法,用上述10%药物血清培养HSCs24h,再将经药物血清预处理的HSCs及对照组细胞负载Fluo-3/AM后使用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测Ca2+i。结果经"益肝康"药物血清预处理HSCs后均可明显减低细胞Ca2+i,荧光强度相对值与经服药前患者血清预处理HSCs组结果相比,Ca2+i下降达52.37%,两者相比有显著性差异(P<0.01)。给予Ang-Ⅱ(1.1×10-7mol/L)刺激HSCs,经"益肝康"药物血清预处理的HSCs,细胞Ca2+i荧光强度变化百分数明显减低,同经服药前患者血清预处理HSCs组结果相比,下降达90.50%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论来自慢性乙型肝炎患者的"益肝康"药物血清具有抑制HSCs胞浆内游离钙水平升高的作用。