广东口岸鼠形动物间鼠疫耶尔森菌和汉坦病毒感染状况调查

目的 了解广东省27个口岸鼠形动物及其体表寄生虫种类,鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）和汉坦病毒感染状况,为口岸鼠传疾病防控提供科学依据。方法 2014年5月至2015年4月,采用鼠笼法捕获鼠形动物,实时荧光PCR法检测鼠肺,收集口岸人员健康状况。结果 共捕获鼠形动物885只,平均密度为0.58%,优势种为臭鼩鼱（47.68%）和褐家鼠（33.67%）;检出印鼠客蚤,染蚤率为0.79%,蚤指数为0.03。共检测鼠肺839份,10个口岸检出汉城型汉坦病毒,病毒携带率为2.74%,其中黄胸鼠携带病毒率最高（7.45%）。不同类型口岸鼠形动物汉坦病毒携带率差异无统计学意义（χ^2=3.287,P=0.349,ν=3）。未检出鼠疫菌。结论 广东口岸的鼠形动物平均密度低于控制标准,未发现鼠间鼠疫流行线索,但存在黄胸鼠和印鼠客蚤,个别口岸汉坦病毒携带率较高,需采取措施预防控制鼠传疾病。

广州白云国际机场旅检大厅生物气溶胶粒子及其携带病原体监测

目的了解广州白云国际机场旅检大厅生物气溶胶粒子数及气溶胶携带病原体情况,为改善机场卫生状况提供科学依据。方法分别以廊桥入口、过道、行李提取处为监测点,自2012年4月至2013年7月对机场旅检大厅的生物气溶胶粒子数和气溶胶携带病原体进行监测。结果比较旅客群体通过3个监测点前后不同粒径气溶胶粒子数量显示,在过道处粒径≥5.0μm的气溶胶粒子数显著性增加;大厅气溶胶检出唾液链球菌、麻疹孪生球菌、猪丹毒杆菌、粪链球菌、无乳链球菌、抗辐射不动杆菌、肠膜明串珠菌乳脂亚种、藤黄微球菌和溶血性葡萄球菌等条件致病菌;尚未发现霉菌及呼吸道病毒。结论机场出入境检疫部门应加强旅检大厅的卫生监督,督促相关部门做好环境清洁工作,预防疾病传播。

双重荧光RT-PCR检测4种致病性亚型埃博拉病毒方法的建立

目的建立可同时检测苏丹、扎伊尔、本迪布焦和科特迪瓦4种致病性亚型埃博拉病毒的双重荧光RT-PCR检测方法。方法根据4种致病性亚型埃博拉病毒的核蛋白NP基因保守序列,针对苏丹型/扎伊尔型病毒以及针对本迪布焦型/科特迪瓦型病毒,相应设计2套引物和探针。以体外转录的4种亚型埃博拉病毒RNA为模板,进行条件的优化以及方法特异性、灵敏度、重复性试验,建立双重荧光RT-PCR检测方法。结果新建立的双重荧光RT-PCR方法检测只对4种埃博拉病毒阳性对照RNA模板有特异性扩增,与肾综合征出血热病毒、登革病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、日本脑炎病毒、基孔肯雅病毒均无交叉反应,2套引物和探针的检测灵敏度均可达到最低50拷贝/μL。苏丹型和本迪布焦型埃博拉病毒阳性对照RNA模板的4种稀释度(2×108、2×106、2×104、2×102拷贝/μL)重复检测3次均有较好的重复性。结论建立的方法能同时检测上述4种亚型埃博拉病毒,灵敏度高,特异性强,可用于埃博拉病毒疑似病例的检测。

2013年广东国境口岸入境发热患者的虫媒传染病检测情况分析

目的 对广东国境口岸入境发热患者的虫媒传染病发病情况进行分析,为口岸虫媒传染病防控提供理论指导。方法 收集2013年全年广东国境口岸入境所有发热患者血液样本,以实时荧光RT-PCR法检测登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病病毒、埃博拉病毒、西尼罗病毒核酸;抗凝血涂片镜检,检测疟原虫。结果 2013年度共收集400份广东入境发热患者血液样本,其中的195份抗凝血样本中检出21例输入性恶性疟疾阳性病例,检测阳性率为10.8%;从205份血清中检测出14例输入性登革热病例（阳性率为6.8%）和1例输入性基孔肯雅热阳性病例（阳性率为0.5%）。85.7%的登革热患者（12/14）均来自东南亚地区,85.7%的疟疾患者（18/21）均来自非洲地区,1例基孔肯雅热患者来自东南亚地区（菲律宾）。登革热病例中12例男性,2例女性,年龄为20∽50岁,均有发热症状;疟疾阳性患者全部为男性,年龄为28∽50岁,均有发热症状。结论2013年广东口岸虫媒传染病患者体征各有特点,但均具有发热的共同体征;来自东南亚的旅客传播登革热的风险最大,来自非洲的旅客携带疟疾病原的风险最大;检验检疫部门应大力加强口岸传染病防控力度,严防虫媒传染病传入我国并引起国内疫情暴发。

甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR标准阳性模板的构建

目的制备甲型H1N1流感病毒核酸检测标准阳性模板,将其应用于日常甲型流感病毒荧光定量PCR(RTPCR)检测中。方法根据甲型H1N1流感病毒基因序列设计出M、HA、NA片段的全基因扩增引物,采用RT-PCR方法扩增以上3个基因片段,将3个目标片段分别连接到PGM-T载体上构建重组质粒,筛选出分别含M、HA、NA基因阳性质粒,将以上阳性质粒两两连接,最后制备成含M、HA、NA基因的标准阳性模板。结果此模板在-20℃保存3个月对荧光定量PCR结果无显著影响,具有较好的稳定性,Ct值最大变异系数为1.30%。使用该模板建立的定量范围为1×1010copy/ml^1×1019copy/ml,标准曲线方程为:y=-2.7232x+40.99。检测方法表明该标准阳性模板具有良好的特异性。结论本次制备成的标准阳性模板适用于各甲型H1N1流感病毒检测实验室的质量控制,可用于临床诊断。

裂谷热流行现状和检测研究进展

裂谷热是由裂谷热病毒引起的一种急性、烈性人畜共患疾病,主要影响绵羊、山羊和牛等牲畜,可以引起病畜死亡和流产,发病率与死亡率较高;同时也能传染人类,裂谷热传播途径主要通过人直接或间接接触被感染动物的血液或器官导致感染,人被携带病毒的蚊子叮咬也会受感染。裂谷热疫情主要在非洲地区流行,近年来已延伸至阿拉伯半岛,但目前为止,我国未见裂谷热疫情发生。为此笔者综合国内外文献,就裂谷热的流行特点、各种检测技术以及预防控制方面进行综述,为进一步开展裂谷热相关研究及口岸监测提供参考,降低疫情传入我国的风险。