探讨HE4、TSGF和CA125等血清肿瘤标志物联合检测对卵巢癌的诊断效果

目的探讨卵巢癌诊断中HE4、TSGF和CA125等血清肿瘤标志物联合检测的作用。方法研究组所选研究对象为2015年10月至2016年10月本院收治的卵巢恶性肿瘤患者，共纳入病例数为30例；对照组所选研究对象为同期收治的卵巢良性疾病患者，共纳入病例数为40例。两组研究对象均在术前实施人附睾蛋白4(HE4)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)水平检测，观察检测结果，并对组间差异进行对比。结果研究组HE4、TSGF、CA125、CEA水平均高于对照组，结果有显著性差异(P<0.05)；在研究组中，HE4、TSGF、CA125、CEA联合检测灵敏度明显高于单一检测，结果有显著性差异(P<0.05)。结论在卵巢癌患者的临床诊断过程中，实施HE4、TSGF和CA125等血清肿瘤标志物联合检测，能提升诊断灵敏度，值得推广应用。

血清CA125、HE4联合影像学检查在上皮性卵巢癌术后复发中的诊断应用

目的探讨血清糖类抗原(CA125)、人附睾蛋白4(HE4)和影像学检查在上皮性卵巢癌术后复发中的诊断应用价值。方法在医院2015年7月至2016年9月期间诊治的上皮性卵巢癌术后复发患者中抽取79例作为研究对象，并分别应用血清CA125、HE4、影像学检查予以诊断，统计三种诊断方式单独使用时、联合应用时在上皮性卵巢癌检测中的阳性率。结果血清CA125、HE4、影像学联合诊断方案在本组上皮性卵巢癌术后复发病例中的检测阳性率是98.76%，与血清CA125的56.96%、HE4的59.49%、影像学检查的87.34%相比，均存在统计学差异(均P＜0.01)。结论血清CA125、HE4和影像学检查联合应用于上皮性卵巢癌术后复发中的检出率较高，值得借鉴。

血清CA125、CA72-4、AFP联合检测在卵巢肿瘤鉴别诊断中的作用

目的：探析血清CA125、CA72-4、AFP联合检测在卵巢肿瘤鉴别诊断中的作用。方法：选取本院2015年10月至2016年10月接收的89例卵巢肿瘤患者和89例健康体检者资料，89例卵巢肿瘤中卵巢囊肿58例、卵巢癌31例，比对3组及卵巢肿瘤不同临床分期的CA125、CA72-4、AFP水平及联合检测的诊断价值。结果：卵巢癌的CA125、CA72-4、AFP水平(362.23±131.68)U/mL、(13.31±5.63)U/mL、(33.54±12.16)ng/mL比卵巢囊肿、健康者高，而卵巢囊肿的CA125、CA72-4、AFP水平(95.32±47.23)U/mL、(3.72±1.01)U/mL、(6.47±2.34)ng/mL则比健康者高；卵巢癌Ⅳ期的CA125、CA72-4、AFP水平(412.92±150.49)U/mL、(15.48±6.27)U/mL、(37.61±14.45)ng/mL比Ⅱ期、Ⅲ期高；三者联合检验的敏感度96.77%比单项测验CA125：74.19%、CA72-4：67.74%、AFP70.96%高(P＜0.05)。结论：血清CA125、CA72-4、AFP联合检验在卵巢肿瘤中具较高的诊断价值。

miR-496靶向调控DCUN1D1抑制宫颈癌发生发展机制研究

目的研究miR-496调控DCUN1D1对宫颈癌发生发展的影响,揭示miR-496在宫颈癌中的作用。方法免疫荧光和Western blot检测DCUN1D1在宫颈癌组织和癌旁正常组织中的表达水平;采用qRT-PCR检测DCUN1D1和miR-496在不同分期宫颈癌组织中的表达水平;筛选并验证miR-496的靶基因;q RT-PCR和Western blot检测miR-496 mimics对DCUN1D1表达的影响;CCK8和Transwell检测miR-496和DCUN1D1对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响;构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,检测miR-496对移植瘤生长的影响。结果 miR-496在癌组织中表达水平较癌旁组织低表达,其中宫颈癌的临床分期越高,DCUN1D1的mRNA表达水平越高,而miR-496的表达水平越低(P <0.05);miR-496能通过结合DCUN1D1的3′-UTR抑制DCUN1D1的表达,miR-496过表达细胞DCUN1D1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P <0.05);相比对照组,miR-496组能抑制HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,但相比miR-496组,miR-496+DCUN1D1组细胞的迁移和侵袭能力增强(P <0.05);在宫颈癌裸鼠移植瘤模型中,miR-496能下调DCUN1D1并抑制移植瘤生长(P <0.05)。结论miR-496和DCUN1D1异常表达与宫颈癌发病机制相关,miR-496通过调控DCUN1D1抑制宫颈癌发生发展。

miR-496通过SFMBT1抑制子宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的相关研究

背景与目的:微小RNA(microRNA,miRNA)已被证实与子宫颈癌的发病相关。分析miR-496与SFMBT1的相互关系,阐明miR-496在子宫颈癌中的作用及其机制。方法:预测并验证miR-496的靶基因。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-496 mimics对SFMBT1表达的影响。使用免疫荧光和Western blot分析SFMBT1在子宫颈癌组织中的表达变化。细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法和transwell实验分别检测miR-496和SFMBT1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察miR-496在BALB/c裸小鼠移植瘤模型中对肿瘤生长的影响。结果:相比癌旁正常组织,SFMBT1在子宫颈癌组织中的mRNA(1.69±0.23 vs 1.00±0.12)以及蛋白(1.73±0.28 vs 1.00±0.15)均呈高表达,miR-496能通过特异性结合SFMBT1的3’-UTR抑制SFMBT1的mRNA(0.81±0.07 vs 1.00±0.15)以及蛋白表达(0.26±0.02 vs 1.00±0.14);细胞实验中相比对照组,miR-496 mimics处理组能抑制HeLa细胞增殖(1.39±0.10 vs 2.01±0.09)、迁移(40.50±3.17 vs 28.42±1.21)和侵袭能力(15.03±1.67 vs 25.71±2.56),但相比miR-496 mimics处理组,miR-496+SFMBT1处理组迁移(33.21±2.66 vs 19.28±1.50)和侵袭能力增强(30.11±2.73 vs 15.03±1.67)。子宫颈癌裸小鼠移植瘤模型发现,相比对照组miR-496组裸小鼠中移植瘤体积、重量均明显降低。miR-496组裸小鼠中病变程度、SFMBT1表达和Ki-67增殖指数均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-496通过靶向调控SFMBT1抑制子宫颈癌细胞的生物学行为和裸小鼠移植瘤的生长。

miRNA-496通过mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为及裸鼠移植瘤的生长

目的:探讨miR-496是否通过靶向mTOR影响宫颈癌HeLa细胞的周期、增殖、迁移、侵袭以及裸鼠移植瘤的生长。方法:选取2020年12月至2021年12月期间于河北医科大学第四医院接受手术的74例宫颈癌患者的肿瘤标本和癌旁组织标本,qPCR、WB法和免疫荧光法检测宫颈癌组织中miR-496和mTOR在mRNA和蛋白水平的表达。利用TargetScan数据库预测miR-496的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。将HeLa细胞按转染物不同分为对照组、miR-496 mimic组和miR-496 mimic+pMIR-mTOR组,CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测miR-496和mTOR对HeLa细胞增殖、周期、迁移和侵袭的影响。将对照组、miR-496 mimic组HeLa细胞接种至BALB/c裸鼠皮下构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,21 d后处死小鼠,剥离小鼠肿瘤组织并称取瘤质量,免疫荧光法和WB法检测miR-496过表达对移植瘤组织中mTOR和Ki67表达的影响。结果:在宫颈癌组织中,miR-496呈低表达,而mTOR mRNA和蛋白呈高表达。miR-496能够靶向结合mTOR mRNA的3’-UTR。与对照组和miR-496 mimic+pMIR-mTOR组相比,miR-496 mimic组HeLa细胞的miR-496水平和S期细胞比例均显著升高,而增殖水平、迁移和侵袭细胞数均显著降低(均P<0.01)。成功构建宫颈癌裸鼠移植瘤模型,接种21 d后,miR-496 mimic组移植瘤质量、移植瘤组织中mTOR和Ki67的表达水平均显著低于对照组(均P<0.01)。结论:miR-496在宫颈癌组织中呈低表达,miR-496过表达可通过靶向调控mTOR抑制HeLa细胞的恶性生物学行为和裸鼠移植瘤的生长。

IL-6对卵巢癌细胞迁移和侵袭影响及机制探讨

目的由于卵巢癌早期无法诊断以及在腹腔内的高转移性导致该病具有较高的死亡率。白细胞介素6(IL-6)是一种重要的炎性因子,其高表达及异常信号与上皮性卵巢癌的预后密切相关。本研究旨在探讨IL-6对卵巢癌A2780和SKOV-3细胞迁移和侵袭能力的影响以及相关的信号通路。方法采用划痕以及基质胶侵袭实验等检测IL-6对人卵巢癌细胞A2780及SKOV-3的迁移、侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分析IL-6对基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达,以及对p38和细胞核因子κB(NF-κB)信号通路的影响;将p38和NF-κB信号通路抑制剂分别作用于A2780和SKOV-3细胞,基质胶侵袭实验分析在IL-6处理下抑制剂对细胞侵袭能力的影响,蛋白质印迹法检测MMP-2和MMP-9的表达。结果 IL-6处理24h后,卵巢癌细胞A2780和SKOV-3伤口愈合能力分别为65.51±6.09和58.21±5.14,相对于对照组的24.51±2.27和18.86±2.02增强,t值分别为15.093和15.582,均P<0.05;A2780和SKOV-3侵袭能力分别为3.42±0.25和6.50±0.54,相对于对照组的1.01±0.05和1.05±0.04增强,t值分别为6.125和17.792,均P<0.05。A2780和SKOV-3细胞中,MMP-2的mRNA水平在IL-6处理下分别增加2.6和2.1倍,MMP-9分别增加1.7和1.3倍;MMP-2的蛋白水平分别增加2.5和1.9倍,MMP-9分别增加1.6和1.5倍,P<0.05。IL-6可显著增加A2780和SKOV-3细胞中p38磷酸化,分别增加了4.1和3.7倍;p65的磷酸化分别增加了2.9和2.6倍,P<0.05。与IL-6处理相比,联合SB203580抑制剂作用于A2780和SKOV-3细胞后侵袭能力分别下降为80.9%和90.3%,联合PDTC抑制剂作用后侵袭能力分别下降为81.1%和89.8%,P<0.05;同时抑制MMP-2和MMP-9的表达,差异均有统计学意义,P<0.05。结论 IL-6通过p38/NF-κB信号通路协调激活基质金属蛋白酶的表达促进卵巢癌细胞的迁移和侵袭,为卵巢癌的治疗提供可靠靶点。