IL-10基因修饰的树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的实验研究

目的:探讨hIL-10基因修饰的未成熟树突状细胞(imDC)诱导大鼠肝移植免疫耐受的能力。方法:行以DA大鼠为供体、Lewis大鼠为受体的同种异体原位肝移植100例,随机分为5组(每组4只):未注射DC组(对照组)、mDC组、imDC组、空载体组及hIL-10基因转染组;分别于移植前5d每天给Lewis大鼠腹腔注射mDC、imDC、空载体转染的imDC和hIL-10修饰的imDC各2×106个,于肝移植术后3、7、10d各处死4只,观察外周血肝功能及IL-12变化,并对移植后大鼠做生存分析。结果:IL-10组术后移植肝为非确定型急性排斥反应到轻度急性排斥反应。肝功能示IL-10组在7d、10d时,肝功能有所恢复,但与imDC组及空载体组相比差异无统计学意义。ELISA检测示,术后7d,IL-10组的血清IL-12浓度均低于mDC组及imDC组。IL-10组中位生存期(40d)长于其他组。结论:hIL-10基因修饰的imDC诱导同种异体大鼠肝移植免疫耐受能力显著增强,显著延长同种异体肝移植大鼠的生存期。

IL-10基因在大鼠骨髓树突状细胞的表达

目的检测人白细胞介素10(hIL-10)基因在大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)中的表达。方法实验分4组:mDC组、imDC组、空载体组及hIL-10基因转染组。用hIL-10真核表达载体(pIRES2-EGFP-hIL-10)转染大鼠骨髓来源的imDC,应用ELISA、Western blot、流式细胞术及混合淋巴细胞反应(MLR)检测hIL-10在各组中的表达。结果荧光显微镜观察显示pIRES2-EGFP-hIL-10质粒转染imDC后可见绿色荧光;ELISA检测hIL-10基因转染组的hIL-10表达明显高于mDC组、imDC组及空载体组;经Westen blot检测hIL-10基因转染组有hIL-10蛋白表达;流式细胞术显示hIL-10基因转染组hIL-10基因转染后imDC表面分子CD86、CD80与其他三组相比略呈低表达;转染后混合淋巴细胞反应(MLR)显示,hIL-10转染组的imDC对T细胞的增殖反应均弱于imDC组和空载体组(P=0.024和P=0.033)。结论外源性hIL-10基因成功导入大鼠imDC并表达。

人类表皮生长因子受体2和β-联蛋白在食管癌中的表达及其意义

目的探讨人类表皮生长因子受体2(HER2)和β-联蛋白(β-catenin)在食管癌中的表达及意义。方法用免疫组织化学方法检测食管癌组织、远癌组织中HER2和β-catenin的蛋白表达。结果 HER2在食管癌组织中未见强阳性表达,β-catenin在食管癌组织中呈异常表达,二者在食管癌中的表达无明显相关关系。结论HER2在食管癌组织中有表达,但其表达强度未达到赫赛汀靶向治疗的标准;β-catenin在食管癌中有异常表达,提示其有可能在食管癌的发生发展中发挥重要作用,并可能成为判断食管转移及预后的指标之一,两者在食管中表达无明显相关性。

DNA修复基因XRCC1、MGMT在胃癌中表达的研究

目的:探讨胃癌及正常胃组织中DNA修复基因XRCC1和MGMT的表达及其意义。方法:免疫组化法检测胃癌组织及正常胃组织中XRCC1和MGMT的蛋白表达情况。结果:胃癌组XRCC1蛋白的阳性表达率为86.25%明显高于正常胃组织的13.75%(P<0.05)。胃癌组MGMT蛋白的阳性表达率为33.75%,明显低于正常胃组织的66.25%(P<0.05)。二者在胃癌中的表达无明显相关关系。结论:XRCC1与MGMT基因在胃癌发生过程中可能起重要作用,两者在胃癌中表达无明显相关性,提示两者修复损伤途径相互独立。

大鼠骨髓来源树突状细胞的体外培养与鉴定

目的建立体外培养、诱导和扩增大鼠骨髓来源的树突状细胞的方法。方法实验通过运用大鼠淋巴细胞分离液和培养过程的手法筛选相结合,培养、诱导和扩增大鼠骨髓来源的树突状细胞,通过形态学和免疫表型进行鉴定。结果成功建立了体外大量培养、诱导及扩增大鼠骨髓来源树突状细胞的方法;经倒置相差显微镜、透射电镜及流式细胞仪鉴定,证实所培养细胞为树突状细胞。结论通过运用大鼠淋巴细胞分离液和培养过程的手法筛选相结合能培养、诱导、扩增大量的树突状细胞。

乳腺肉瘤样癌1例

患者女性，44岁，因发现左侧乳腺皮肤破溃1个月入院。查体：左侧乳腺表面皮肤部分破溃，面积3．0cm×2．5cm，大小，破溃处周围皮肤呈紫红色，乳腺可扪及-8．0cm×7．0cm×5．0cm大小包块，遂行乳腺改良根治术。

乳腺浸润性筛状癌1例

患者女性，35岁。因发现左侧乳房包块半年入院。患者半年前无意中发现左侧乳房有一包块，无压痛、肿胀，无溃烂、出血，无分泌物，近日发现包块较前有所增大。乳腺B超示：左侧乳腺实质性包块，新生物可能，双侧乳腺增生。

人类表皮生长因子受体2(HER2)在食管癌中的表达及意义

目的探讨人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)在食管癌中的表达及意义。方法用免疫组化方法检测食管癌组织、远癌组织中HER2的蛋白表达。结果 HER2在食管癌组织中未见强阳性表达。结论 HER2在食管癌组织中有表达,但其表达强度未达到赫赛汀靶向治疗的标准。

DNA修复基因XRCC1在胃癌中的表达及意义

目的探讨DNA修复基因XRCC1在胃癌中的表达及意义。方法用免疫组化方法检测胃癌组织、远癌组织及肠上皮化生组织中XRCC1的蛋白表达。结果 3组XRCC1在胃癌组织中的表达水平间,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 XRCC1在胃癌组织中表达异常,提示其在胃癌发生过程中可能起重要作用。

成人颈部胎儿型横纹肌瘤1例

患者男性,29岁。偶然发现左颈部包块,无压痛,未在意,后逐渐长大,肉眼可观察左颈部局部膨隆。西京医院颈部血管CT示左侧颈后部斜方肌深部可见一软组织包块,大小7.8 cm×6.4 cm×5.2 cm,肿块于颈2层面部分突入椎管内,颈椎反曲并左弯右突（图1）。颈椎MRI示左侧颈后部肌肉下见一不规则异常包块信号,大小6.9 cm×4.0 cm×8.1cm,边界清楚,T1增强呈明显高信号,

胰腺实性假乳头状肿瘤13例临床病理分析及文献复习

探讨胰腺实性假乳头状肿瘤(SPN)的临床病理学特征、鉴别诊断、分子遗传学特点以及治疗与预后等。回顾性分析13例胰腺SPN患者的临床病理资料,总结其组织病理学特点、免疫组化等,并复习相关文献。13例胰腺SPN患者均为女性,中位年龄31岁。其中10例有明显临床症状,主要为腹痛和上腹不适;其他3例表现为无任何症状,于常规体检时发现胰腺占位。典型胰腺SPN具有特征性病理形态,即瘤组织由形态一致的细胞构成,细胞黏附性差,形成实性及假乳头状结构,常有出血及囊性变。免疫组化结果显示,13例胰腺SPN中,Vimentin阳性率100%(13/13),CD10阳性率92.3%(12/13),β-catenin阳性率100%(13/13)。胰腺SPN是一种少见的胰腺低度恶性肿瘤,好发于年轻女性,肿瘤生长缓慢,预后较好。结合临床和组织病理学特征及免疫组化,可作出准确病理诊断。

水通道蛋白1与乳腺癌组织微血管生成的关系

目的研究水通道蛋白1(AQP1)在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤微血管生成的关系,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法,对106例乳腺癌组织及作为对照的20例癌旁正常组织中AQP1表达情况进行检测;用CD105标记肿瘤新生血管,计数微血管密度(MVD)。结果 AQP1在乳腺癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为(307.48±31.07)‰和(32.50±12.73)‰,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织平均MVD值明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);AQP1的表达和MVD值与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期等因素无关(P>0.05),但与是否伴有淋巴结转移关系密切(P<0.05);乳腺癌组织中AQP1的表达与MVD呈正相关(r=0.647,P<0.05)。结论 AQP1在乳腺癌组织中高表达,可能促进乳腺癌组织微血管生成,在肿瘤的生长、浸润和转移中具有重要作用。

真核表达载体pIRES2-EGFP-hFasL的构建及鉴定

背景:FasL通过与靶细胞上Fas结合诱导程序性细胞死亡,可维持机体内稳态,诱导同种异基因移植免疫耐受,促进肿瘤细胞凋亡。目的:构建带有增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP及目的基因hFasL的真核表达载体pIRES2-EGFP-hFasL。方法:通过实时聚合酶链反应RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增出hFasL基因,与真核空载体plRES2-EGFP一起,经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,T4DNA连接酶连接,从而构建pIRES2-EGFP-hFasL。用紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度,经酶切、PCR技术、基因测序等方法进行鉴定。结果与结论:扩增出的hFasL条带大小约846bp,构建的plRES2-EGFP-hFasL经酶切后在846bp和2000bp处有特异性条带,DNA测序证实hFasL与Genebank上的序列完全一致。提示成功构建了含有hFasL及EGFP的真核表达载体plRES2-EGFP-hFasL。

运用PDCA促进HE切片质量持续改进

将PDCA应用于HE切片质量管理工作中,针对溢胶、染色不佳及刀痕等要因,从意识教育、业务学习、方法改良、制度建立、严格把关等方面进行改进,使HE切片质量优良率显著提高,有效提高了切片质量,为病理诊断的准确性和及时性奠定了良好基础。

宫颈腺样基底细胞癌16例报告

目的：探讨宫颈腺样基底细胞癌（ABC）的临床、病理特点及鉴别诊断。方法：采用组织学及免疫组织化学方法对16例ABC进行观察、分析。结果：ABC临床症状不明显,妇科检查宫颈无明显异常或轻度糜烂;活检组织学检查常合并宫颈高级别鳞状上皮内瘤变（CIN3）或宫颈管黏膜原位腺癌（AIS）。行宫颈锥切或单纯子宫切除术。镜下：瘤细胞体积较小,形态一致,排列紧密,细胞质少,胞核深染,核分裂不活跃;呈小巢状、条索状在宫颈间质内浸润性生长,巢周围细胞呈栅栏状排列,部分细胞巢中央见腺腔样结构及鳞状分化,无明显间质反应。浸润深度2-7mm,宽度3-7mm。随访1-8年无异常发现。病理诊断：宫颈腺样基底细胞癌。结论：ABC常伴有CIN3和AIS,诊断应与腺样囊性癌（ACC）等宫颈肿瘤相鉴别。

pIRES2-EGFP-hIL-10真核表达载体的构建及鉴定

目的构建带有报告基因EGFP的hIL-10真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增出IL-10基因,构建IL-10基因和报告基因EGFP基因真核表达载体pIRES2-EGFP-hIL-10,经PCR、酶切、测序等方法进行鉴定,紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度。结果酶切、PCR及测序证实pIRES2-EGFP-hIL-10载体序列正确。结论成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP-hIL-10,可为后续器官移植免疫耐受的研究奠定基础。

10例肝脏上皮样血管内皮细胞瘤临床病理分析及特征总结

目的探讨原发性肝脏上皮样血管内皮细胞瘤(HEHE)的临床病理学特征、免疫组化、分子病理特征及鉴别诊断。方法回顾性分析10例HEHE患者的临床资料、组织病理学与免疫组化特征以及基因检测结果。结果10例HEHE患者中,男性5例,女性5例,其中大部分临床表现为腹部隐痛不适、腹胀、恶心伴疲倦乏力,少数病例为体检时发现肝脏占位。7例为肝内多发结节,3例为单发结节,其中2例伴肺部转移。镜下肿瘤细胞呈梭形或上皮样,排列呈条索状、巢片状,高倍镜下观察肿瘤细胞具有嗜酸性胞质,胞质内可见特征性空泡形成,肿瘤间质常伴黏液样变性,细胞核具有轻至中度异型性,偶见核分裂象和坏死。免疫组化结果:肿瘤细胞表达CD31、CD34、ERG、FⅧ等血管源性标志物,Ki-67增殖活性较低。其中1例行荧光原位杂交(FISH)结果检测到TFE 3基因断裂阳性。结论HEHE为少见的血管源性恶性肿瘤,临床表现及辅助检查通常无特异性,需结合组织学、免疫组化及基因检测等诊断。

基层医院临床病理医师规范化培训教学方法探索

基层医院缺乏全面开展病理检测与诊断的能力和手段,普遍存在着基础薄弱、理论与实践能力较差等问题。基于这一认识,笔者结合我们的教学实践,探讨了针对基层医院病理科住院医师规范化培训的具体方法。本教学方法为以双导师制为保障,深入的临床病理知识学习为基础,广泛的临床病理实践为关键,多种培训机制相结合,注重人文教学的综合培训方法。经过近年来的应用与后期反馈,参与培训的医师专业技术水平得到显著提升,培训学员实际病理诊断水平提升明显。目前已完成培训的医师大多已经成为了当地医院病理诊断的骨干,为基层医疗水平的全面提升提供坚实的支撑。现将我们的教学经验进行总结,以期能够为国内临床病理医师规范化培训实践起到借鉴作用。

胃血管球瘤4例临床病理分析及文献复习

目的探讨胃血管球瘤(gastric glomus tumor,GGT)的临床病理学特征、鉴别诊断、治疗与预后。方法回顾性分析4例胃血管球瘤患者的临床病理资料,总结其临床病理学特点、免疫组化等,并复习相关文献。结果4例胃血管球瘤患者均为女性,中位年龄55岁。4例患者均有明显的临床症状,主要表现为恶心呕吐、间断性腹部不适,胀痛、纳差,1例病人出现间断性黑便。组织学上,肿瘤细胞呈实性片状生长,分布于血管之间或围绕血管周围,血管扩张。瘤细胞呈圆形,胞浆透明或嗜酸性,细胞核圆形,染色质细腻,核仁模糊,核分裂<1个/50HPF。免疫组化显示,肿瘤细胞表达Vimentin、SMA、calponin、H-caldesmon、Ⅳ型胶原。结论胃血管球瘤是一种胃肠道少见的具有血管周围血管球体细胞特点的间叶性肿瘤,好发于中老年女性,预后较好,结合临床和组织病理学特征及免疫组化标记,可做出准确的病理诊断。

睾丸原发性非霍奇金淋巴瘤20例临床病理分析

目的探讨睾丸原发性淋巴瘤(PTL)的临床病理学特征、鉴别诊断、治疗及预后等。方法回顾性分析20例PTL患者的临床病理资料,总结其临床病理特点、免疫表型等,并复习相关文献。结果20例PTL病例中,患者年龄44~80岁,中位年龄65.5岁,均表现为睾丸不同程度的肿大。20例PTL中17例(85.0%)为弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL),且均为非生发中心起源(non-GCB)型。2例(10.0%)为套细胞淋巴瘤(MCL),其中1例为CD5阴性的套细胞淋巴瘤,1例为母细胞变异型套细胞淋巴瘤。1例(5.0%)为外周T细胞淋巴瘤,非特殊型(PTCL,NOS)。结论PTL是一种罕见的结外淋巴瘤,老年人多见,临床主要表现为睾丸无痛性肿大,PTL进展快、预后差,结合组织病理学特点及免疫组织化学检查可作出明确诊断。