微型月季‘玲之妖精’的离体培养研究

为促进微型月季‘玲之妖精’的种苗规模化生产以及后续利用细胞工程方法进行种质改良,以微型月季‘玲之妖精’为试验材料,利用组织培养方法进行离体培养研究,主要包括不同外植体消毒灭菌处理、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、腋芽萌发诱导、腋芽继代增殖以及生根诱导等。结果表明,叶片外植体合适的灭菌方式为75%乙醇消毒30 s+0.1%升汞灭菌5 min,适合的愈伤组织诱导培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.5 mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)2.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,愈伤组织增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;茎段外植体合适的灭菌方式为75%乙醇消毒30 s+0.1%升汞灭菌8 min,适合腋芽萌发的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,腋芽继代增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;生根适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L。本研究为微型月季品系改良和遗传转化提供参考。

微型月季小伊甸园组织培养研究

为解决微型月季小伊甸园规模化扩繁以及利用细胞工程进行后续品种改良等问题,对其进行组织培养研究。结果表明,以带芽茎段为外植体时,合适的灭菌方式为75%乙醇消毒30 s后升汞浸泡灭菌8 min;适合腋芽萌发诱导的培养基为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA33 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,pH 5.8;适合腋芽增殖继代的培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,pH 5.8;适宜生根的培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L+活性炭1 g/L,p H 5.8;组培苗合适的移栽基质为蛭石,成活率达95%,且植株长势良好。

生物类专业植物细胞工程实验教学改革探讨

该文通过优化教学形式、集中技能培训、鼓励学生自主选题结合开放式指导以及改革课程考核方式等,对生物类专业植物细胞工程实验课程进行了改革探索,不仅提升了学生的专业技能和科研创新能力,而且提高了教学质量。

木通愈伤诱导及腋芽萌发研究

通过对木通愈伤诱导及腋芽萌发的关键因素研究,结果表明,经75%乙醇消毒1min,升汞灭菌10min,可得到无菌外植体,接种至MS+2,4-D 5.0mg/L+6-BA 0.1mg/L+活性炭0.1g/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L的培养基中进行避光培养,可得到愈伤并有效抑制褐化,腋芽萌发时可将无菌腋芽茎段接种至MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0,2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L中进行诱导。

三叶木通愈伤诱导及分化研究

三叶木通(Akebia trifoliate(Thunb.)Koidz.)具有很高的开发应用价值,其优良品系组织培养快繁体系的建立尤为重要。以三叶木通幼嫩枝条及叶片作为外植体,研究了三叶木通无菌外植体获得、愈伤诱导以及胚状体诱导等过程,同时分析了抑制愈伤组织褐化的影响因素。结果表明:外植体经75%乙醇处理1 min,0.1%升汞灭菌12 min,再经无菌水浸泡处理3 min后,接种至MS+NAA 0.4 mg·L^-1+2,4-D 4.0 mg·L^-1+活性炭1.0 g·L^-1+蔗糖30.0 g·L^-1+琼脂6.0 g·L^-1培养基中,避光培养可得到愈伤组织,并能有效抑制愈伤组织褐化。愈伤组织接种至MS+NAA 0.4 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1+蔗糖30.0 g·L^-1+琼脂6.0 g·L^-1的培养基中可得到胚状体,然后接种至无激素的MS培养基中,可以得到种苗。

东方百合‘索邦’的离体培养研究

东方百合‘索邦’作为市售主流鲜切花百合品种,具有巨大的市场潜力。为满足市场需求,利用花器官作为初始材料,对东方百合‘索邦’离体培养涉及的愈伤组织诱导、丛生芽增殖及生根培养等相关技术进行研究。结果表明,子房为合适的初始诱导外植体,进一步扩繁诱导愈伤组织时适宜选用叶片下部或鳞茎片为外植体,合适的愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg·L^-12,4-D+0.2 mg·L^-16-BA+30 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂,pH 5.8。丛生芽增殖培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂,pH 5.8。生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂,pH 5.8。结果为进一步完善东方百合‘索邦’的离体培养体系,进行优质种球的规模化生产提供基础。

三叶半夏丛生块茎途径扩繁及块茎分离技术研究

三叶半夏为传统常用中药材,有超过1 000 a的药用史。自然状态下繁殖效率较低,野生资源不足,因此人工繁殖半夏以满足社会需求就显得尤为重要。为解决以上问题,结合半夏块茎生长特点及传统组织培养操作获得了半夏的"丛生块茎途径",并考查了增殖条件、继代次数、变异情况、诱导分离基质等特性,结果表明:以Ms+6-BA1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L进行继代培养,前22代半夏丛生芽保持约15倍的增殖倍数,可作为扩繁的材料,同时需及时剔除变异组培苗,得到的丛生块茎种植于细沙或蛭石中,60 d后断水促使倒苗,筛除基质后即可得到大量栽培用单颗半夏块茎。

三叶半夏种质资源扩繁及保存研究

目的:通过对三叶半夏扩繁和保存方法的研究,为三叶半夏种质资源的保育和开发利用提供技术支撑。方法:首先,通过灭菌条件筛选、愈伤诱导及丛生芽诱导等进行扩繁条件探索;其次,通过设置不同基本培养基、蔗糖浓度、不同温度和光照强度等条件探索合适的种质保存条件;最后,探索了休眠块茎唤醒方式和丛生芽再诱导方法,为种质资源再扩繁提供基础。结果:以叶柄为外植体,升汞灭菌12 min后,接种至添加2,4-D的培养基中可诱导疏松愈伤组织。外植体接种至MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,pH 5.8中可进行丛生芽诱导。合适的种质保存基本培养基为MS和N6培养基;合适的蔗糖浓度为30 g/L,过低或过高均不利于种质保存;在丛生块茎诱导时需要提供足够的温度和光照,低温及避光条件不利于种质保存。待丛生芽自然倒苗休眠后可进行长达1~2年的离体保存。对休眠块茎进行唤醒诱导时可采用切割块茎后再接种的方式。萌发出来的叶柄直接进行丛生芽诱导增殖,而块茎则接种至MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,pH 5.8中进行再分化诱导丛生芽。诱导出来的丛生芽进行规模化扩繁或继续进行离体保存。结论:通过对三叶半夏的种质扩繁,筛选合适的条件得到休眠丛生块茎,可对三叶半夏进行长时间的离体保存,而后唤醒和再次诱导的相关研究,为其种质资源保存、利用提供技术基础。