气管暴露注射法制备大鼠矽肺模型

矽肺是一种严重危害人类身体健康的职业病，国内外许多研究者都致力于矽肺纤维化机理的研究。其研究方法大多利用动物模型来模拟人肺纤维化的进程，以探究其发生机理。动物模型的成功建立是探讨肺纤维化发生发展机理的关键步骤。目前利用大鼠进行矽肺模型建立的方法有很多，如伯莱霉素气管注射法”、伯莱霉索雾化吸人法”、二氧化硅气雾法”、非暴露法”等。笔者在本次实验中采用气管暴露法，旨在探究此方法在实行时的合理操作。经过对不同二氧化硅浓度，

大鼠肌肉伤害性感觉神经元的形态学及电生理特性

目的探讨正常成年大鼠支配肌肉的外周伤害性感觉神经元的形态学和电生理特性。方法预先用荧光染料1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetrame-thylindocarbocyanine perchlorate(DiI,200 mg/L)标定背根神经节(DRG)中支配大鼠胫骨前肌的神经元,7~12 d后取材进行免疫组织化学染色或进行在体可视DRG电生理记录。结果 DiI逆行标记表明,支配大鼠胫骨前肌的初级感觉神经元主要集中在腰(L)3、L5 DRG上,DiI标记的阳性神经元胞体数量分别为19.8±7.1(L3)、26.5±8.0(L4)和14.2±5.0(L5)个(n=8),其中含大、中、小神经元。免疫组织化学结果表明,在L3~L5背根神经节(DRG)DiI+(支配胫骨前肌)神经元中,降钙素基因相关肽(CGRP)(肽能)阳性神经元分别占31.5%、26.1%和22.3%;植物凝集素(IB4)(非肽能)阳性神经元分别占45.8%、45.1%和40.6%;表达瞬时受体电位通道香草醛亚型-1(TRPV1)的神经元分别占27.2%、26.3%和32.1%。电生理结果显示,对40mN以上机械刺激有反应的大部分为中、小神经元,引起其放电的外周机械刺激的阈值一般大于80mN(伤害性感觉神经元),外周感受野范围大,且位置多变。在测得外周轴突传导速度的神经元中,大部分(8/10)为C类[传导速度<1.5 m/s,平均机械阈值(124.6±40.5)mN]。结论大鼠L3~L5 DRG中支配胫骨前肌的伤害性感觉神经元多为中、小神经元,对于外界机械感受阈值较高,感受野范围较大,并且可表达多种痛觉神经元标志物。

5-羟色胺在小鼠慢性背根神经节压迫模型中的作用机制

目的探讨5-羟色胺(5-HT)在小鼠慢性背根神经节压迫(CCD)模型中的作用机制。方法将L型不锈钢棍插入小鼠右侧L3和L4椎间孔,持续压迫背根神经节(DRG)建立小鼠CCD模型。在CCD手术前1 d及手术后1、3、5、7 d向小鼠胫骨前区皮内注射10μL 5-HT(低剂量浓度为0.003 g/L,高剂量浓度为0.3 g/L)后,录像分析小鼠对注射5-HT后所产生的痒与痛行为学;免疫荧光实验检测小鼠DRG中H4蛋白的表达;实时PCR检测CCD模型小鼠压迫5 d后双侧L3和L4 DRG内5-HTr1a和5-HTr2a的表达。结果与手术前1 d比较,低浓度5-HT在CCD手术后3 d可以明显增加痒行为;高浓度5-HT在CCD手术后1 d可以明显增加痒行为(P<0.05)。与手术前1 d比较,低浓度5-HT在小鼠CCD手术后1 d和3 d可以明显增加痛行为(P<0.05);高浓度5-HT在小鼠CCD手术后1 d可以明显增加痛行为(P<0.05)。与对侧DRG比较,压迫5 d的DRG中H4蛋白,5-HTr1a、5-HTr2a mRNA表达均显著升高(均P<0.05)。结论受压迫DRG神经元H4、5-HTr1a和5-HTr2a表达上调,引起感受野对5-HT诱发痛与痒的敏化。

背根神经节在体电生理记录技术在针灸研究中的应用概述

针灸作为体表刺激疗法,主要通过激活支配穴区的神经纤维和末梢起作用。背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元是感觉传入的第一级神经元,也是针灸调节躯体、内脏感觉与功能,包括针刺镇痛的首要部位,因此了解背根神经节神经元的种类、性质、相互作用途径及机制,对于理解针灸的传入神经机制具有重要意义。以往由于技术手段的限制,背根神经节神经元的研究多局限于离体水平,对说明针灸效应机制有一定局限性。本文通过介绍背根神经节在体电生理技术的建立及在神经科学和疼痛研究中应用,并结合针刺研究现状和本研究组将该技术用于针灸研究的尝试,探讨其在针灸神经机制研究中的优势。

手阳明大肠经和手厥阴心包经相关的脊髓前角运动神经元投射支配特性

目的绘制支配手阳明大肠经和手厥阴心包经相关的脊髓运动神经元在脊髓的空间定位和树突投射的特异性分布。方法利用霍乱毒素B单位结合辣根过氧化物酶（CB—HRP）可被外周神经末梢吸收和运输的特性，在大鼠前肢手阳明大肠经和手厥阴心包经路径上的肌肉的每一穴位点分别注射5μL的CB—HRP（1％）溶液，经过3—4d的药物吸收后，通过灌流固定-切片-TMB组织化学反应程序，显示出支配这些肌肉的运动神经元胞体及突起，并观察手阳明大肠经和手厥阴心包经相关的运动神经元在脊髓的空间的分布特性。结果大鼠手阳明大肠经以及手厥阴心包经相关的运动神经元在颈3-颈7节段脊髓腹角分别形成首尾走向、定位明确的运动神经元柱状联结；同一条经对应的运动神经元之间存在丰富的树突-树突和树突-胞体定向投射，形成一个由运动神经元胞体及其树突构成的细胞柱状实体。结论同经相关的运动神经元之间构成一个紧密连接的神经元柱，柱间的神经元的树突-树突和树突-胞体定向投射可能是循经感传反射活动的结构基础。

小蓟叶片愈伤组织的诱导及增殖条件优化

[目的]建立小蓟愈伤组织的诱导及增殖培养体系。[方法]以野生小蓟无菌苗叶片为外植体,分析2,4-D、6-BA、NAA对小蓟愈伤组织的诱导及增殖的影响,确定最适宜的激素组合。[结果]单因素条件下,0.8 mg/L 2,4-D、0.9 mg/L 6-BA、2.0 mg/L NAA为小蓟叶片愈伤组织诱导的最佳浓度;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.9 mg/L+NAA 2.5 mg/L培养基为小蓟叶片愈伤组织最适诱导组合。单因素条件下,2,4-D、NAA不适合小蓟愈伤组织增殖培养,MS+6-BA 0.3 mg/L为小蓟叶片愈伤最佳增殖培养基。[结论]该研究为小蓟的进一步开发利用奠定基础。

不同浓度三种激素对小蓟茎段愈伤组织诱导影响

为了进一步开发和利用小蓟，以小蓟茎段为外植体，采用单因素及正交试验方法，探讨2，4‐D 、6‐BA 以及 NAA 三种激素对小蓟愈伤组织诱导的影响。结果表明：单因素试验2，4‐D 最佳浓度范围为0．6～1．0 mg·L‐1；6‐BA 最佳浓度范围为0．6～1．0 mg·L‐1；NAA 最佳浓度范围为2．4～2．6 mg·L‐1。正交试验结果显示，在 MS ＋2，4‐D 1．0 mg·L‐1＋6‐BA 1．0 mg·L‐1＋ NAA 2．4 mg·L‐1培养基中，小蓟茎段愈伤组织诱导效果最好。3种激素不同程度上促进小蓟愈伤组织的形成及生长。

甲基苯丙胺使用障碍者的焦虑、抑郁与睡眠状况调查

目的探究甲基苯丙胺使用障碍(Mathemphatamine use disorder,MUD)患者的焦虑、抑郁和睡眠问题发生率。方法共纳入462名MUD患者和312名正常对照。两组均使用汉密尔顿焦虑量表、汉密尔顿抑郁量表和匹兹堡睡眠质量指数分别对焦虑、抑郁和睡眠情况进行评估。结果MUD患者的焦虑、抑郁及睡眠问题发生率均高于正常对照(焦虑:47.3%vs.3.1%;抑郁:50.2%vs.2.1%;睡眠问题:62.0%vs.31.7%),所有P值均<0.001。多因素Logistic回归分析提示,MUD患者出现焦虑(OR=22.04,95%CI[8.75,55.49])、抑郁(OR=38.79,95%CI[13.11,114.76])和睡眠问题(OR=3.36,95%CI[2.25,5.02])的风险比正常对照更大。结论与对照组相比,MUD组更容易发生焦虑、抑郁与睡眠问题,在MUD的临床治疗中,要对焦虑、抑郁和睡眠问题进行评估和干预。